Universidade Federal da Bahia

1. Estudos sobre enzimas hidrolíticas, com potencial para uso biotecnológico, produzidas por microrganismos aeróbicos e/ou anaeróbicos isolados de diferentes condições ambientais” Universidade Federal da Bahia

2. Pesquisador PRODOC: Luis Cesar Paulillo Responsável Institucional: Dra Luciana Veiga Barbosa Instituição: UFBA/Instituto de Biologia / Depto Biologia Geral Área: Bioquímica de Fungos Sub-área: Bioquímica de Fungos Filamentosos

3. Objetivos • Teste de cepas de C. perniciosa e de T. stromaticum quanto ao potencial para produção de enzimas hidrolíticas; • Avaliar a capacidade de produção de enzimas celulolíticas e xilanolíticas de C. perniciosa e T. stromaticum ; • Escolha de uma ou mais enzimas hidrolíticas (celulase e/ou xilanase) para posterior purificação e caracterização bioquímica;

4. Objetivos • Aprofundar os estudos de um dos fungos isolados que possui a capacidade de crescer em uma ampla faixa de temperatura e pH e demonstrou capacidade de degradar todos os substratos testados; • Construção de um biorreator para testes de microrganismos com potencial para degradação de compostos derivados do petróleo.

5. Introdução • Celulose – principal componente lignocelulose (polímero glicose – subunidades ligadas ligações 1,4-  glicosídicas • Celulases – digerem ligações glicosídicas • CDB • região ligante ataca os domínios • Famílias ( similaridade da seq. aa domínios catalíticos)

6. Resultados Alcançados isolado 948F C. perniciosa Halo indicativo da degradação do substrato CMC

7. Curva de crescimento do isolado 948F em meio mínimo contendo CMC

8. Curva de atividade enzimática do isolado 948F em meio mínimo contendo CMC

9. isolado 948F C. perniciosa Halo indicativo da degradação do substrato Xilana

10. Curva de crescimento do isolado 948F em meio mínimo contendo xilana

11. Curva de atividade enzimática do isolado 948F em meio mínimo contendo xilana

12. M 1 2 3 4 KDa 116,0 66,2 45,0 35,0 25,0 18,4 14,4 Bandas indicativas da produção de enzimas celulolíticas isolado 948F

13. 116,0 66,2 45,0 35,0 25,0 18,4 14,4 Bandas indicativas da produção de enzimas xilanolíticas isolado 948F

14. A B C D E F G H µ ρ σ Detecção de atividade celulolítica produzida pelo isolado selecionado isolado 948F

15. 1 2 3 4 5 6 7 8 Identificação de isoformas de enzimas celulolíticas isolado 948F

16. Halo indicativo da degradação do substrato Amidoproduzido T. stromaticum cepa ALF 323

17. Halo indicativo da degradação do substrato CMC produzido T. stromaticum cepa ALF 323

18. Halo indicativo da degradação do substrato xilana produzido T. stromaticum cepa ALF 323

19. Curva de crescimento do isolado ALF 323 em meio TLE acrescido de CMC

20. Curva de atividade enzimática do isolado ALF 323 em meio TLE contendo CMC

21. Curva de crescimento do isolado 14em meio mínimo contendo CMC

22. Figura 17. Atividade de enzimas do tipo celulolíticas produzidas pelo isolado 14 em meio Chaves acrescido de celulose na concentração de 0,5% (p/v). Curva de atividade enzimática do isolado 14em meio mínimo contendo CMC

23. Figura 18. Crescimento do isolado 11 em meio Chaves acrescido de fenol. Curva de crescimento do isolado 11 em meio mínimo acrescido de fenol

24. Cinética de degradação do substrato fenol pelo isolado 11

25. Divulgação Guedes, C. E. S. Avaliação do potencial biotecnológico de diferentes isolados de Crinipellis perniciosa (Stahel) Singer, para a produção de enzimas hidrolíticas, com ênfase em celulases. Monografia defendida por Carlos Eduardo Sampaio Guedes, em 18/02/2005, bolsista de Iniciação Científica da FAPESB, como exigência para a obtenção do grau de Bacharel em Ciências Biológicas – Ecologia: Recursos Ambientais da UFBA.

26. Divulgação • Ganda, I. S. ; Alvarez, R. C. ; Guedes, C. E. S.; Ximenes, E. A. ; Costa, M. G. C. ; Bomfim, G. C. Biodegradação de celulose por Trichoderma stromaticum. Trabalho apresentado na Semana do Biológo do Instituto de Biologia da UFBA. • Alvarez, R.C.; Ganda, I.S.; Guedes, C.E.S.; Ximenes, E. A.; Costa, M.G.C.; Bomfim, G.C.; Cardoso, E.B; Pires, C.A ; Barbosa, L.V. Estudos de Microrganismos com potencial para uso em processos de biorremediação. Trabalho apresentado na Semana do Biológo do Instituto de Biologia da UFBA. • Guedes, C.E.S.; Alvarez, R.C.; Ganda, I.S.; Ximenes, E. A.; Costa, M.G.C.; Bomfim, G.C.; Barbosa, L.V.Enzimas hidrolíticas produzidas por Crinipellis perniciosa (Stahel) Singer com potencial para uso biotecnológico. Trabalho apresentado na Semana do Biológo do Instituto de Biologia da UFBA.

27. Divulgação • Alvarez, R.C.; Ximenes, E.A.; Cardoso, E.B; Pires, C.A ; Barbosa, L.V. Uso de Microrganismos na biorremediação. (trabalho apresentado no 49º CBG) • Guedes, CES; Alvarez, RC; Ganda, IS; Ximenes, E; Costa, M G C; Bomfim, GC; Paulillo, LCMS; Barbosa, LV. Avaliação do potencial biotecnológico de diferentes isolados de Crinipellis perniciosa (Stahel) Singer para a produção de enzimas hidrolíticas, com ênfase em celulases (trabalho apresentado no 51º CBG) • Moraes, A.A.; Ganda, I.S.; Alvarez, R. C.; Guedes, C.E.S. ; Barbosa, L.. V; Paulillo, L.C.M.S. Avaliação do potencial biotecnológico de diferentes isolados de crinipellis perniciosa (stahel) singer, para proução de enzimas hidrolíticas, com ênfase em xilanases (trabalho apresentado no 51º CBG)

28. Divulgação • Alvarez, R.C.; Cardoso, E.; Veiga, L.V.; Moraes, A.A.; Ganda, I.S.; Guedes, C.E.S..; Pires, C.; Paulillo, L.C.M.S. Avaliação da cinética de degradação de fenol por microrganismo com potencial para uso na biorremediação (trabalho apresentado no 51º CBG) • Ganda, i. S..; Moraes, A.A; Alvarez,R. C. ; Guedes, C. E. S.; Costa, M. G. C; Barbosa, L. V.; Paulillo, L.C.M.S. Avaliação da produção de enzimas hidrolíticas do tipo celulolíticas por diferentes isolados de Trichoderma stromaticum (trabalho apresentado no 51º CBG)

29. Equipe Dra Luciana Veiga (IB-UFBA) Dr Laurival Vilas-Boas (IB-UFBA) Dr Luis Cesar Paulillo (Prodoc - Fapesb/UFBA) Dr Marcio Gilberto Cardoso Costa (UESC) Carlos Eduardo S. Guedes (mestrando UESC) Artur Araújo de Moraes (IC-Fapesb) Ingrid Schweter Ganda (IC- Fapesb) Rita Cajazeira Alvarez (AT- Fapesb) Colaboradores Dr Gonçalo Guimarães Pereira (UNICAMP) Dr Antonio Figueira (CENA/USP)