1 / 19

Hal akut toxicitási teszt (OECD 203)

Hal akut toxicitási teszt (OECD 203). Készítette: Pomucz Anna Boglárka Gruiz Katalin Környezettoxikológia előadásához. Teszt jellemzése. A teszt során halakat használunk a vízhez adott, vizsgálni kívánt minta toxicitásának teszteléséhez. A mérés végpontja, a halak pusztulása illetve túlélése.

anthea
Download Presentation

Hal akut toxicitási teszt (OECD 203)

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript


  1. Hal akut toxicitási teszt(OECD 203) Készítette: Pomucz Anna Boglárka Gruiz Katalin Környezettoxikológia előadásához

  2. Teszt jellemzése A teszt során halakat használunk a vízhez adott, vizsgálni kívánt minta toxicitásának teszteléséhez. A mérés végpontja, a halak pusztulása illetve túlélése. A vizsgálat időtartama 96 óra.

  3. A teszthez ajánlott fajok * Kezdőoldali képen

  4. Zebrahal, Brachydanio rerio Forrás: http://blogs.nature.com/nm/spoonful/2008/03/

  5. A teszthal A vizsgálatokhoz egy vagy több faj is alkalmazható. A teszthez használt halfajtákat gyakorlati kritériumok alapján érdemes megválasztani: egész évben könnyen beszerezhető legyen, problémamentesen fenntartható legyen, a vizsgálat céljainak megfelelő legyen, továbbá figyelembe kell venni minden olyan gazdasági, biológiai vagy ökológiai tényező, amelynek bármilyen hatása lehet. A halaknak jó egészségi állapotban kell lenniük, és mindenfajta látható testi hibától mentesnek kell lenniük

  6. A teszthal 2. A halakat legalább 12 nappal a vizsgálat megkezdése előtt be kell szerezni és a laborban fenntartani. A vizsgálatot megelőző hét napban olyan minőségű vízben kell tartani a halakat, amilyenben a teszt is zajlani fog és az alábbi feltételeknek kell teljesülni: • világítás: napi 12–16 órás megvilágítás, • hőmérséklet: az adott fajnak megfelelő • oldott oxigén koncentrációja: a levegőtelítettségi érték legalább 80 %-a, • etetés: háromszor hetente vagy naponta, 24 órával a teszt megkezdése előttig

  7. Szivárványos guppifajták: Poecilia reticulata Forrás: http://diszhalak-oldala.hupont.hu/11/megtobb-kep

  8. Méréshez szükséges készülékek Minden készüléket kémiailag inert anyagból kell készíteni: • oxigénmérő, • vízkeménység meghatározására szolgáló berendezés, • megfelelő készülék a hőmérséklet szabályozásához.

  9. Hasznos információk a vizsgált anyagról • az anyag vízoldékonysága • gőznyomása • kémiai szerkezete • az anyag tisztasága • kémiai stabilitása • disszociációs állandói • biológiai lebonthatósága A fentiek fontos információk annak érdekében, hogy a legmegfelelőbb vizsgálati módszert lehessen kiválasztani (statikus, félstatikus vagy átfolyásos módszer) és a vizsgálat időtartama alatt a vizsgált anyag kielégítően állandó koncentrációja biztosítható legyen.

  10. Vizsgálat érvényessége Ahhoz, hogy a vizsgálat érvényes legyen, a következő feltételeknek kell teljesülniük: • A kontrollcsoportban a kísérlet végéig a halpusztulásnak nem szabad 10%-nál nagyobbnak lennie (vagy maximum egy hal pusztulhat el, ha tíznél kevesebb halat használnak). • Állandó feltételeket kell fenntartani amennyire csak lehet az egész vizsgálat során, és ha szükséges, félig statikus vagy átfolyásos eljárásokat kell alkalmazni. • Az oldott oxigén koncentrációjának mindvégig nagyobbnak kell lennie, mint a levegőtelítettségi érték 60%-a. • A vizsgált anyag koncentrációit a kísérlet során mindvégig a kezdeti koncentráció 80%-án belüli értéken kell tartani.

  11. Kékkopoltyús naphal: Lepomis macrochirus Forrás: http://www.cacaponriver.org/news/newsletter2003-3.htm

  12. A vizsgálat menete

  13. Alkalmazandó módszer meghatározása Típusát tekintve háromféle eljárás használható: • Statikus vizsgálat: Ez olyan toxicitásvizsgálat, amelyben a vizsgált oldat nem áramlik (az oldatok mindvégig változatlanok maradnak). • Félstatikus vizsgálat: A vizsgált oldat áramlása nélküli vizsgálat, amelynél rendszeresen, adagonként ki kell cserélni a vizsgált oldatokat hosszabb időtartamok (pl.: 24 óra) eltelte után. • Átfolyásos vizsgálat: Olyan toxicitásvizsgálat, amelyben a vizet állandóan cserélik a vizsgálati kamrákban.

  14. Hígítási sor elkészítése El kell készíteni a szükséges erősségű törzsoldato(ka)t majd a vizsgálni kívánt koncentrációkat a törzsoldat hígításával kell elkészíteni. A hígításhoz használható jó minőségű természetes víz vagy művíz illetve ivóvíz is, melynek keménysége 10 és 250 mg/l közötti (CaCO3-ra meghatározva), pH-ja pedig 6,0 és 8,5 között van. Ultrahangos diszpergálás, szerves oldószerek, emulgeáló- vagy diszpergálószerek használhatók alacsony vízoldékonyságú anyagok törzsoldatainak elkészítéséhez. Valamilyen segédanyag használata esetén, a kontrollhalakat is ki kell tenni a segédanyag ugyanolyan koncentrációjának, mint amelyet a vizsgálati sorozatokban alkalmaztunk. Segédanyag maximum koncentrációja:100 mg/liter a vizsgált közegben. A vizsgálatot a pH-érték beállítása nélkül kell végrehajtani. Ha létezik bizonyíték a pH-érték jelentős változására, ajánlatos a vizsgálat megismétlése a pH-érték beállításával.

  15. Teszt-körülmények • Teszt időtartam: 96 óra, • állatok száma: koncentrációnként és a kontrollban is legalább 7 egyed • egyedsűrűség: 1 g hal/liter ajánlott a statikus és a félstatikus vizsgálatokhoz; az átfolyásos rendszerekhez elfogadható ennél nagyobb egyedsűrűség is • vizsgált koncentráció: legalább 5 olyan koncentráció esetén szükséges a vizsgálat, amelyek mértani sorozatának tényezője nem haladja meg a 2,2-et és szükséges a kontroll minta vizsgálata is • világítás: 12–16 órás megvilágítás naponta, • hőmérséklet: a használt fajtáknak megfelelő, de minden esetben ± 1 °C-on belül, • oldott oxigén koncentrációja: a levegőtelítettségi érték nem kevesebb, mint 60 %-a, levegőztetés használható, ha nem okoz veszteséget a vizsgált anyag mennyiségében • etetés: nincs • zavarás: a halak viselkedését befolyásoló tényezőket ki kell zárni.

  16. Észrevételek A halakat a teszt megkezdését követő 3. és 6. órában, majd 24., 48., 72. és 96. órában meg kell vizsgálni, a pusztulásokat feljegyezni és az elpusztult halakat el kell távolítani. A halak akkor tekinthetők élettelennek, ha a farokúszó érintése nem vált ki reakciót, és nem látható semmilyen mozgás. Nyilvántartást kell vezetni a látható rendellenességekről (például egyensúlyvesztés, az úszási viselkedés és a légzés változásai, pigmentáció stb.). Naponta mérni kell a pH-értéket, az oldott oxigén koncentrációt és a hőmérsékletet.

  17. Adatok értékelése Minden olyan időtartamhoz, amikor fel lettek jegyezve megfigyelések (24, 48, 72 és 96 óra) meg kell határozni a kontrollhoz viszonyított százalékos pusztulásokat, majd ezt a koncentráció logaritmusának függvényében fel kell rajzolni. H=pusztulási/letlitási százalék(%) N k=a kontrollban életben maradt állatok száma(db) Nminta =a mérendő mintában életben maradt állatok száma (db) Minden egyes megfigyelési időhöz meg kell becsülni az LC50-et (50%-os pusztuláshoz tartozó koncentráció) és a hozzá tartozó (p=0,95) megbízhatósági tartományt.

  18. Rizshal és rizshal-embriók: Oryzias latipes Forrás: http://www.biol.s.u-tokyo.ac.jp/users/hassei/English/research%20E/research%20E.html

  19. Forrás: • OECD GUIDELINE FOR TESTING OF CHEMICALS 203 –Fish, Acute Toxicity Test Kép: • http://1.bp.blogspot.com/_AamNOe-sLvQ/SXeIcwHoltI/AAAAAAAAACM/bvmpPvTKq4o/s320/Szivárványos+pisztráng.png

More Related