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REPLICAÇÃO DO DNA . (enzimologia em procariotos). A revisão do modelo de Watson & Crick e replicação semi-conservativa. Cromossomos Arlequim. A replicação e E. coli tem uma origem apenas.

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Presentation Transcript
replica o do dna

REPLICAÇÃO DO DNA

(enzimologia em procariotos)

a replica o e e coli tem uma origem apenas
A replicação e E. coli tem uma origem apenas
  • Autoradiografias feitas por J. Cairns (1963) em DNA de E. coli tratadas com meio contendo Trimidina comprovaram que a replicação é semi-conservativa, bidirecional e que o DNA e circular
a replica o
A replicação
  • Se replicação é semi-conservativa e a polimerização deve ser sempre no sentido 5´→3´
  • Mas o DNA é antiparalelo ou seja, uma fita ocorre no sentido 5’ → 3’ e a outra no sentido 3’ → 5’
  • Como ocorre então a replicação nos dois sentidos? (figura)
as enzimas e suas a es
Polimerases: todas podem tanto adicionar como remover nucleotídeos, somente no sentido 5’ → 3’. Quando removem do final do filamento são chamadas de exonucleases. Se os removem em algum outro lugar do filamento, são chamadas de endonucleases). A remoção é feita no sentido inverso, ou seja 3’ → 5’)As enzimas e suas ações
a replica o do filamento leader replica o cont nua
A replicação do filamento leader (replicação contínua)
  • Proteínas de iniciação identificam a origem da replicação e participam da ligação da DNA helicase ao DNA
  • A proteína de iniciação acoplada à DNA helicase abre o DNA na junção “Y”. As pontes de H se rompem e a molécula se abre como um zíper e se desespiraliza e a ela unem-se a primase e outras proteínas (DNA helicase + primase + outras proteínas = primossomo).
  • As fitas se mantêm separadas durante a replicação graças à ação de uma proteína a Single-strand binding proteins - SSB
a replica o do filamento leader cont
A replicação do filamento leader (cont.)
  • A primase (que é uma RNA-polimerase) constrói o primer de RNA em uma região não coberta pelas SSB.
  • A topo isomerase alivia a tensão da espiralização provocada pela abertura do DNA Ex. DNA girase
  • A DNA polimerase (III) sintetiza as novas cadeias. Elas capturam os nucleotídeos, prontos com um trifosfato, os levam ao molde, retiram dois fosfatos e os ligam ao C 3’ do nucleotídeo anterior. Elas vão polimerizando muito rapidamente (100.000 nucl./min). Outras DNA polimerases preenchem as falhas e corrigem erros.
a replica o do filamento lagging replica o descont nua
A replicação do filamento lagging (replicação descontínua)
  • Os Fragmentos de Okazaki (complementam o filamento lagging)
  • É formado um primer de RNA pela enzima Primase
  • Os primers são continuados pela DNA polimerase III até o primer do próximo fragmento de Okasaki.
  • DNA polimerase I retira o primer de RNA e completa o pedaço com nucleotídeos corretos
  • Os fragmentos são ligados pelas DNA ligases.
replica o cont nua x descont nua em e coli procariotos
Replicação contínua x descontínua em E. coli (procariotos)

(para a animação)

o modelo replissomo
O modelo replissomo
  • Duas DNA polimerases III ficam unidas e trabalham conjuntamente, a helicase e a primase movem-se ao longo do DNA. O filamento leading é alimentado imediatamente pela polimerase, enquanto o filamento lagging não é complementado pela polimerase até que um primer seja colocado sobre o filamento. Isto significa que um longo pedaço de DNA fica aberto durante o processo e que a replicação que ocorre primeiro no filamento leading enquanto a do filamento lagging ocorre em pulsos (ver animação próxima do real).
a replica o em eucariotos cont
A replicação em eucariotos (cont.)
  • Nos fragmentos de Okasaky, os primers de RNA são removidos por uma Rnase que é complementado por uma polimerase de reparo.
  • A finalização da replicação é feita com a formação de estruturas complexas no topo do cromossomo, os telômeros (ver animação do CD)
  • Os telômeros são replicados com a ajuda das telomerases (animação)
  • Sugestão de vídeo par ver após a aula sobre “telomero e telomerase e suas implicações em doenças e envelhecimento”

http://video.google.com/videoplay?docid=4557284417806796911&q=telomerase&total=4&start=0&num=10&so=0&type=search&plindex=0