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Genetic Suppression of Polyglutamine Toxicity in Drosophila

Genetic Suppression of Polyglutamine Toxicity in Drosophila. Parsa Kasemi- Esfarjani , et al ; Science 287, 1837 (2000). Plan. Introduction : visée de l’article Description de la méthode Résultats et interprétations Conclusion. Visée de l’article. Introduction. Introduction.

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Genetic Suppression of Polyglutamine Toxicity in Drosophila

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Presentation Transcript

  1. Genetic Suppression of Polyglutamine Toxicity in Drosophila Parsa Kasemi-Esfarjani, et al ; Science 287, 1837 (2000)

  2. Plan • Introduction : visée de l’article • Description de la méthode • Résultats et interprétations • Conclusion

  3. Visée de l’article Introduction

  4. Introduction • Chorée de Huntington : présente des agrégats de polyglutamine • Utilisation de drosophiles présentant ce phénotype comme modèle de la maladie • Criblage des gènes suppresseurs de ce phénotype • Homologie des protéines entre la drosophile et l’humain

  5. Description et élaboration des lignées transgéniques poly-Gln Description de la méthode

  6. Description et élaboration des lignées transgéniques poly-Gln • Lignées comportant des polyCAG • 20 répétitions : lignée 20Q • 127 répétitions : lignée 127Q • Après traduction des ARNm on aura des polyglutamines de ces 2 types • Utilisation de différents promoteurs pour induire l’expression génique spécifiquement dans les yeux

  7. Élaboration préalable de 2 lignées transgéniques

  8. Lignée UAS-polyCAG • Insertion d’un élément P contenant : • Promoteur UAS • Séquence polyCAG (20 ou 127 répétitions) • Séquence codant pour un épitope de l’hémagglutinine (HA) Figure : construction génomique incorporée dans le génome de la drosophile

  9. Lignée GMR-Gal4 • Insertion d’un élément P contenant : • Promoteur GMR • Séquence Gal4 codant pour la protéine GAL4 Figure : Construction génomique incorporée dans le génome de la drosophile

  10. Croisement des 2 lignées • Obtention de drosophiles exprimant les polyglutamines dans l’œil • Elles sont UAS-polyCAG et GMR-GAL4

  11. Induction de la transcription Facteur de transcription spécifique de l’œil 5’ 3’ GMR GAL 4 Transcription de GAL4 Protéine Gal4 ARNm Gal4 Traduction de l’ARNm Gal4 Induction de la transcription 5’ 3’ UAS Poly CAG HA Transcription ARNm Poly CAG HA Traduction Polyglutamine avec épitope HA

  12. Influence du fond génétique • Sélection de plusieurs lignées • 3 lignées 20 Q • 3 lignées 127 Q

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