White spot syndrom virus ( wssv )

2. استاد مربوطه : آقای دکتر بهشتی مالتهیه کننده: ندا قبلهشماره دانشجوی : 900712678ساعت کلاس : 9:30 – 8 چهار شنبه

3. White spot syndrom virus(wssv)

4. هر ساله بیماری های ویروسی میگو باعث از بین رفتن تعداد زیادی میگو با ارزش هزاران دلار در مزارع پروشی در بسیاری از کشورها میشوند

5. بیماری لکه سفیدwhite spot disease که عامل آن ویروس WSSV و مخصوص میگو های پنائیده می باشد سندرم تائورا Taura syndrome- TSV که عامل آن ویروسی می باشد. بیماری سر زرد yellow head disease- YHV که عامل آن ویروسی می باشد. بیماری های ویروسی خطرناک و بسیار مهم مطرح شده میگو به وسیله OIE

6. در سال 1992 بیماری لکه سفید (wsd) به عنوان یک بیماری ویروسی میگو در کشور چین و سپس در کلیه کشورهای آسیایی و آمریکای لاتین گزارش گردید

7. در سال 1993 بیماری لکه سفید حدود 80% میگوهای پرورشی که ارزش معادل 1 میلیارد دلار داشت در اثر این بیماری از بین رفت و در تایلند خسارتی معادل 500 میلیون دلار وارد کرد و....... و در تیر ماه سال 81 مرگ میر شدیدی در میگوهای پرورشی آبادان اتفاق افتاد

8. این بیماری در کشورهای مختلف به نام های متفاوتی شناسایی گردیده در کشور ژاپن Rod shaped nuclear virus of penaeusJaponicus (RV – PJ) در کشور تایوان ectodermal and mesodermal baculovirus systemic (SE MBV) و در سال 1996 این بیماری به نام white spot syndrome disease (WSSD) نامیده شد

9. طیف میزبان: تمام سخت پوستان متعلق به راسته ده پایان (Decapoda) شامل میگوها،لابستر،خرچنگ، به این ویروس حساس هستند اما بیماری لکه سفید اساساً میگوهای پرورش خانواده Penaeidaeرا درگیر میکند.

10. انواع میگو ها میگوی صورتی Penaeussemisulcatus میگوی هندی panaeusindicus میگوی موزی penausmerguiensis میگوی سفید Metapenaeus میگوی خنجری Parapenaopsis stylifera

11. براساس نظریه کمیته تاکسونومی ویروسها (ICTV) ویروس بیماری لکه سفید از خانواده whispoviridae است

12. بیولوژی : این ویروس duble – stranded DNA DNA این ویروس از 150 kbp بزرگتر است و این ویروس به صورت بیضی یا نسبتاً گرد با پوشش 3 لایه (Trilamina) اندازه قطر آن 11±107 و اندازه طول ان 87±247 نانومتر اندازه طول کپسول پروتینی 17±59 نانومتر و قطر کپسول 15±162 نانومتر است

13. علایم بیماری به طور کلی این علایم به دو بخش کلی ضایعات ماکروسکوپی و ضابعات میکروسکوپی تقسیم می شوند • ضایعات ماکروسکوپی • حالت عمومی • میگوها بیحال و سست می شوند • توقف یا کاهش شدید مصرف غذا توسط جانور • در نواحی حاشیه استخر مشاهده میشود (3 روز پس از اولین یافته میتوان لاشه بدنشان را در کنار استخر مشاهده کرد)

14. 2. پوسته: وجود لکه های سفید در زیر کارا کاس 3. هپاتو پانکراس: رنگ مایل به قرمز پیدا می کند 4. اندامهای حرکتی میگو تغییر رنگ داده و به رنگ قرمز در می آید 5. کارا پاس میگو تغییر رنگ داده و به حالت قرمز در می اید 6. کاراپاس میگو به آسانی از ناحیه کوتیکول جدا میشود 7. رود میگوهای بیمار خالی از غذا است

17. ضایعات میکروسکوپی : با استفاده از میکروسکوپ نوری و میکروسکوپ الکترونیک ضایعات زیر قابل مشاهده است • پوسته • ابششها و معده • بافتهای هدف

18. مقاومت به ویروس این بیماری در هیچ یک از گونه های سخت پوستان گزارش نشد عفونت حاصل از ویروس لکه سفید به دو تیپ تقسیم میشود • تیپ 1 : عفونت حاده ایجاد میکند و موج بمرگ میر بالایی در حدود 2 هفته میشود • تیپ 2 : عفونت نهفته ایجاد میکند و این ویروس بدون هیچ نشانه ای از بیماری در بدن این موجودات زنده با قی می ماند( به عنوان حامل)

19. مراقبت از این بیماری در جهت پیشگیری و کنترل آن اهمیت ویژه ای دارد به همین منظور کنترل روزانه سلامتی میگوهای استخر ها برای مشاهده وجود هر گونه لکه سفید بر روی پوسته ضروری است بروز لکه سفید علاوه بر بیماری لکه سفید ویروسی در بیماری لکه سفید باکتریایی ناشی از باکتریBacillus Subtilis و افزایش PHاستخر ها هم رخ می دهد و لازم است قبل از هر گونه تصمیم گیری علت واقعی هر گونه لکه سفید دانسته شود

20. تشخیص بیماری WSSD • میکروسکوپ الکترونی • PCR • Bioassy

26. تکنیک های مختلف PCR • One step PCR • Two step PCR • LAMP technique

27. BIOASSAY برای این کار پاهای شناگر میگوهای مشکوک بریده در محلول TN هموژنیزه می شود. سپس با دور 1000 دور به مدت 10 دقیقه سانتریفوژ کرده ، محول رویی را با آب نمک 2% به میزان 0.1 رقیق کرده پس از فیلتراسیون با فیلتر سایز 2 میکرومتر به میگوهای سالم و عاری از ویروس WSSV تزریق می کنیم. در صورت بروز تلفات از روش های استاندارد برای تایید تشخیص بیماری استفاده میشود.

28. راههای انتقال بیماری WSSD • مولدین و لاروها آلوده به WSSD • ارگانیسمهای میزبان یا ناقل WSSD • ویروسهای آزاد و موجود در آب و انتقال آن به مزارع میگو • محصولات تازه ، یخ زده و یاخام سخت پوستان(میگو ، خرچنگ) ، همچنین آب کارگاههای عمل آوری میگو • تجهیزات ، وسایل نقلیه و انسان • حیوانات شکارچی (سگ ، پرندگان)

29. پیشگیری از بیماری لکه سفید WSSD الف) پیشگیری در مراکز تکثیر ب) پیشگیری در مزارع پرورشی • آماده سازی دقیق استخرها • آبگیری استخر • تهیه لارو سالم • ممانعت از ورود ناقلین ویروسی به مزرعه • استفاده از مواد محرک سیستم ایمنی در غذای میگو

30. استفاده از مواد محرک سیستم ایمنی در غذای میگوImmunostimulants میگوها ، سیستم انتی بادی و دفاع اختصاصی ندارند و این مواد باعث افزایس ایمنی غیر اختصاصی می شوند برای تقویت سیستم ایمنی در میگوها نیازی به استفاده از انتی ژن مشابه به عامل مورد نظر نیست Peptidoglycan(PG) از دیواره باکتری BifidobacteriumThermophilamتهیه شده است. PG ، مقاومت میگو به عفونت ویروسی را افزایش می دهد ولی ویروس در بدن میگو زنده باقی مانده و میگو همانند یک حامل عمل می کند میزان پیشنهادی این ماده 0.2 میلیگرم به ازای هر کیلو وزن میگو در روز است. استفاده بیش از حد این ماده میتواند باعث بروز مسمومیت و مرگ در میگو شود.

31. به حداقل رساندن خسارت WSSD اگر بیماری WSSDدر یک محلی مشخص شود ، بسته به میزان مرگ میر ، شدت بیماری ، میزان رشد و نسبت بازماندگی میگو ، روشهای زیر اتخاذ می کنیم: • جدا شدن WSSD با PCR در ماه اول دوره پرورش. • جدا شدن WSSD با PCR در ماه دوم دوره پرورش • جدا شدن WSSD با PCR در ماه سوم (همانند ماه دوم)

32. درمان درمان موفقی تاکنون برای غلبه بر بیماری لکه سفید گزارش نگریده است بنابراین باید تلاش کنیم تا انجا که امکان دارد تلفات این بیماری را کاهش دهیم جدیداً افزودن عصاره گیاهان دارویی ، ویتامین ها و محرکهای ایمنی زا به غذا و اصلاح نژادی باعث کاهش تلفات در مزارع پرورش میگو شده است.

33. تاثیر دمای آب بربروز بیماری لکه سفید در فوریه سال 2006 ،دکتر Victora Alday-Sanz از چهره های مطرح جهان در زمینه بهداشت آبزیان به همراه شماری از برجسته ترین متخصصین کشور بلژیک این آزمایش را انجام دادند

34. نمودار خطی میزان تلفات در تیمارهای تحت آزمایش با دوز پایین تلقیح ویروسی

35. نمودار تلفات در تیمارهای با دوز بالای تلقیح ویروسی

36. امید میرود با شناخت بهتر این بیماری و یافتن راههای درمان این بیماری شاهد کاهش تلفات باشیم

37. REFRENCES:1- M. Afsharnasab, R. Mortezaei, V. Yegane, B. Kazemi, Gross sign, Histopathology and polymerase chain Reaction observations of white spot syndrome virus in shrimp specific pathogen free litopeneausvannameiin Iran (2009), 4(6): 297-305.2- Desrina, Sarjito, D. Chilmawati, The white spot syndrome virus (WSSV) Load in Dendronereisspp, (2012), Vol 15, No 3, 270-275.3- Y. Miha, Y. lm kim, K. Hong Kim, Neutralization of white spot syndrome virus (WSSV) for penaeuschinensis by antiserum raised against recombinant VP 19, (2008), 29 (4) 573-217 (2008).4- افشاری نسب، م، اکبری. س، شناسایی ویروس ایجادکننده بیماری لکه سفید (WSSV) در میگوی سفید هندی (penausindicus) با استفاده از میکروسکوپ الکترونی، (1384)، شماره 66.