150 likes | 233 Views
Explore the purpose and benefits of mutagenesis, the appearance of altered phenotypes, and the implications for gene function. Focus on the TIP120 protein's characteristics and roles in protein synthesis and degradation processes, transcription stages, and the assembly of transcriptional initiation complexes. Learn about the SCF complex and its key components in cell cycle control and signal transduction pathways.
E N D
A mutagenezis célja, haszna Az egyed megjelenése (fenotípusa) megváltozHAT Mutáció Ebből visszakövetkeztethetünk a mutációt szenvedett gén funkciójára
A TIP120 fehérje néhány jellemzője • 1230 AS, szimpla polipeptid • Affinitást mutat a TBP-vel és az RNS Pol II Rpb5 alegységével • Az iniciációs komplex összeszerelődését serkenti • A funkció betöltésében fontos a molekula N-terminális 1/3-a • A TIP120 fehérjét kódoló gént kimutatták patkányban, Coenorhabditisban, Drosophilában, emberben, Arabidopsisban
I.A TIP120 fehérje szerepe a FehérjeszintézisbenII. A TIP120 fehérje szerepe a fehérjedegradációs folyamatokban
mRNS DNS Fehérje A génkifejeződés Szakaszai Transzkripció = „átírás” Transzláció = „fordítás”
POLII TIP120 TFIIF TATA A transzkripciós iniciációs komplex kialakulása TFIIE TFIIH TFIIB TFIIA TBP
Az ubiquitin-protein ligázok • Fontos típusuk az SCF-komplex (ROC1-SKP1-cullin1/cdc53-F box protein) • SCF targetjei különböző sejtciklus-kontroll és szignál-transzdukcióban fontos fehérjék
Nd8 cul1 roc SKP1 E2 Ub F szubsztrát
A CAND1 fehérje szerepe az SCF komplex működésében • Gátolja a cul1-SKP1 interakciót • SKP1-cul1 komplexben nincs CAND1; CAND1-cul1 komplexben nincs SKP1 • CAND1 kiütése RNS-interferenciával:SKP1-cul1 komplex mennyisége nő
Nd8 cul1 roc SKP1 CAND1 E2 cul1 Ub F ROC szubsztrát SKP1 A CAND protein gátolja az SCF komplex működését
T-DNS LB RB Növényi gén promóter 5' UTR exon/intron 3' UTR Funkcióvesztéses mutáció Inszerciós mutagenezis T-DNS inszerció
A H911 vonal Columbia: normál fenotípus H911/4: törpe fenotípus
T-DNS inszerció pozíciója a H911 vonalban R L 2. Krom., BAC T8K22 T-DNS inszerció: 13. exon (3301bp) Gén: At2g02560 Protein: feltételezett TBP kölcsönható fehérje (120 kD) (TBP Interacting Protein, TIP120)