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LE SYSTÈME IMMUNITAIRE

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LE SYSTÈME IMMUNITAIRE. INTRODUCTION. Système de protection contre éléments vivants étrangers But: Assurer l’intégrité de l’organisme 2 tâches successives: Identifier l’agresseur => Nécessité de discriminer le soi et le non-soi => fonction de reconnaissance

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Presentation Transcript
introduction
INTRODUCTION
  • Système de protection contre éléments vivants étrangers
  • But: Assurer l’intégrité de l’organisme
  • 2 tâches successives:
    • Identifier l’agresseur => Nécessité de discriminer le soi et le non-soi => fonction de reconnaissance
    • Eliminer l’agresseur = Réponse
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La diversité du monde antigénique

Virus

Champignons

Vers

Bactéries

slide4

Les 4 problèmes à résoudre

  • Comment se construit le S.I.?

=> Le développement du S.I.

  • Comment remplit-il sa fonction ?

=> Le S.I. en action

  • Entre les mailles du filet immunitaire

=> Les agresseurs qui échappent au S.I.

  • Quand le système déraille

=> Les dysfonctionnements du S.I.

i l acquisition de l immunocomp tence 1 l immunopo se une branche de l h matopo se
I- L’acquisition de l’immunocompétence1- L’ « immunopoïèse », une branche de l’hématopoïèse

D’après fédération leucemie espoir

id es clefs
Idées-clefs
  • Cellule souche hématopoïétique: pluripotence + autorenouvellement
  • Lignées de différenciation
  • A chaque nœud de différenciation, le micro-environnement (matrice et facteurs solubles) détermine la décision.
  • Le choix d’une voie correspond à l’expression d’un facteur de transcription spécifique (Ikaros pour la lignée lymphoïde).

-> Expériences: Construire une souris knock-out pour le gène Ikaros et étudier son phénotype cellulaire par cytométrie de flux

slide7

I- L’acquisition de l’immunocompétence2- La lymphopoïèse: Diversifier puis sélectionner a- Production d’un répertoire diversifié de récepteurs à l’antigène

Un paradoxe génétique: Comment générer une infinité de protéines à partir d’un nombre limité de gènes?

  • Beadle et Tatum: Un gène une protéine
  • 25 000 gènes dans le génome humain
  • Or, capacité de production d’une diversité « infinie » de BCR et TCR

=>Théorie des réarrangements somatiques

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I-2-a

Principe

  • 2 ou 3 « urnes » (loci) contenant n segments géniques
  • Couper-coller = Réarrangement génique aléatoire entre 2 (ou 3) segments géniques prélevés dans chacune des urnes.
  • Lois des probabilités: Div = Nbre sg urne A x Nbre sg urne B x (Nbre sg urne C)

-> Expériences: Tonegawa, 1976

mise en vidence des r arrangements g niques dans la lign e b tonegawa 1976

I-2-a

Mise en évidence des réarrangements géniques dans la lignée B (Tonegawa, 1976)

Principe: Southern Blot à partir d’ADN de cellules embryonnaires ou de clones de LB

Cellules embryonnaires

ADN en configuration germinale

Clone B n°1

ADN réarrangés

Clone B n°2

Site de coupure par ER

Sonde radioactive

i 2 a
I-2-a

Mécanismes moléculaires des réarrangements géniques

  • Les recombinases

= RAG-1 et RAG-2

  • Les séquences signal de recombinaison:
  • RSS palindromiques

RSS

RSS

ADN en configuration germinale

RSS

RSS

ADN réarrangé

  • Expériences: Construire une souris RAG knock-out et étudier son phénotype cellulaire par cytométrie de flux
construire une souris knock out pour un g ne

Fiche-expérience

Construire une souris knock-out pour un gène

Etape 1: Obtenir des cellules souches embryonnaires dans lesquelles la version sauvage du gène ciblé (X) a été remplacée par une version inactive et sélectionnable grâce à une recombinaison homologue.

D’après Kuby, Ed Freeman

slide12

Fiche-expérience

Construire une souris knock-out pour un gène

Etape 2: Produire des souris KO à partir des cellules ES portant la version inactivée du gène

D’après l’IPBS

slide13

Fiche-expérience

Déterminer les phénotypes d’une population cellulairepar cytométrie de flux

CD4- CD8+

25 %

CD4+ CD8+

25 %

CD4- CD8-

40 %

CD4+ CD8-

10 %

application notre exp rience
Application à notre expérience

CD8

CD8

CD4

CD4

Souris normale

Souris RAG KO

Ganglion lymphatique

Conclusion?

slide15

I-2-a

Exemple de la lignée B: Réarrangements du gène codant pour la chaine légère d’Ig et synthèse de cette chaîne légère fonctionnelle

Précurseur B

LB

immature