第五章黄酮类化合物 Flavonoids

第五章黄酮类化合物 Flavonoids 第一节概述第二节理化性质及显色反应第三节提取与分离第四节检识与结构测定第五节结构研究中应注意的问题

色谱法、化学法、波谱法的综合运用 一、色谱法二、UV 三、1H-NMR 四、13C-NMR 五、MS 第四节检识与结构鉴定

一、色谱法在黄酮类结构确定中的应用 • PC • 双向色谱:用于分离黄酮类及其苷的混合物第一相：醇性展开剂n-BuOH-HAc-H2O(4:1:5上层，BAW) t-BuOH-HAc-H2O(3:1:1,TBA) 第二项：水或水性展开剂2%～6% HAc 3%NaCl HAc-浓HCl-H2O（30：3：10）检视：UV / 氨熏色变 / 2%AlCl3

一、色谱法在黄酮类化合物结构确定中的应用 • PC • 应用：不同结构类型黄酮，在不同展开系统中Rf值不同 • 醇性展开剂BAW 苷元〉单糖苷〉双糖苷 Rf > 0.7Rf < 0.7 • 2%-8% HAc、3%NaCl 苷元< 单糖苷 < 双糖苷 Rf≈ 0Rf 〉 0.5 • 3%-5%HAc 游离黄酮（醇）、查尔酮 Rf < 0.02 游离二氢黄酮（醇）、二氢查尔酮 Rf 在 0.1-0.3

一、色谱法在黄酮类化合物结构确定中的应用 • 硅胶TLC • 黄酮苷元展开系统：甲苯-甲酸甲酯-甲酸（5：4：1）——常用苯-甲醇（95：5）苯-甲醇-醋酸（35：5：5）氯仿-甲醇（85：15， 70：5）甲苯-氯仿-丙酮（40：25：35）丁醇-吡啶-甲酸（40：10：2） • 黄酮衍生物（甲醚化或乙酰化）展开系统苯-丙酮（9：1）苯-乙酸乙酯（75：25）

一、色谱法在黄酮类化合物结构确定中的应用 • 聚酰胺TLC • 常用展开剂：乙醇-水（3:2）水-乙醇-乙酰丙酮（4:2:1 水-乙醇-甲酸-乙酰丙酮（5:1.5:1:0.5）水饱和的正丁醇-醋酸（100:1，100:2）丙酮-水（1:1）丙酮-95%乙醇-水（2:1:2） 95%乙醇-醋酸（100:2）苯-甲醇-丁酮（60:20:20）

色谱法、化学法、波谱法的综合运用 一、色谱法二、UV 三、1H-NMR 四、13C-NMR 五、MS 第四节检识与结构鉴定

二、UV在黄酮类化合物鉴定中的应用 （一）黄酮类在甲醇中的UV特点（二）诊断试剂位移及其在结构测定中的意义

（一）黄酮类在甲醇中的UV特点——共性 苯甲酰基flavone (R=H) 桂皮酰基（benzoyl）flavonol(R=OH) (cinnamoyl) 带II, 220 ~ 280nm带I, 300 ~ 400nm

（一）黄酮类在甲醇中的UV特点 • 黄酮及黄酮醇类 • 查尔酮及橙酮类 • 异黄酮、二氢黄酮及二氢黄酮醇类

（一）黄酮类在甲醇中的UV特点—— 1.黄酮及黄酮醇类 • 共性：带Ⅰ、带Ⅱ均较强 • 区别：带Ⅰ位置不同黄酮：304~350nm 黄酮醇（3-OH游离）：352~385nm 黄酮醇（3-OH取代）：328~357nm Ⅰ Ⅱ

（一）黄酮类在甲醇中的UV特点—— 1.黄酮及黄酮醇类 • 母核氧取代，相应吸收带红移 • 带Ⅰ——母核氧取代↑，红移 • 带Ⅱ—— A环氧取代↑，红移 B环氧取代只影响峰形 4- O，单峰 3,4-二- O，双峰 • 母核上羟基甲基化、乙酰化、苷化，相应吸收带紫移

（一）黄酮类在甲醇中的UV特点—— 2.查尔酮及橙酮类 • 共性：带Ⅰ很强，为主峰带Ⅱ较弱，为次强峰 • 区别：带Ⅰ峰位不同查儿酮：340～390nm 橙酮： 370～430nm Ⅰ Ⅱ

（一）黄酮类在甲醇中的UV特点— 3.异黄酮、二氢黄酮（醇）类 • 共性：带Ⅱ为主峰带Ⅰ很弱，为主峰的肩峰 • 区别：带Ⅱ峰位不同 • 异黄酮： 245~278nm • 二氢黄酮（醇）： 270~295nm Ⅱ Ⅰ

Ⅱ为主峰，Ⅰ为肩峰 Ⅰ：异黄酮： 245~278nm 二氢黄酮（醇）：270~295nm Ⅰ、Ⅱ均较强 Ⅰ：黄酮： 304~350nm 黄酮醇：352~385nm Ⅰ主峰，Ⅱ为次强 Ⅱ：查儿酮：340～390nm 橙酮： 370～430nm 小结：在MeOH中的UV特点 ——确定黄酮类化合物的骨架类型

1 2 3 4 5 6 250 300 350 400 小结：在MeOH中的UV特点 ——确定黄酮类化合物的骨架类型

二、UV在黄酮类化合物鉴定中的应用 （一）黄酮类在甲醇中的UV特点（二）诊断试剂位移及其在结构测定中的意义

二、UV在黄酮类化合物鉴定中的应用 • 常用诊断试剂： • NaOMe • NaOAc • NaOAc/H3BO4 • AlCl3及AlCl3/HCl

（二）诊断试剂位移及其在结构测定中的意义—— 1.NaOMe • 碱性强，解离所有Ar-OH • 带Ⅰ， +40~60nm，强度不降 ——示有4-OH • 带Ⅰ， +50~60 nm，强度下降 ——示有3-OH, • 但无4-OH

MeOH - NaOMe - 200 300 400 500 （二）诊断试剂位移及其在结构测定中的意义—— 1.NaOMe +50nm,强度增加（不降）有4-OH

200 300 400 500 （二）诊断试剂位移及其在结构测定中的意义—— 1.NaOMe MeOH - NaOMe - +50nm，强度降低有3-OH，无4-OH

200 300 400 500 （二）诊断试剂位移及其在结构测定中的意义—— 2.NaOAc（未熔融） MeOH - NaOAc - • 碱性较弱，酸性强的Ar-OH解离 • 带Ⅱ，+5~20nm ——示有7-OH +12nm

（二）诊断试剂位移及其在结构测定中的意义—— 3. NaOAc/H3BO4 • 带Ⅱ ，+5～10nm —— A环有邻二Ar-OH • 带Ⅰ，+12～30nm —— B环有邻二Ar-OH

（二）诊断试剂位移及其在结构测定中的意义—— 4. AlCl3及AlCl3/HCl

稳定性 （二）诊断试剂位移及其在结构测定中的意义—— 4. AlCl3及AlCl3/HCl 3-OH,4-C=O 5-OH,4-C=O 邻二Ar-OH 不分解不分解分解 HCl AlCl3 络合物 AlCl3/HCl AlCl3 MeOH 判断邻二Ar-OH的有无、位置判断分子中3-OH,5-OH的有无

稳定性 （二）诊断试剂位移及其在结构测定中的意义—— 4. AlCl3及AlCl3/HCl 3-OH,4-C=O 5-OH,4-C=O 邻二Ar-OH 不分解不分解分解 HCl AlCl3 络合物 AlCl3/HCl ＝ AlCl3 无邻二Ar-OH AlCl3/HCl ≠ AlCl3 有邻二Ar-OH 带Ⅰ - 30~40nm B环有 - 50~60nm A、B环均可能有

AlCl3 —— AlCl3/HCl … -43nm B环有邻二Ar-OH

稳定性 （二）诊断试剂位移及其在结构测定中的意义—— 4. AlCl3及AlCl3/HCl 3-OH,4-C=O 5-OH,4-C=O 邻二Ar-OH 不分解不分解分解 HCl AlCl3 络合物 AlCl3/HCl ＝ MeOH 无3-OH，无5-OH AlCl3/HCl ≠ MeOH 可能有3-OH、5-OH 带Ⅰ + 35~55nm 只有5-OH + 60nm 只有3-OH + 50~60nm 可能同时有3-OH、5-OH + 17~20nm 除5-OH,尙有6-O-

小结：诊断试剂位移 ——黄酮类化合物的取代式样诊断试剂位移规律归属 NaOMe 带I红移40~60nm，强度不降示有4′-OH 带I红移50~60 nm，强度下降示有3-OH、但无4′-OH NaOAc 带II红移5~20nm 示有7-OH NaOAc / H3BO3带I红移12~30nm 示B环有邻二酚羟基带II红移5~10nm 示A环有邻二酚羟基

小结：诊断试剂位移 ——黄酮类化合物的取代式样诊断试剂位移规律归属 AlCl3/HCl谱图 = AlCl3谱图示无邻二酚羟基 AlCl3/HCl谱图 ≠ AlCl3谱图示有邻二酚羟基带Ⅰ紫移30~40 nm 示B环有邻二酚羟基带Ⅰ紫移50~65 nm 示A、B环均可能有邻二酚羟基 AlCl3/HCl谱图 = MeOH谱图示无3-及/或5-OH AlCl3/HCl谱图 ≠ MeOH谱图示可能有3-及/或5-OH 带I红移35~55 nm 示只有5-OH 红移60nm 示只有5-OH 红移50~60nm 示可能有3-OH及5-OH 红移17~20 nm 示除5-OH外，尚有6-氧取代

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