1 / 15

Nešpecifická imunita

Nešpecifická imunita. Imunita - mnohozložkový , vyregulovaný systém

howell
Download Presentation

Nešpecifická imunita

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Nešpecifická imunita

  2. Imunita - mnohozložkový, vyregulovaný systém Úlohy imunitný dozor - autoimunita, protinádorová imunita sledovanie adekvátnosti - alergia obrana proti infekcii - antiinfekčná imunita Obranné línieantiinfekčnej imunity: - špecifickáhumorálna - špecifickábunková - nešpecifická

  3. Imunitná - obranná línia • Špecifická - bunková -kvantitatívna • -funkčná - i.d.testy (tuberkulin) • -humorálna- kvantitatívna • - funkčná - protilátky proti špecifickýmbakteriálnym a vírusovýmantigénom - SEROLOGICKÉ REAKCIE • Nešpecifická - bunková- kvantitatívna - počet lymfocytov (rozety), počet buniek - KO - leu, lymfo, mono, eosino……… • - funkčná - fagocytóza, FA, FI, test aktivácielymfocytov • - humorálna- kvantitatívna - IgG,IgA,IgM, C3,C4,CH50,CIK, proteiny akútnejfázy zápalu-CRP, • - funkčná - klinicky, baktericídna aktivita séra, stanovenielyzozymu

  4. Podozrenie na IDS • Skríningovévyšetrenia: - všeobecné - KO + diff., FW, CRP, ASLO, RF - imunologické - protilátková imunita: IgG, IgA, IgM, hladiny protilátok po očkovaní proteinovými ag (diftéria, tetanus), poysacharidovýmiag (Hib), vírusovýmiag, bežnýmantigénom ASLO) • - bunková imunita - celkový počet lymfocytov - rozety, subpopulácie, kožné testy • - fagocytóza - diff. leukogram, FA,FI • - komplementový systém - CH50, C3, C4,

  5. Demonštrácia • Lyzozym - funkciamakrofágového systému • Baktericídna aktivita séra - humorálna imunita - funkčný test • CRP - proteiny akútnejfázy zápalu • T lymfocyty, B lymfocyty - kvantitatívnehodnoteniebb imunity • IgG, IgA, IgM - kvantitatívnahumorálna imunita, funkčnéhodnotenie B lymfocytov • Fagocatóza - Fagocytárny index

  6. Stanovenielyzozýmu • Lyzozým - bázickánízkomolekulovábielkovina • Micrococcuslysodeikticus - baktériarozpustiteľnályzozýmom • Vzorka, v ktorejpredpokladámelyzozým - sliny, krv, moč, CSM • Agarvktoromrozmiešamesuspenziukmeňa a vylejeme na sklenúplatňu • Vyrežeme jamky, do ktorýchnakvapkámeštandardy o známejkoncentráciilyzozýmu a neznáe vzorky • Odčítameprejasnenie - sérum s obsahomlyzozýmu rozpustilo bakteriálnususpenziu v agare • Veľkosť zóny vzorky porovnáme s veľkosťou zóny známejštandardy - vypočítamepodľavzorca Štandardy lyzozýmu Neznáme vzorky Agar + bakteriálna suspenzia

  7. Úloha 1: Stanovenie lyzozýmu - schopnosť lyzovať bunky Micrococcus lysodeiticus Zahriaty MPA + susp. Mikroorg vyliať na sklo - po stuhnutí vykrojenie jamiek - do jamiek vzorka (roztok lyzozýmu v rôznych koncentráciách- od pacienta) - inkubácia 24 hod vo vlhkej komôrke pri lab. teplote - odčítanie zóny inhibície rastu Micrococcus lysodeiticus

  8. Úloha 2: Baktericídnaaktivita séra • Escherichiacoli • Plná krv - stanoví sa počet leukocytov • Pripravísasuspenzia baktérii - nefelometricky - meraním zákalu - s rôznoukoncentráciou baktérií 10, 100, 103 104 105 106 • Pridása sérum a kultivuje sa • Počítasa počet baktérií, ktorévyrástli v prítomnosti séra v zovzorcasavypočítabaktericídna aktivita: • Podstata - v prítomnosti zdravého séra určité množstvo baktérii je zabité

  9. Baktericídna aktivita séra • čerstvé ľudské sérum + suspenzia baktérií ( E. coli) • ( na porovnanie pripravujeme aj skúmavky s inaktivovaným sérom ) • premiešať, inkubácia vo vodnom kúpeli alebo v termostate • pri 37 st.C 1 hod. • obsah skúmaviek do Petriho misiek + agar = ink. 24-48 hod • počítanie kolónií

  10. Úloha 3: CRP - C reaktívny protein proteinreagujúcisosubstanciou C v stene pneumokokov • Do kapiláry sanaleje roztok s protilátkou proti CRP a opatrnesa navrství sérum. • Aksa v sérenachádza CRP - vznikne na rozhraní biely precipitát • Test kvalitatívny v kapilárach • Kvantitatívnestanovenie - difúziou v agare a porovnanímsoštandardou (akolyzozým, Ig, proteiny akútnejfázy zápalu, C3, C4)

  11. Imunodifúzia v agare • Test na stanoveniekoncentrácie - napr. IgG, IgA, IgM, C3, C4, proteiny akútnejfázy - ceruloplazmín, makoglobulín…………. • Princíp - do agarusazamieša protilátka proti látke, ktorú chceme dokázať. Do vytvorenýchjamiekkvapnemeštandardy (4-5) so známou klesajúcoukoncentráciou a neznáme vzorky. Vytvorísa prstenec na základe difúzie séra s hľadanou látkou a reakcieAgAb. Veľkosťprstenca je úmernákoncentrácii a porovnanímsoštandardouvypočítamekoncentráciu.

  12. Komplement

  13. Úloha 4: stanovenie zložiek komplementu

  14. Úloha 5: Fagocytóza a fagocytárny index • Leukocytom (PMNL) ponúknemecudzorodúláktu - kvasinky - tak, že plnúkrv inkubujeme z pekárenskýmikvasnicami. Leu ichfagocytujú. Urobíme krvnýnáter, ktorýzafarbíme May Grunwaldovoumetódou. Pod mikroskopompočítame - počet fagocytujúcich a nefagocytujúcich PMNL do 100. Počet fagocytujúcichleuudáva fagocytózu v %. U fagocytujúcichleuspočítavame aj počet gafocytovanýchčiastočiek. Počet fagocytovaných čiastočiekdelímepočtomfagocytujúcichleu a dostaneme fagocytárny index - hodnotu, ktorá určuje aktivitu fagocytov

  15. Určenie fagocytárnej schopnosti PMNL počet fagocytujúcich PMNL FA % = x 100 200 počet fagocytovaných kandíd FI = počet fagocytujúcich PMNL FA = 77,1 +- 8,8 % FI = 3,6 +- 0,8

More Related