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ESTUDIO GENÉTICO Y FUNCIONAL DE LA ENVOLTURA DEL VIH-1 DE CONTROLADORES VIRÉMICOS. Lorena Martínez-Prats 1 , Sagrario Zurita 1 , Paquita Gutiérrez 1 , Federico Pulido 2 , Rafael Rubio 2 , Rafael Delgado 1
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ESTUDIO GENÉTICO Y FUNCIONAL DE LA ENVOLTURA DEL VIH-1 DE CONTROLADORES VIRÉMICOS Lorena Martínez-Prats 1, Sagrario Zurita 1, Paquita Gutiérrez 1, Federico Pulido 2, Rafael Rubio 2, Rafael Delgado 1 Hospital Universitario 12 de Octubre, Departamento de Microbiología (1) y Unidad de VIH (2), Madrid • OBJETIVOS • Caracterizar genética y funcionalmente la envoltura del VIH-1: • Papel de los anticuerpos neutralizantes en el control de la infección por VIH-1 • Medir la actividad neutralizante del plasma frente a VIH-1 en diferentes momentos de la infección. • MATERIAL Y MÉTODOS: • 9 pacientes LTNP: • 5 pacientes con 50<CV<2000 cp/mL (Controladores Virémicos) • 4 pacientes con CV<50 cp/mL (Elite Controlers). • CLONAJE DE LA ENVOLTURA DEL VIH-1 EN UN VECTOR DE EXPRESIÓN • SECUENCIACIÓN DE LA REGIÓN gp120 y gp41 DEL VIRUS VIH-1 • PARTÍCULAS VÍRICAS PSEUDOTIPADAS CON LAS ENVOLTURAS DEL VIH-1 • ENSAYO DE NEUTRALIZACIÓN
RESULTADOS Fig. 1A P= 0.16 • El análisis genético de las secuencias de la Env de LTNP (n=9) y el grupo control de subtipo B (n=149) no fue significativamente diferente. • En 4/9 LTNPno actividad neutralizante significativa del plasma autólogo (IC50 <1/100). • En 5/9 LTNP actividad neutralizante significativa del plasma autólogo: PT9 (IC50 1/512), PT10 (IC50 1/633-1/909), PT12 (IC50 1/627), PT15 (IC50 1/277-1/773) y PT36 (IC50 1/585). • 3/5 LTNP no actividad neutralizante heteróloga. • 2/5 LTNP (Controladores Virémicos) PT10 y PT12: actividad neutralizante plasmática significativa vs panel 16 aislados subtipo B y cepas de referencia subtipo B (IC50 media de 1:553 y 1:506, respectivamente).
CONCLUSIONES • Todas las secuencias de la env obtenidas fueron funcionales en el ensayo de infectividad. • En ninguna de las secuencias de la env analizadas detectamos hipermutación. • El análisis genético de las secuencias de la env de pacientes LTNP no fue significativamente diferente comparado con el grupo control subtipo B. • En 3/5 pacientes Controladores Virémicos y 2/4 pacientes Elite Controlers la actividad neutralizante frente al virus autólogo fue significativa. • En dos de los pacientes Controladores Virémicos, se detecta además una vigorosa y mantenida respuesta neutralizante frente un panel de virus heterólogos de subtipo B y cepas de referencia subtipo B. • La contribución de esta respuesta de anticuerpos para el control de la replicación viral y la progresión de la enfermedad está por determinar.