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HEMOGRAMA MANUAL

HEMOGRAMA MANUAL. Bqco. Gonzalo A Ojeda Cátedra Hematología Clínica Fa.C.E.N.A-U.N.N.E 2013. Definición. ES EL ESTUDIO CUALI Y CUANTITATIVO DE LOS ELEMENTOS CORPUSCULARES DE LA SANGRE. CUANTITATIVO : Recuento de GR, GB Dosaje de Hb

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Presentation Transcript

  1. HEMOGRAMA MANUAL Bqco. Gonzalo A Ojeda Cátedra Hematología Clínica Fa.C.E.N.A-U.N.N.E 2013

  2. Definición ES EL ESTUDIO CUALI Y CUANTITATIVO DE LOS ELEMENTOS CORPUSCULARES DE LA SANGRE CUANTITATIVO : Recuento de GR, GB Dosaje de Hb Índices Hematimétricos ( VCM, HCM, CHCM ) Fórmula Leucocitaria CUALITATIVO Estudio Morfológico de la Serie Roja, Serie Blanca y Pq

  3. Determinaciones Adicionales RECUENTO DE Pq Reticulocitos VSG

  4. ETAPA Pre-ANALÍTICA • Condiciones del Paciente • Tipo y Toma de Muestra

  5. Condiciones del Paciente • NO NECESITA ESTAR ESTRICTAMENTE EN AYUNAS (se sugiere al menos 2 h). • NO HABER REALIZADO ACTIVIDAD FÍSICA INTENSA • PERMANECER PREFERENTEMENTE SENTADO DURANTE LA EXTRACCION

  6. DATOS A TENER EN CUENTA • EDAD • DX. PRESUNTIVO • SEXO

  7. REFERENTE A LA MUESTRA • TIPO DE MUESTRA -VENOSA -CAPILAR -ARTERIAL??

  8. PUNCION VENOSA VENTAJAS -Técnica rápida y segura -Permite obtener volúmenes adecuados para las demás determinaciones. -Permite repetir el análisis en caso de dudas. -Reduce los posibles errores de la punción capilar. DESVENTAJAS -Resultados erróneos por hemo- concentración (torniquete pro- longado) -Hematomas y dolor (extracción dificultosa) -No se recomienda en neonatos o pacientes quemados. -Paciente Oncológicos

  9. PUNCION CAPILAR VENTAJAS -Resulta sencillo para neonatos y niños -Se puede realizar más de una vez en pacientes especiales (que- mados, oncológicos, etc) -Útil en pacientes con patologías Hemorrágicas. • DESVENTAJAS • -Recuentos erróneos por hemo- • concentración o hemodilución • Dificultad para obtener flujo • continuo. • -Recuentos de Pq disminuidos, • coagulación. • -Errores por contaminación • -Paciente Oncológicos

  10. ANTICOAGULANTES • SALES DE EDTA :(Na2 o K3) Forman complejos con el Ca++, efectivo en pequeñas cc, no necesita ser evaporado (Posible error por dilución a tener en cuenta) 0.01mL (10 μL) sirven para anticoagular hasta 2,5 mL de sangre LA RELACION NORMALMENTE USADA ES 10 μL más 1 mL (990 µL) de sangre (1/100) PERMITE CONSERVAR EN HELADERA LAS MUESTRAS HASTA 48h SIN ALTERAR LOS VALORES • MEZCLAS DE OXALATOS DE AMONIO Y POTASIO ( MEZCLA DE WINTROBE) Actúa precipitando el Ca²+ Proporción 1/10 (0.5 mL ACG EVAPORADO a 37 + 5 mL sangre) • HEPARINA: Actúa neutralizando la trombina. Proporción 10-50 UI/mL sangre. (COLORACIÓN)

  11. ACTIVIDAD TENIENDO EN CUENTA PROPORCIONES CALCULE: - volumen de EDTA-Na2 para anticoagular 3 mL de sangre -volumen de EDTA–Na2 para anticoagular 2 mL de sangre

  12. Obtenida la muestra • HOMOGENEIZAR !!!!! LENTA Y REPETIDAS VECES • ANTES DE PROCESAR : HOMOGENEIZAR LENTA Y REPETIDAS VECES!!!

  13. ETAPA ANALÍTICA • RECUENTOS DE GB , GR y Plq • Hematocrito • Dosaje de Hb • Fórmula Leucocitaria

  14. RECUENTO DE GB • DILUYENTE: LIQUIDO DE TURK -Acido acético glacial (20 mL) -Cristal Violeta 1% (10 mL) -Levar a 1000 mL con agua destilada • Dilución : 1/20 380 μL + 20 μL muestra

  15. Muestra Homogeneizar Por agitación Secar con papel el dispositivo de cargado

  16. RECUENTO DE GB CAMARA DE NEUBAUER PIPETAS

  17. CAMARA DE NEUBAUER Se trata de un portaobjetos con una depresión en el centro, en el fondo de la cual se ha marcado con la ayuda de un diamante una cuadrícula. Es un cuadrado de 3 x 3 mm, con una separación entre dos líneas consecutivas de 0.25 mm. Así pues el área sombreada y marcada L corresponde a 1 mm². La depresión central del cubreobjetos está hundida 0.1 mm respecto a la superficie, de forma que cuando se cubre con un cubreobjetos éste dista de la superficie marcada 0.1 mm, y el volumen comprendido entre la superficie L y el cubreobjetos es de 0.1 mm³.

  18. Aumento 10X

  19. Aumento 10x

  20. Consideraciones prácticas • PARA CARGAR LA CAMARA : SE COLOCA EL CUBRE OBJETO Y ACERCANDO LA PUNTA DE LA PIPETA O EL CAPILAR SE LLENA POR CAPILARIDAD • EL LLENADO DEBE HACERCE DE UNA SOLA VEZ SIN QUE QUEDEN BURBUJAS, NI LÍQUIDOS EXEDENTES ALREDEDOR DEL CAMPO • NO BALANCEARLA AL ACERCAR AL MO • PARA DISTINGUIR DE BASURAS MOVER EL TORNILLO MICROMETRICO. • NO DEMORARSE

  21. Elementos contados 4 mm² X 1mm² X N / 4 • Dado que el espesor de la cámara es 0.1 mm, para expresar el número de elementos por mm³ deberemos multiplicar el valor X por 10. X= (N/4) X 10 • Como se ha efectuado una dilución de 1/20, debemos multiplicar por la dilución, es decir: X= Nx10x20= N x 50= Nº de GB/mm³ 4 • Según el ICSH, debe expresarse este resultado en Nº de GB. 10x9/l

  22. Cálculos

  23. Valores de Referencia • ADULTOS : 5000 a 10.000 GB / mm³ • NIÑOS - RN : 12.000 a 25.000 GB / mm³ - Hasta 1 año : 6000 a 18.000 GB / mm³ • 3 a 6 años : 5000 a 15.000 GB / mm³ • 6 a 12 años: 4500 a 13.500 GB / mm³

  24. ACTIVIDAD EXPRESAR 6500 GB/mm3 En: cel / dL cel / µL (notación científica) cel / L (notación científica)

  25. CAUSAS DE ERROR • DEL MATERIAL • CUBREOBJETOS MAL COLOCADO • SUCIEDAD ,LEVADURAS EN EL LIQUDO DE DILUCION • RESTOS DE G.R. • APELOTAMIENTO DE LEUCOCITOS • DESGASTE • DE TECNICA • EXTRACCION DE SANGRE • DILUCION (PIPETA MAL ENRASADA) • LLENADO DE CAMARA EN FORMA DESIGUAL • AUTOAGLUTINACION • DEL OPERADOR • DIFERENCIAS DE UN INDIVIDUO A OTRO • FATIGA OCULAR

  26. LEUCOCITOSIS • FISIOLÓGICAS • Embarazo, Lactancia, Puerperio, Período menstrual • Ejercicio violento, Stress.

  27. LEUCOCITOSIS PATOLOGICAS CAUSAS INFECCIOSAS -Bacterias piógenas : Strepto, Staphylo , Meningo y gonococo. -Tos convulsa (Bordetella) Leucocitosis con Linfocitosis -Sarampión (Inc) -Cuadros septicos : Peritonitis, Neumonía CAUSAS NO INFECCIOSAS -Cuadros inflamatorios -Post hemorragias -Vómitos, convulsiones, crisis eclámp- sicas, epilepsia, taquicardias -Hipertemias no infecciosas -Quemaduras extensas -Sock traumático -IMC, necrosis de tejido tumoral, pan- creatitis. -Leucemias -Enfermedades metabólicas : DBT, Coma diabético, Acidosis -IRC -Endócrinopatias : Cushing - Corticoterapia

  28. Leucopenias -Constitucional (Rara) tener presente resultados previos -Digestiva (post prandial) -Infecciosa: fiebre tifoidea y paratifoidea -Sepsis de mala evolución -Casi todas las virosis (Sarampión, Varicela, Gripe, Neumonía ) -Intoxicación por benzoles o sulfas -Hemopatías: Leucemias leucopénicas, aplasia medular, etc -Afecciones hepatoesplénicas -Cirrosis hepática, trombosis de la vena porta o esplénica -Leucopenias alérgicas, shock anafiláctico -Afecciones reumáticas -Quimioterapia -Leucopenias carenciales -Colagenopatías: LES, Esclerodermia -AINES

  29. DOSAJE DE Hb • Método de la Cianmetahemoglobina • Fue recomendado por el Comité Internacional para la Estandarización de Hematología (ICSH) en 1966, modificado en 1977 y sigue siendo hasta hoy el más recomendado.

  30. REACTIVO DE DRABKIN • Fe(CN)6K3---------------200 mg • KCN---------------------------- 50 mg • K3HPO3--------------------140 mg • Sterox Se o Triton X-100-------1 mL • Llevar a 1L con agua destilada y ajustar el pH a 7,2 con H3PO4 0.1 N o con KOH 0.1N. • Guardar en frasco color caramelo, a T amb, estable 6 meses.

  31. Fundamento del Método Hb ( Fe II ) Fe(CN)6K3 Meta Hb ( Fe III) KCN CIANMETAHEMOGLOBINA MAXIMO DE ABS A 540 nm

  32. Técnica 5 mL Rvo Drabkin + 20 μL sangre entera anticoagulada 5 minutos Leer a 540 nm en espectrofotómetro o en fotocolorímetro con filtro verde

  33. Curva de calibración • Se realiza cada vez que se prepara o adquiere reactivo. • Kits comerciales : 3 niveles ( bajo, normal, alto ) • Muestra testigo de cc conocida (trabajo con dilución al ½ y con el doble )

  34. Curva de Calibración Abs A=Ɛ.b.C y=ax+b g/dL

  35. ACTIVIDAD A=ξ b C  despejar C y especificar Unidades (g/dL) Idem desde la pendiente del gráfico

  36. VENTAJAS DE LOS METODOS • MUESTRA TESTIGO • -Controla la linealidad del equipo • -Controla la manipulación del • material de medición volumétrico • (en forma indirecta) pues el • patrón se procesa • como si fuese una muestra • -Posible deterioro del reactivo • Variaciones de tensión, Int de la • Lampara,etc. • KIT COMERCIAL • Controla la • linealidad del equipo • -Estado del rvo

  37. Para tener en cuenta • La determinación de un patrón diario nos permite: -Controlar que el reactivo no ha sufrido deterioro -Controlar el factor humano -Cambios en la tensión eléctrica o funcionamiento del equipo de lectura.

  38. VALORES DE REFERENCIA

  39. HEMATOCRITO O VOLUMEN GLOBULAR

  40. Definición • ES EL VOLUMEN DE MASA GLOBULAR EXPRESADO COMO UN % EN EL VOLUMEN DE SANGRE TOTAL

  41. Técnica 1-SE CARGAN TUBOS CAPILARES: • Sangre venosa : Sin heparina • Punción digital: Con heparina 2-LLENAR HASTA 2/3 EL CAPILAR Y CERRAR EN UN EXTREMO CON PLASTILINA 3-CENTRIFUGAR EN CENTRIFUGA ESPECIAL: 15000 rpm 5 a 6 min 4-LEER EN ABACO ESPECIAL

  42. MICROCENTRÍFUGA

  43. VENTAJAS • RÁPIDO • < VOLÚMEN DE SANGRE • TUBOS CAPILARES DESCARTABLES • MAS EXACTO YA QUE AL CENTRIFUGAR LA SANGRE A MAYOR VELOCIDAD EL VOLUMEN DE PLASMA ATRAPADO POR LOS G.R. EN DICHA CAPA ES <

  44. Valores de referencia • Recién Nacido 52 – 65 % • Varones 40 – 48 % • Mujeres 37 – 47 %

  45. VALORES ALTOS • POLIGLOBULIA REAL • HEMOCONCENTRACION : QUEMADURAS , ECLAMPSIAS, SHOCK QUIRURGICO • O TRAUMATICO • ESTADOS DE DESHHIDRATACION (VOM. DIARREAS, DIABETICOS) • HIPOXIA DE LAS ALTURAS • FUMADORES VALORES BAJOS -ANEMIAS -FASE DE RECUPERACIÓN DE PERDIDA DE SANGRE -EMBARAZADAS

  46. RECUENTO DE GLÓBULOS ROJOS • EL CONTAJE HA ADQUIRIDO MUCHA PRESICION CON LOS METODOS AUTOMATIZADOS • EL RECUENTO EN CAMARA ES OBSOLETO Y SUJETO AGRAVES ERRORES TANTO QUE CUANDO NO SE DISPONE DE VALORES POR AUTOMATIZACION ES MEJOR PRESCINDIR DE ESTE DATO Y GUIARSE POR LOS VALORES DE HTO Y HB.

  47. VALORES DE REFERENCIA • Mujeres 4 – 4.8 millones/mm³ • Varones : 4.5 -5.5 millones / mm³ • RN : 5.6 millones / mm³ • 4 semanas: 4 millones/ mm³ • 6 semanas: 3.6 millones/ mm³ • 12 semanas : 3.8 millones/mm³ • 6 a 12 años : 4.5 millones / mm³

  48. INDICES HEMATIMÉTRICOS Hto x 10 GR Hb x 10 GR Hb x 100 Hto

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