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Diagnostic bacteriologique de la TB

Diagnostic bacteriologique de la TB. Antigona Trofor. Examen de microscopie. On practique un frottis du produit pour identifier les micobacteries acid – alcoolo-resistentes Le frottis est sterile ( anse de bacteriologie ), seche a l’air ( a la temperature de la chambre )

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Diagnostic bacteriologique de la TB

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Presentation Transcript

  1. Diagnostic bacteriologique de la TB AntigonaTrofor

  2. Examen de microscopie • On practique un frottis du produit pour identifier les micobacteries acid –alcoolo-resistentes • Le frottisest sterile (anse de bacteriologie), seche a l’air ( a la temperature de la chambre) • Fixation : en flamme 3 fois

  3. La coloration speciale pour evidentier les BAAR Substance fluorescente: auramine-rhodamine Coloration avec fuxine en chaleur pour permettre la penetration du colorant a l’interieur des bacteries qui ainsiapparaissent en couleur rouge Coloration ZIEHL-NEELSEN

  4. Decoloraration avec acid –alcool (alcool 70° et acidesulfurique) jusqu’a la disparitionmacroscopique de la coloration rouge Toutes les structures, en exceptant les micobacteries qui restent rouges, vont se decolorer. Pour le contrast recoloration avec bleumetilen Coloration ZIEHL-NEELSEN

  5. Examenmicroscopique • En microscope optique a objectiv immersion 100x • Micobacteriessont des batons minces rouges, curbees, +/_granulations, isoleesougropees en couples/groups, en arrier-plan bleu • On compte les BAAR en 100 champs microscopiques • Resultatssontexprimesquantitatif en fonction de la densite des bacillessur la lame • La Sensibiliteestrelativement petite: pour un resultat positive on a besoin du moins de 10000 bacili/ml

  6. Interpretation semicantitative

  7. Culture des micobacteries • Methode de referrence pour le diagnostique de la TB • Permet l’ identification de la souche de la micobacterie et a tester la sensibilite aux medicaments antituberculeux • Produitestdecontamine avec solutions antiseptiqueshomogenisees • Ensuite on le centrifuge et on le neutralise avec un acidefaible • Enfin, on inocule le produitdans le milieu de culture

  8. MILIEU LÖWENSTEIN JENSEN • Culture en milieu solide – le standard de reference pour isoler le MT • Le MT vapousser pendant 4-6 semaines • Culture en milieu liquide avec detection radioactive /fluorescence permet de detecter les MT en 1-2 semaines

  9. MILIEU LÖWENSTEIN JENSEN

  10. Les Colonies MT en milieuxsolidessontrondes, jaune- pale, comme les choux-fleurs, isoleesouconfluentes. Identification de l’ espece se fait par des testes de biochimie Les resultatss’exprimentsemicantitatif en fonction de la densite des colonies. Culture des micobacteries

  11. REFERRENCES • http://images.google.ro/imgres?imgurl=http://telmeds.org/AVIM/Abacterio/mycobacterias%2520y%2520nocardia/El_medio_de_cultivo_se_llama_Lowenstein_Jensen.JPG&imgrefurl=http://telmeds.org/AVIM/Abacterio/mycobacterias%2520y%2520nocardia/mycobacterias_nocardia.htm&h=600&w=900&sz=171&hl=ro&start=15&um=1&tbnid=4P7BwIflgWEkmM:&tbnh=97&tbnw=146&prev=/images%3Fq%3DLowenstein%2BJENSEN%26svnum%3D10%26um%3D1%26hl%3Dro%26lr%3Dlang_ro%26sa%3DG • Tuberculoza- curs pentru studenti, 2004- Institutul de Pneumologie “Marius Nasta” Programul National de Control al Tuberculozei • http://faculty.plattsburgh.edu/jose.deondarza/Bio406/Handouts/notes_09.htm http://images.google.ro/imgres?imgurl=http://telmeds.org/A

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