1 / 22

PRAKTIKUM BIOKIMIA DARAH

PRAKTIKUM BIOKIMIA DARAH. Kelompok 3 : Siti Nursiami 4301410002 Siti Munawaroh 4301410008 Helivia Elvandari 4301410013. TUJUAN. Mahasiswa dapat memahami komponen utama yang terdapat dalam darah . Mahasiswa t erampil membuat plasma darah dan serum darah .

thai
Download Presentation

PRAKTIKUM BIOKIMIA DARAH

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. PRAKTIKUM BIOKIMIADARAH Kelompok 3 : SitiNursiami 4301410002 SitiMunawaroh 4301410008 HeliviaElvandari 4301410013

  2. TUJUAN • Mahasiswadapatmemahamikomponenutama yang terdapatdalamdarah. • Mahasiswaterampilmembuat plasma darahdan serum darah. • Mahasiswaterampilmelakukanujiterhadap plasma darah, uji Fe dalam hemoglobin, uji albumin dan globulin dalam serum darahdanujizat – zat non protein dalam serum darah.

  3. LANDASAN TEORI • Darahadalahjaringan yang beredardalamsistempembuluhdarah yang sebenarnyatertutup. Darahpadaumumnyabersifatagak alkalis dengan pH = 7.36 . • Darahmanusiaberwarnamerah, antaramerahterangapabilakayaoksigensampaimerahtuaapabilakekuranganoksigen. Warnamerahpadadarahdisebabkanolehhemoglobin,protein pernapasan (respiratory protein) yang mengandungbesidalambentukheme, yang merupakantempatterikatnyamolekul-molekuloksigen.

  4. Dalam system sirkulasi, darahberfungsisebagaiberikut: 1. Mengangkutkarbondioksidadarijaringantubuhkeparu-paru.2. Mengangkutoksigendariparu-parukeseluruhjaringantubuh.3. Mengangkut sari-sari makanandariususkejaringantubuh.4. Mengangkuthasilekskresidarijaringantubuhkeginjal.5. Mengaturdanmengontrol temperature tubuh6. Mengaturdistribusihormon. 7. Menutupluka. 8. Mencegahinfeksi

  5. Darahterdiridariduakomponen:1. Korpuskuleradalahunsurpadatdarahyaitusel-seldarahEritrosit, Leukosit, Trombosit.2. Plasma Darahadalahcairandarah. a. eritrosit, b. neutrofil, c. eosinofil, d. limfosit

  6. ALAT DAN BAHAN ALAT

  7. BAHAN • Darah • Asamasetatglasial • NaClencer • Zn(OH)2 5% • CaCl2 20% • HClencer • Kaliumferosianida • Kaliumrodanidaencer • HNO3pekat • HNO3encer • Ammonium sulfatjenuh • Ammonium sulfatpadat • Gliserol • Na2CO3padat • CH3COOH 2% • AgNO3encer • CuSO4encer • BaCl2encer • NH4oksalatencer 10% • Indikatorkhlor phenol merah

  8. CARA KERJA • Uji Plasma Darah • Uji Kristal Darah Biarkangelasdingin Amati kristalhaemindibawahmikroskop 1 tetes (Asamasetatglasial + NaClencer) 1 tetes Darah + Panaskansampaimendidih • Uji Fe dalam Hemoglobin Kaliumferosianida + HClencer + HNO3pekat (diadukhinggalarut) 10 tetes Darahpadacawan Panaskan Kaliumrodanida

  9. Endapan: cucidenganAmmonium sulfat  endapanbersih + aquades  encerkan (albumin) • Filtrat : + Ammonium sulfatpadat kocok  saring  endapan + aquades (globulin) 2. UjiSenyawadalam Serum Darah • UjiAlbumin danGlobulin Kocok Serum + Ammonium sulfat Saring

  10. Tabung 1 (ujikalsium) : filtrat + Ammonium oksalat Tabung 2 (ujiklorida ) : filtrat + AgNO3 Tabung 3 (ujiglukosa) : filtrat + Gliserol+ Na2CO3 padat+ CuSO4 panaskan Tabung 4 (ujisulfat) : filtrat + BaCl2 • UjiZat-zat Non-protein Serum darah + As.asetat Saring AmbilfiltratdanaturpHnya 5.4

  11. DATA PENGAMATAN • Ujikristaldarah: gambarkristalberbentukjarum • Uji Fe dalamhemoglobin • tabung1: filtrat + kaliumferosianida kuningmenjadihijau • tabung 2 : filtrat + kaliumrodanida  kuningmenjadijingga • Uji albumin dan globulin • albumin : endapanlarut • globulin : endapantidaklarut • Ujizat non protein • tabung 1 (ujikalsium) : endapanputih • tabung 2 (ujiklorida) : endapanputih • tabung 3 (ujiglukosa) : endapanmerahbata • tabung 4 (ujisulfat) : hablurputih

  12. PEMBAHASAN 1. UjiKristal Darah Dalampercobaanini, setetesdarahdiujidengancampuranreagenasamasetatglasialdanNaClenceryang dilakukandiatasgelasobjekdengantujuan agar terbentukhaeminkloridadanmempercepatreaksi. Dari hasilperlakuantersebutmenghasilkanlarutanberwarnacoklatmuda (padaobjeksampeldarah). Padalangkahselanjutnyadilakukanpemanasan yang bertujuanuntukmenghilangkankandungan air, menguraikan globulin, dariikatannyadan protein bersamaNaClmembentukhematinklorida. Kemudiansetelahdidinginkandandiamatidibawahmikroskopdiperolehbentukkristalmemanjangsepertijarumkecil. Kristal tersebut yang dinamakankristalhaemin. Kristal inimerupakansuatuhidroksidadari hem yang menjadikarakteristikdarah. Reaksinya: Fe3+ + K4(Fe(CN)6) FeK(Fe(CN)6) + 3K+ Fe3+ + KSCN  Fe(SCN)3 + 3K+

  13. 2. UjiFe dalam Hemoglobin Padapercobaanuji Fe dalam hemoglobin inidigunakan 10 tetessampeldarah yang diletakkandidalamcawanporselendanselanjutnyadipanaskanhinggaterbakarsemua. Pembakaraninidilakukanuntukmengoksidasi Fe2+ menjadiFe3+. Selanjutnya, ditambahkanakuaregia (campuran HNO3pekatdanHCl) yang berfungsisebagaipelarutlogam-logam lain selain Fe sehinggadapatmempermudahoksidasi Fe2+menjadiFe3+. Dari perlakuantersebutsetelahdiperolehfiltrat yang berwarnakuningpudar. Pemanasantambahanakanlebihmengefektifkanfiltratkuningpudartersebut. Filtratyang diperolehselanjutnyadibagidalamduatabungreaksi. Padatabungreaksi 1, ditambahkanlarutankaliumferosianidadanhasilnyaterbentuklarutanhijau, sedangkanditabungreaksi 2, ditambahkanlarutankaliumrodanida (KSCN) danhasilnyaterbentuklarutanberwarnajingga.

  14. 3. Uji Albumin dan Globulin • Uji Albumin Dalamujireaksiinidigunakan 2 mL serum darah yang dimasukkandalamtabungreaksidandilanjutkandenganpenambahangaram (NH4)2SO4jenuhdandidapatkanlarutanputih. Dalamlangkahselanjutnyadilakukanpengocokkandanpenyaringandanhasilnyadiperolehfiltratputihdanendapanputih. Endapan yang terbentukselanjutnyadicucidengan (NH4)2SO4setengahjenuh. Hal inidikarenakanuntukmemperolehkandungan albumin dan globulin yang lebihbagus (terpisahdarizatpengotor lain). Selanjutnya, endapan yang adaditambahkandenganaquadesdandikocok-kocok. Hasilnya, endapanlarutdalamakuades. Hasilinimenunjukkanuji albumin dalamserum positif.

  15. UjiGlobulin Padauji globulin inidigunakanfiltratyang telahdiperolehpadatahapuji albumin. Filtrattersebutdimasukkankedalamtabungreaksidanditambahkan (NH4)2SO4padatberlebihuntukproses salting out denganmelakukanpengocokkan yang kuat. Hasinya, diperolehlarutanberwarnaputihdanadasisasedikit (NH4)2SO4yang taklarut. Selanjutnya, dilakukanpenyaringanuntukmemisahkanendapandarifiltratnya. Endapantersebutselanjutnyadilarutkankedalamaquades. Hasilnya, diperolehternyataendapantidaklarutdalamaquades.

  16. 4. UjiZat-zat Non-protein Untukmelakukanujizat-zatnon-protein dalamdarahdilakukanpercobaanawaldimana 5 mL serum darahdimasukkankedalamtabungreaksidanditambahkan 10 tetesaquadesyang kemudiandipanaskan. Pemanasanberfungsiuntukmerusak protein yang terkandungdidalam serum darah. SelanjutnyakedalamtabungreaksitersebutditambahkanlarutanCH3COOH 2% tetesdemitetes. Hasilnya, diperolehlarutan yang berupasuspensi. Namun, partikel-partikeltidakterlalukasar. Selanjutnya, setelahdilakukanpenyaringandandiperolehfiltratnya, untukselanjutnyafiltratdiaturpHnyasamadengan 5,4 denganindikatorPP. Kemudianfiltrattersebutdipanaskankembalidandisaring. Hasilnya, filtratdibagikedalamempattabungreaksiuntukmasing-masingtabungdilakukanuji Ca2+, Cl-, glukosa, dan SO42-.

  17. UjiCa2+ Padauji Ca2+, filtrat yang telahdiperolehdarilangkahpercobaanawalselanjutnyaditambahkan 1mL larutan (NH4)2C2O4. Hasilnyadiperolehlarutanberwarnaputihkeruh, selanjutnyalarutandibiarkanbeberapa lama. Hasilnyaterdapatendapanputihyaitu CaC2O4. Hal inimenunjukkanujipositifadanya Ca2+dalamdarah Reaksinya : Ca2+ + (NH4)2C2O4→ CaC2O4(s) + 2NH4+

  18. UjiCl- Untukmengujiadanya ion Cl-dalamdarahdigunakanfiltratyang telahdiperolehdaripercobaanawal yang kemudiandireaksikandengancampuran AgNO3encerdan HNO3encer. Hasilnya, diperolehlarutankeruhdanterbentukendapanputih yang merupakanAgCl. Hal inimenunjukkanbahwaujiCl- dalamdarahhasilnyapositif. Reaksi : Cl-+ AgNO3AgCl(s) + NO3-

  19. UjiGlukosa Pengujianadanyaglukosadidalamdarahdenganmemakaifiltrat yang telahdiperolehsebelumnya yang kemudianditambahkan 2tetesgliseroldansedikit Na2CO3padat. Selanjutnya, ditambahkan 2 teteslarutan CuSO4encerdandipanaskanselamabebrapamenit. Hasilnya, terbentukendapanmerahbata. Endapanmerahbatatersebutadalah Cu2O. Hasilnyamenunjukkanujiglukosadalamdarahhasilnyapositif. Reaksi: + Cu2+ + 4OH- + Cu2O+H2O

  20. Uji SO42- Untukmenguji ion SO42-dalamdarah, denganmenggunakanfiltratyang adakemudianditambahkanbeberapateteslarutanBaCl2encer. Hasinya, diperolehlarutanhablurputihdan lama-kelamaanhablurmengendap (BaSO4). Hasilinimenunjukkanuji SO42-dalamdarahberhargapositif. Reaksinya: SO42-+ BaCl2  BaSO4 (s)+ 2Cl-

  21. KESIMPULAN • Darahterdiridarielemenpadatberupaeritrosit, leukosit, dantrombosit. • Plasma darahterdiridari serum dan fibrinogen. • Serum darahmengandung albumin dan globulin. • Plasma darahmemilikibentukmenjarumdanmemilikigugus Fe dalamHb-nya. • Dalamdarahmengandungzat-zatnon-protein yang terdiridari Ca2+,Cl-, glukosa, dan SO42-.

  22. DAFTAR PUSTAKA Murray, Robert K. dkk. 2003. BiokimiaHarper. Jakarta : EGC. Tim DosenBiokimia. 2012. PetunjukPraktikumBiokimia. Semarang : UNNES Press. http://www.wikipedia.org.id

More Related