Trypanosoma cruzi (Enfermedad de Chagas)

1. Trypanosoma cruzi (Enfermedad de Chagas) Tripanosomosis americana Prof. ALICIA V. LAPIERRE

2. La enfermedad de Chagas es producida por un protozoario hemoflagelado, denominado Trypanosoma cruzi Este parásito fue descubierto en 1909 por Carlos Chagas. Se la denomina también Tripanosomosis Americana pues se halla distribuida en continente Americano.

3. Enfermedad de ChagasDistribución geográfica Esta parasitosis afecta a casi toda América latina, estimándose que los afectados pueden llegar a un 15 % de la población total. Se estima que casi 100 millones de personas tienen riesgo de infección. Actualmente se calcula que entre 25 millones de personas están infectadas.

4. Enfermedad de ChagasDistribución geográfica

5. PREVALENCIA DE LA INFECCION POR TRYPANOSOMA CRUZI EN ARGENTINA

6. T. cruzi: Ciclo biológico Alterna su ciclo de vida natural entre un huésped vertebrado y otro invertebrado. Ubicación sistemática Reino: Protista Subreino: Protozoa Phylum: Sarcomastigophora Clase: Zoomastigophora Orden: Kinetoplastida Familia: Trypanosomatidae Género: Trypanosoma Subgénero: Schizotrypanum Especie: cruzi

7. El género Trypanosoma se divide en 2 secciones: Salivaria y Estercoraria. T. Cruzi pertenece a esta ultima, dde la ppal caracteristica es que las formas infectantes del parasito son transmitidas por la deyecciones del insecto vector.

8. TRYPANOSOMAS Principales especies: Trypanosomosis Africana: Trypanosoma brucei gambiense Trypanosoma brucei rhodesiense Trypanosomosis Americana: Trypanosoma cruzi Trypanosoma rangeli

9. Trypanosoma cruzi se ubica en el orden Kinetoplastida, caracterizado por la presencia de -un soloflagelo c/un axonema compuesto por 9 pares de microtúbulos periféricos mas 2 microtúbulos centrales. -cuerpo paraflagelar: filamentos asociados por puentes proteicos. - y una mitocondria : su genoma se encuentra ordenado en una compleja y compacta red denominada Kinetoplasto (una malla de ADN mitocondrial cerca de la base del flagelo).

10. Trypanosoma cruzi

11. Desde el punto de vista morfológico la superficie celular de los tripanosomátidos esta compuesta por 3 estructuras: Glicocalix (cuerpo celular y flagelo) Bicapa lipídica (excepto en base del flagelo) Microtubulos subpeliculares (debajo de membrana plasmática- es citoesqueleto)

12. Otras organelas: Reservosomas (almacén. de macromolec.) Glicosomas (peroxisomas, enzimas p/oxidac. de aac y lípidos) Acidocalcisomas (concentran Calcio)

13. T. cruzi 2 grupos de hospedadores: - intermediario (insectos de la subflia Triatominae, flia Reduviidae, orden Hemiptera- hematófago). -definitivo: cualquier mamífero. La transmisión del vector al hombre se facilita por el hábito del insecto a deyectar inmediatamente después de alimentarse.

14. Ciclo vital Se inicia cuando un insecto hematófago infectado pica a un ser humano y defeca. Los tripomastigotes metacíclicosse transmiten en las heces- si es un vector infectado- (1). Entran en el huésped a través de la picadura, de la herida generada por rascado o por el cruce de las membranas mucosas. Cuando entran en una célula humana, se convierten en amastigotes(2).

15. Esta es una etapa reproductiva a través de la mitosis. Después de la reproducción, una gran cantidad de amastigotes se encuentran en la célula infectada, formándose seudoquistes(3) prefer. en cel. SRE, cardíaco, neuroglia, musculo-esquelético y m. liso. El amastigote se convierte en tripomastigotey la célula se rompe. El tripomastigote vuelve a infectar otra célula repitiéndose el ciclo de multiplicación (4).

16. Los tripomastigotes NO son capaces de multiplicarse en la sangre. La única forma replicativa en los vertebrados: amastigote intracelular.

18. TRYPANOSOMAS

19. Trypanosoma cruzi: Morfología Es un pequeño hemoflagelado con un cuerpo alargado, provisto de un flagelo y una membrana ondulante. Fases morfológicas: Tripomastigote metacíclico (vector) - Epimastigote (vector) - Amastigote (verteb.) - Tripomastigote (verteb.)

20. Morfología ANTERIOR v POSTERIOR iv v

21. Diferencias morfológicas Amastigote: Forma intracelular (reservorio) Redondo u oval Mide 3-6 micras Inmóvil Tiene: núcleo cuerpo parabasal un blefaroplasto (dará origen al flagelo) Tripomastigote: Forma extracelular Fusiforme Mide 25 micras Móvil Tiene: núcleo central blefaroplasto posterior membrana ondulante flagelo libre

22. Amastigote / Tripomastigote

23. Epimastigote: alargado c/cinetopl. anter. al núcleo, es la forma reprod. en tracto dig. de los invert. y en m. cultivo

24. Tripomastigote: alargado,c/cinetoplasto local. post. al núcleo. Se halla en sangre de los mamíf. y forma infectante de ellos. No se divide.

25. Enfermedad de ChagasCiclo vital

26. Vector Vinchucas, chipos, chinche de compostela, hocicona, voladora o besucona

27. Etapas en el insecto Cuando el insecto pica a un huésped infectado, algunos tripomastigotespasan a él a tr. de la sangre. En el tubo digestivo del insecto,el parásito se redondea : esferomastigote, posteriormente: epimastigotes, después de la reproducción binaria pasan al recto dde se convierten en tripomastigotes metacíclicos(evacúan en heces). Las heces pueden infectar a un nuevo huésped, repitiéndose el ciclo.

30. Ciclo biológico / Triatoma Picadura Succión formas parasitarias.Tripomastigotes Tubo digestivo transform. en esferomastigotes- epimastigotes Multiplicación por fisión binaria Migración intestino posterior Transformación en tripomastigotes metacíclicos Eliminación en las deyecciones

31. Ciclo biológico / Vertebrado Penetración Tripomastigote metacíclico Introducción a células fagocíticas Trasnsformación a amastigotes Multiplicación por fisión binaria y ruptura celular Liberación de formas parasitarias Transformación en tripomastigotesen sangre Penetración a otras células y tejidos

32. Enfer. Chagas: Mecanismos de transmisión La transmisión del T. cruzi al ser humano, puede producirse por distintas vías: 1) vectorial por triatomíneos (vinchuca), 2) congénita, (vía vertical de madre a hijo, 0,9 % aprox.) 3) por transfusiones o transplante 4) bucogastroentérica, considerada como una ETA, muy baja frecuencia. Por leche materna muy baja frecuencia. 5) vía accidental (Manipulación de sangre, heces, orina, animales infectados, cultivo de tejidos) 6) Sexual: se ha encontrado el P. en sangre menstrual

34. Aspectos clínicos Presenta un estadío agudo y otro crónico. -< 5 % manifestaciones clínicas patognomónicas (Complejo de Romaña, chagoma de inoculación) en el p. agudo- que dura 4 meses- -1 % muere, siendo los casos de > gravedad los niños que se infectan en el primer año de vida, -fase indeterminada, sin sintomatología clínica ni alteraciones en estudios convencionales (ECG, RX torax)

35. Período agudo: • En gral. las manifestaciones clínicas se observan en niños: Fiebre, Sudor, Dolores musculares, Vómitos, diarreas, Poliadenopatía, Hepato-esplenomegalia, Edemas, Signos de compromiso cardíaco, Complejo oftalmoganglionar (Signo de Romaña) Aparición de un día para otro, Edema bipalpebral, unilateral (oclusión de la hendidura), Indoloro . Párpados color rojo, Escasa secreción conjuntival. Reacción ganglionar satélite. Evolución a la curación en aprox. 4 semanas. Chagoma de inoculación.

36. Signo de Romaña Edema bipalpebral, unilateral (oclusión de la hendidura), Indoloro . Párpados color rojo, Escasa secreción conjuntival. Reacción ganglionar satélite. Permanece 4 semanas.

37. Período crónico: Miocarditis: Hemibloqueo ant. izquierdo. Bloqueo completo de rama derecha (imagen mas frecuente). Alteraciones del ECG, palpitaciones, disnea de esfuerzo, insuficiencia cardíaca (muerte súbita) Megacolon y megaesófago: Trastorno del funcionamiento peristáltico, atrofia y fibrosis de fibras musculares. Aumento tamaño de los órganos por destrucción neuronal del sistema autónomo.- EL MECANISMO FISIOPATOLÓGICO DE LA ENF. DE CHAGAS AUN NO HA SIDO ACLARADO TOTALMENTE

38. Período crónico: Síntomas mas frecuentes son disfagia y odinofagia, con los consiguientes signos de malnutrición. El megacolon tiene como consecuencias distensión y contracciones, con frecuente dolor abdominal. Los fecalomas son una complicación común. Las alteraciones del esófago: retraso del vaciamiento hasta un megaesófago. La complicación mas frecuente es la esofagitis.

39. DIAGNOSTICO DE LABORATORIO • Es muy importante p/el control y tratamiento de la enferm. de Chagas, aportando información para el desarrollo de medidas de control de la endemia.- • Los mét. de diagnóstico se basan en procedimientos que ponen en evidencia: el parasito (parasitológicos) o que permiten detectar los Ac contra el mismo (serológicos).

40. LA DEMOSTRACIÓN DE LA PRESENCIA DEL PARÁSITO ES EL DIAGNÓSTICO INDISCUTIBLE. • PERO SOLO ES POSIBLE EN: ETAPA AGUDA, PUES EN: LAS INDETERMINADAS Y CRÓNICAS SU SENSIBILIDAD ES BAJA (<50 %)

41. Diagnostico de laboratorio • La enfermedad de Chagas presenta tres etapas clínicas: • aguda, • indeterminada • y crónica Debemos tener en cuenta el período ventana que se produce cuando T.cruzi ingresa al organismo, cumple un ciclo de desarrollo en el hospedador que abarca entre 7 a 15 días, donde comienza a ser detectable.

42. Diagnostico de laboratorio • LA MEJOR PRUEBA DE LABORATORIO PIERDE SU UTILIDAD CUANDO SE REALIZA EN EL MOMENTO INADECUADO • Por esto es fundamental conocer tres aspectos: • Cuándo realizar un análisis ??? • Qué análisis realizar ???? • Cuales son los objetivos del análisis???? Evitar la realización de estudios parasitológicos y/o serológicos en un momento inadecuado!!! falsos negativos!!.

43. Período agudo: • Datos de Laboratorio: • Anemia moderada, • leucocitosis variable (hasta 20.000 x mm3) con predominio de linfocitos. • Moderado aumento de monocitos. • Pruebas hepáticas moderadamente alteradas. Aumento de  y  globulinas.

44. Diagnostico de laboratorio ETAPA INICIAL parasitemia, que disminuye c/ el tiempo, hasta hacerse mínimas o aleatorias. ETAPA AGUDA centrarse en la búsqueda del parásito

45. Diagnostico de laboratorio- ETAPA AGUDA: métodos parasitológicos Las metodologías actualmente recomendadas son: GOTA FRESCA GOTA GRUESA TÉCNICA DE CONCENTRACIÓN DE STROUT HEMOCULTIVO XENODIAGNOSTICO

46. Diagnostico de laboratorio- ETAPA AGUDAmétodos parasitológicos-GOTA FRESCA Aumentar irrigación gota de citrato al 2%) Objetivos de 10x y 40x Tripanosoma cruzi Sensibilidad 50%

47. Diagnostico de laboratorio- ETAPA AGUDAmetodos parasitologicos-GOTA GRUESA Colorear con Giemsa diluido (1/20) 30min. Lavar y secar 1-2min Dejar secar Desfibrinar Colocar 1 a 3 gotas objetivo de 100x aceite Tripanosoma cruzi Sensibilidad 50%

48. DIAGNOSTICO DE LABORATORIO- ETAPA AGUDAMETODOS PARASITOLOGICOS-STROUT Suero p/reacc. serológicas 600 rpm 2 min. 2500 rpm 10 min. 5-10 mL Coag. Sedimento Tº amb Objetivos de 10x y 40x (45 minutos) Sensibilidad 95%

49. Diagnóstico de laboratorio- ETAPA AGUDAmétodos parasitológicos-MICROHEMATOCRITO BIOSEGURIDAD Cerrar extremo con plastilina Cortar 45 segundos a 5000 rpm 6 a 9 capilares de microhematocrito heparinizado Objetivos de 10x y 40x (45 minutos) Sensibilidad 90 a 95%

50. La técnica de MICROHEMATOCRITO NO ES RECOMENDABLE • Puede brindar falsos resultados negativos: • al centrifugar a las revoluciones no adecuadas, los parásitos se van al fondo del capilar y no son visualizados • Paciente con baja parasitemias: muy difícil de observar la presencia del parásito entre la capa de glób. blancos y suero. • Al romper el capilar en la interfase, pueden quedar restos de vidrio sobre el portaobjetos y al colocar el cubreobjeto, se dificulta la observación. • Por razones de Bioseguridad del operador: Deben cortarse aprox. 7 capilares, para aumentar su sensibilidad y los restos de vidrios pueden traspasar los guantes y herir al operador, pudiendo adquirir: Hepatitis, HIV, Chagas, etc.