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Milieu Urée Tryptophane

Milieu Urée Tryptophane. BUT. Milieu d’identification et de recherche de la tryptophanase ( par production d’indole), de l’uréase et de la TDA (Tryptophane Désaminase). Composition. Urée. Substrat de l’uréase. Composition. Tryptophane Ethanol.

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Milieu Urée Tryptophane

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Presentation Transcript

  1. Milieu Urée Tryptophane

  2. BUT • Milieu d’identification et de recherche de la tryptophanase (par production d’indole), de l’uréase et de la TDA (Tryptophane Désaminase)

  3. Composition Urée Substrat de l’uréase

  4. Composition Tryptophane Ethanol Substrat de la TDA Solubilise le Tryptophane

  5. Composition Rouge de Phénol Chlorure de Sodium Indicateur coloré Isotonicité du milieu Rouge (basique) et jaune (acide)

  6. Composition KH2PO4 K2HPO4 Rôle tampon

  7. Principe • Mise en évidence de l’uréase Urée + H20  CO2 + 2 NH3 Alcalinisation du milieu visible grâce au rouge de phénol

  8. Principe • Recherche de la TDA Après ajout de Chlorure de Fer III, on obtient un produit marron foncé en présence d’acide indole pyruvique

  9. Principe • Recherche de la tryptophanase Après ajout du réactif de Kovacs, on observe un anneau rose se former en présence d’indole

  10. Lecture & interprétation Après lecture du résultat de l’uréase, on effectue 2 tests: • Réactif de Kovacks pour rechercher la production d’indole • Ajout de FeCl3 pour rechercher la présence d’acide indole pyruvique

  11. Lecture & interprétation • Mise en évidence de l’uréase Résultat positif: rougeRésultat négatif: jaune • Recherche de la TDA Résultat positif: marronRésultat négatif: jaune • Recherche de la tryptophanase Résultat positif: jauneRésultat négatif: rose

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