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La moelle osseuse est un tissu en renouvellement permanent situé dans les os. Production de 10 12 cellules par jour (

La greffe de CSH Moelle Osseuse. La moelle osseuse est un tissu en renouvellement permanent situé dans les os. Production de 10 12 cellules par jour (mille milliards!) Répartition : Crâne et mâchoire 13 % Membres supérieurs 8 % Sternum et côtes 10 % Vertèbres 28 % Bassin 34 %

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La moelle osseuse est un tissu en renouvellement permanent situé dans les os. Production de 10 12 cellules par jour (

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Presentation Transcript

  1. Dominique FIZET Etablissement Français du sang Aquitaine-Limousin

  2. La greffe de CSH Moelle Osseuse • Lamoelle osseuse est un tissu en renouvellement permanent situé dans les os. • Production de 1012 cellules par jour (mille milliards!) Répartition : • Crâne et mâchoire 13 % • Membres supérieurs 8 % • Sternum et côtes 10 % • Vertèbres 28 % • Bassin 34 % • Membres inférieurs 4 % Dominique FIZET Etablissement Français du sang Aquitaine-Limousin

  3. Qu’est-ce que la moelle osseuse Un organe responsable de la production des éléments du sang . Les « cellules souches » donneront : Globules rouges Leucocytes Plaquettes Dominique FIZET Etablissement Français du sang Aquitaine-Limousin

  4. Progéniteurs Précurseurs Cellules matures Cellules souches Schéma de l’hématopoïèse Granulocyte Lignée myéloïde Monocyte Érythrocyte Mégacaryocyte/plaquettes Lignée lymphoïde Éosinophile Lymphocytes B et T Dominique FIZET Etablissement Français du sang Aquitaine-Limousin

  5. Définition • Une cellule souche est la « cellule mère » non différenciée et pluripotente dont proviennent toutes les cellules sanguines • Elle est capable d’une différenciation et d’un auto-renouvellement illimités Dominique FIZET Etablissement Français du sang Aquitaine-Limousin

  6. La greffe de moelle osseuse • Deux grands types de pathologies : • 1. production de cellules anormales : • Leucémie aigue ou chronique • Myélome • Lymphomes • 2. dysfonctionnement : • Aplasie • Déficits congénitaux Dominique FIZET Etablissement Français du sang Aquitaine-Limousin

  7. La greffe de moelle osseuse Particularités de la greffe de cellules de moelle osseuse • Différent de la greffe d’organe : • pas d’opération chirurgicale • injection par voie veineuse comme une transfusion • Mais problèmes immunologiques : • rejet • GVH (réaction du greffon contre l’Hôte) Dominique FIZET Etablissement Français du sang Aquitaine-Limousin

  8. La greffe de moelle osseuse • Importance de la compatibilité tissulaire • Typages HLA identiques du: • ( Human Leucocyte Antigens) • Donneur • Receveur Dominique FIZET Etablissement Français du sang Aquitaine-Limousin

  9. La greffe de moelle osseuse • Les donneurs potentiels : • la fratrie : 25% des cas • les donneurs volontaires de moelle osseuse • la banque de sang de cordon Dominique FIZET Etablissement Français du sang Aquitaine-Limousin

  10. LE SYSTEME HLA Dominique FIZET Etablissement Français du sang Aquitaine-Limousin

  11. Le système HLA Human Leucocyte Antigen • Complexe Majeur d ’histocompatibilité de l ’Homme • Découvert il y a 50 ans par Jean Dausset • « Carte d ’identité », exprimée à la surface de toutes nos cellules nucléées Polymorphe +++ Chaque sujet est unique • Réalisation du typage HLA par prise de sang Dominique FIZET Etablissement Français du sang Aquitaine-Limousin

  12. LA COMPATIBILITE •  Une étude de compatibilité nécessite : • - La réalisation du TYPAGE HLA du patient et des donneurs • - La COMPARAISON des typages HLA du patient et des donneurs • - La RECHERCHE de l’identité tissulaire la plus proche, la plus parfaite. Dominique FIZET Etablissement Français du sang Aquitaine-Limousin

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  17. Codominance: tous les gènes sont exprimés • (2 Ag détectés par locus, hormis pour les homozygotes) • - Transmission en bloc sous forme d’haplotypes • (peu de possibilité de crossing over) Dominique FIZET Etablissement Français du sang Aquitaine-Limousin

  18. GENETIQUE DES POPULATIONS • Grande diversité du système HLA • Combinaisons préférentielles dans certaines populations • Information sur l’histoire génétique de chaque population • 4 grands groupes de POPULATIONS : • CAUCASOÏDE • NEGROÏDE • MONGOLOÏDE • AUSTRALOÏDE Dominique FIZET Etablissement Français du sang Aquitaine-Limousin

  19. Nomenclature des antigènes HLA Dominique FIZET Etablissement Français du sang Aquitaine-Limousin

  20. Dominique FIZET Etablissement Français du sang Aquitaine-Limousin

  21. Méthodologie de l’étude du système HLA: phénotypage: microlymphocytotoxicité (LCT) génotypage: résolution générique (2 digits): basse résolution résolution allélique (4 voire 6 digits): haute résolution (résolution intermédiaire: moyenne résolution) ->2 manières d’exprimer les spécificités HLA, avec des correspondances entre elles Dominique FIZET Etablissement Français du sang Aquitaine-Limousin

  22. Isolement des cellules mononucléées sur Ficoll Dominique FIZET Etablissement Français du sang Aquitaine-Limousin

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  26. Dominique FIZET Etablissement Français du sang Aquitaine-Limousin

  27. LA BIOLOGIE MOLECULAIRE appliquée au typage HLA Dominique FIZET Etablissement Français du sang Aquitaine-Limousin

  28. Cellule Chromosomes ADN La Biologie Moléculaire traite de la biologie des acides nucléiques Dominique FIZET Etablissement Français du sang Aquitaine-Limousin

  29. Structure de l’ADN Double hélice Dominique FIZET Etablissement Français du sang Aquitaine-Limousin

  30. A-T Liaisons hydrogène (réversibles sous l’effet de la chaleur ou d’agents chimiques: dénaturation-hybridation) Liaisons phospho-diesters (l. irréversibles, catalysées par des enz DNA pol. ou nucléases) G-C Dominique FIZET Etablissement Français du sang Aquitaine-Limousin

  31. Principe de la PCR Matrice d’ADN Couple d’amorces spécifiques Taq polymerase, + dNTP Permet d’amplifier une zone spécifique sur un gène Dominique FIZET Etablissement Français du sang Aquitaine-Limousin

  32. Dominique FIZET Etablissement Français du sang Aquitaine-Limousin

  33. Migration de l’ADN chargé négativement en gel d’agarose Révélation par BET fluorescent qui s’insère dans la double hélice (intercalant) Identification en fonction du PM Dominique FIZET Etablissement Français du sang Aquitaine-Limousin

  34. Dominique FIZET Etablissement Français du sang Aquitaine-Limousin

  35. allèles (DNA) (>1700) 111 59 463 617 179 338 Polymorphisme du système HLA : sérologie versus DNA HLA class II HLA class I DP DQ DR B1/B3/B4/B5 B C A antigènes 6 9 19 46 10 21 Dominique FIZET Etablissement Français du sang Aquitaine-Limousin

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