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REUNI: RNA de interferência. Universidade Federal de Santa Catarina Programa de Pós-Graduação em Bioquímica Apoio aos alunos de graduação. Regulação da expressão gênica: RNA interferência. REUNI: RNA de interferência. Dogma da Biologia. REUNI: RNA de interferência.

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REUNI: RNA de interferência

  • Universidade Federal de Santa Catarina
  • Programa de Pós-Graduação em Bioquímica
  • Apoio aos alunos de graduação

Regulação da expressão gênica:

RNA interferência

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REUNI: RNA de interferência

RNAs de interferência

  • RNA de interferência é um fenômeno em que RNAds reprimem a síntese protéica pela degradação do RNAm.
  • A degradação ocorre quando pequenos fragmentos de RNA poderão parear com outros RNAm em regiões internas complementares .
  • O RNAi tem sido utilizado no estudo de perda de função de diversos organismos Caenorhabditiselegans e Drosophila. Além disso, permite um screening genéticoverificandoperdagênica e rápidainteração com células de mamíferos.
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REUNI: RNA de interferência

Aplicações

  • Técnicas de BioMol:
  • RNAds sintéticos podem ser introduzidos em culturas celulares podendo suprimir genes específicos de interesse.
  • Efetivo em baixas cópias e altamente específico.
  • Medicina:
  • Utilizado nas terapias anti-virais em herpes tipo II
  • inibição da expressão de oncogenes (divisão celular)
  • redução da expressão de receptores protéicos contra HIV
  • silenciamento da hepatite A e B
  • doenças genéticas
  • Biotecnologia
  • Diminuição da expressão de genes de plantas que não tenham um interesse econômico como toxicidade ou baixa produção.
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REUNI: RNA de interferência

Em humanos: alvos já testados em modelos animais

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REUNI: RNA de interferência

Tipos de RNAs de interferência

  • Existem dois tipos de RNAi :
  • miRNA ou microRNA: são produtos da transcrição gênica em eucariotos com cerca de 70 pb, que possuem regiões internas autocomplementares , capazes de se parear formando um hairpin(grampo de cabelo).
  • siRNA ou small interferingRNA: são derivados de longas moléculas de RNA dupla fita de origem exógena (como aquelas provenientes de vírus de RNA).

Funções: conversão de Adenosina-> iosina

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REUNI: RNA de interferência

Mecanismo molecular de ação

  • O RNA dupla fita é reconhecido pela RNAse III – DICER gerando fragmentos de 21-23 nucleotídeos.
  • São geradas duas moléculas RNAss : passenger e fita guia. A passenger é degradada e o RNAss guia é incorporada ao complexo ribonucleoprotéico conhecido como RISC (RNA-inducedsilencingcomplex), a qual encontra fitas complementares de mRNA específicos, as quais degradam o RNAm alvo no centro de sua seqüência.

O mecanismo melhor estudado é o pós-transcricional, onde após o pareamento da do RNAi ao RNAm é induzida clivagem pela Argonauta, um componetende catalítico do complexo RISC.

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REUNI: RNA de interferência

A enzima Dicer corta RNA de dupla fita, de modo a formar siRNA ou miRNA.

Estes RNAs processados são incorporados no complexo RISC, o qual tem como alvo moléculas de RNA mensageiro, onde atuam impedindo o processo de tradução

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REUNI: RNA de interferência

RNA exógeno e RNA endógeno

  • RNA exógeno - genoma RNA viral: o RNA é rapidamente importado pra dentro da célula e clivado em pequenos fragmentos pela DICER.
  • RNA endógeno: o transcrito primário produzido no núcleo na forma de grampo, onde é levado ao citoplasma pela DICER.

Assim, ambos os RNAs exógeno e endógenos são convertido ao complexo RISC.

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REUNI: RNA de interferência

RNA exógeno e RNA endógeno