MATERIAL ŞI METODE

1. SCREENINGUL FITOCHIMIC ŞI ACTIVITATEA ANTIOXIDANTĂ A UNUI EXTRACT USCAT OBŢINUT DIN FRUNZE DE BETULA PENDULA ROTH. (MESTEACĂN) Teodora Costea1, Viorica Istudor1, Maria Lidia Popescu1, Cerasela Elena Gîrd1, Laurian Vlase2, Andreea Roxana Lupu3, Radu Claudiu Fierăscu4, Irina Fierăscu4 1UMF ,,Carol Davila’’, Facultatea de Farmacie, Bucureşti, România; 2UMF ,,Iuliu Haţieganu’’, Facultatea de Farmacie, Cluj-Napoca, România; 3Institutul Naţional de Cercetare-Dezvoltare pentru Microbiologie şi Imunologie ,,Cantacuzino’’, Bucureşti, România;4Institutul Naţional de Cercetare-DezvoltarepentruChimieşi Petrochimie, Bucureşti, România MATERIAL ŞI METODE OBIECTIVE Material:extract uscat(BE)obţinut prin refluxarea a 300 g p.v. (recoltat în lunamai 2011 din localitatea Morăreşti, Jud. Argeş) cu etanol 40% timp de 30 min. într-un raport p.v./solvent de 1:20 (I extracţie) respectiv 1:10 (a-II-a extracţie); concentrarea soluţiei la rotavapor, liofilizare (~ 50 g extract). Metode: a)spectrofotometrice- flavone (g% hiperozidă), acizi fenolcarboxilici= AFC (g% acid clorogenic), proantociani (g% clorură de cianidol), taninuri (g% acid tanic), polifenoli totali (g% acid tanic), saponozide triterpenice (g% acid betulinic); b) HPLC-MSpentru polifenoli – soluţie etanolică 40% (SBE) şi hidrolizată (SBEH); c) spectrometrice (ICP-AES, F-AAS) – elemente minerale; d) antioxidante în sistemacelular(ORAC, ABTS, FRAP) - IC50 (mg/mL); echivalenţi trolox şi mmoli Fe+2/mg extract/standarde (curbe trolox pt ABTS, ORAC şi FeSO4 pentru FRAP)şi sistem celular (celule HepG2) – evaluarea producţiei intracelulare de specii reactive de oxigen = SRO (cu DCFH-DA) în prezenţa co-tratamentului BE + aloxan (agent oxidant); e) testul MTT – determinarea viabilităţii celulare (VC) în prezenţa BE (verificarea unui potenţial efect citotoxic) şi stabilirea dozei de aloxan care reduce cu 50% VC.Analiza statistică: Excel 2010, GraphPad Prism 5 (media ± SD, n = 3). REZULTATE Prin HPLC-MS au fost identificaţi noi compuşi - acizii gentisic şi sinapic. Conţinutul de hiperozidă, isoquercitrozidă, apigenol este mai scăzut comparativ cu rezultatele lui Germano M.P. & al. (asupraunui extract etanolic), dar cel de quercetol, miricetol, quercitrozidă este superior. Activitatea antioxidantă a BE este inferioară vitaminei C/aciduluigalic. 50 mM aloxan La 72 h de la incubarea celulelor cu 0,1 mg/mL BE se observă un efect citotoxic (VC ~`70%), datorat probabil saponozidelor şi/sau efectului pro-oxidant al polifenolilor. BE scade producţia de SRO doză-depent, probabil datorită compuşilor fenolici (caretraversează membrana celulară printr-un mecanism pasiv/ activ) şi elementelor minerale . REFERINŢE Vlase L. & al. – Determination of phenolic compounds from Geranium sangvineum by HPLC, J. of Liquid Chromatography and Related Tehnologies, 2005, 28(19): 3109-3117. Germano M.P. & al. – Betulapendulaleaves – polyphenolic characterization, potential innovative use in skin whitening products, Fitoterapia, 2012, 83(5): 877-882. Pandey K.B & al. – Plant polyphenols as dietary antioxidants in human health and disease, Oxid Med and Cell Long., 2009, 2(5):270-278. Legendă: control = celule netratate (menţinute doar în mediu de cultură) CONCLUZII Extractul uscat obţinut din frunze de Betula pendula Roth. prezintăpotenţial antioxidant şiarputea fi utilizatîntratamentul adjuvant al unorafecţiunihepaticeîn care esteimplicatstresuloxidativ.