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Tutorial de Uso Básico. Nikon 14. Nikon 14 “ Tutorial de Uso”. Características Nikon 14…………………………..........pag.3-4 Pasos iniciales Uso Nikon 14……………………..….….pag. 5 Luz Transmitida Trabajo con luz transmitida Campo Claro………………………………………………….…pag. 6-7 Fluorescencia
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Tutorial de Uso Básico Nikon 14 Tutorial Nikon 14
Nikon 14 “Tutorial de Uso” Características Nikon 14…………………………..........pag.3-4 Pasos iniciales Uso Nikon 14……………………..….….pag. 5 Luz Transmitida Trabajo con luz transmitida Campo Claro………………………………………………….…pag. 6-7 Fluorescencia Trabajo con luz reflejada (fluorescencia)………………………..…………….…pag.8-10 Utilidades de Interés…………………………………….pag. 11 Tutorial Nikon 14
Microscopio de Luz Transmitida -Campo Claro -No tiene Fases ni DIC Nikon 14 APLICACIONES. Microscopio de Fluorescencia -Fish (“hibridaciones in situ”) -Filtros fluorescencia : Dapi Azul Amarillo Rojo Verde Triple(verde+rojo+dapi) Doble(verde+rojo) Localización : Microscopía Planta – 1 Tutorial Nikon 14
Filtros Fluorescencia: -Dapi -Azul -Amarillo -Verde -Rojo -Doble(verde+rojo) -Triple(verde+rojo+dapi) Nikon 14 CARACTERISTICAS Objetivos : x10 x60oil X100oil Filtros/Anillos DIC No tiene Filtros/Anillos Fases No tiene Condensador : 1´4 Equipo conectado : -Iluminador Nikon -Rueda Filtros Motorizada -Cámara COHU -Mac PC -Centrador de lámpara fluorescencia Tutorial Nikon 14
Pasos Iniciales Uso Nikon 14 2 3 1 1-Encendemos el microscopio Nikon 14 equipo. Es necesario encender 3 controladores: 1.1-Encendemos el microscopio (1). 1.2.-Encendemos la caja control de filtros fluorescencia (2). 1.3-Encendemos la caja de fluorescencia (3). 2-Encendemos el Ordenador asociado (Mac) para acceder al programa de captura de imágenes. Tutorial Nikon 14
Trabajar en Luz Transmitida (Campo Claro)(BF). 2 1 3 1-Encendemos el microscopio Nikon 14 y colocamos el botón frontal de control en posición de luz TRANSMITIDA (DIA)(1) en la rueda de control : El controlador presenta 3 posiciones posibles Off : equipo apagado BF: modo luz transmitida FL: modo fluorescencia 2-Colocamos la barra de control de imagen(lateral derecho )(2) en la posición adecuada. 2 posiciones posibles: -hacia adentro para VISUALIZAR la muestra (modo observador). -hacia afuera para CAPTURAR imágenes en programa asociado (modo captura) 3-Bajamos la palanca del “difusor”(3) situada en el lateral derecho . Por defecto ya se encuentra bajada. 4-Colocamos la muestra y enfocamos la zona con el objetivo deseado. El cambio de objetivo está automatizado con la botonera lateral Izquierda (4) Objetivos disponibles: x 10 x 60oil x 100oil Tutorial Nikon 14
Trabajar en Luz Transmitida (Campo Claro)(BF) 6 5 5 –Para optimizar las condiciones del modo LUZ TRANSMITIDA se usan las ruedas reguladoras situadas en los laterales del equipo: 1- Control de intensidad luminosa :rueda lateral izquierda(5).Permite regular la cantidad de luz sobre la muestra. 2-Control de los diafragmas de campo y apertura : ruedas laterales derechas(6). NOTA: Si trabajamos con el objetivo más pequeño x10 , es necesario abrir al máximo, los diafragmas de apertura y de campo (6), para poder optimizar la iluminación del campo de visión. Tutorial Nikon 14
Trabajar en Luz Reflejada (Fluorescencia) NORMAS BÁSICAS 3 1 2 1-Encender los 2 controladores de la FLUORESCENCIA 1-Caja de filtros fluorescencia 2-Caja de Fluorescencia Antes de encender la lámpara de fluorescencia es necesario verificar en el Registro de Uso del equipo que han transcurrido un mínimo de 30 minutos desde la sesión previa ( recordar que existe riesgo de explosión de la lámpara de mercurio (vapores tóxicos) si se enciende en caliente). Para evitar la pérdida/quemado de la fluorescencia de nuestra muestra cada vez que NO estemos capturando la imagen es recomendable USAR el “OBTURADOR de la Fluorescencia” Shutter:Botón lateral izquierdo (3) Tutorial Nikon 14
Trabajar en Luz Reflejada (Fluorescencia) 1 2 3 1-Encendemos el microscopio Nikon 14 y colocamos el botón frontal de control en posición de FLUORESCENCIA EPI (1) en la rueda de control : El controlador presenta 3 posiciones posibles Off : equipo apagado BF: modo luz transmitida FL: modo fluorescencia 2-Colocamos la barra de control de imagen(lateral derecho )(2) en la posición adecuada. 2 posiciones posibles: -hacia adentro para VISUALIZAR la muestra (modo observador). -hacia afuera para CAPTURAR imágenes en programa asociado (modo captura) 3-Bajamos la palanca del “difusor”(3) situada en el lateral derecho . Por defecto ya se encuentra bajada. 4-Colocamos la muestra y enfocamos la zona con el objetivo deseado. El cambio de objetivo está automatizado con la botonera lateral Izquierda (4) Objetivos disponibles: x 10 x 60oil x 100oil 4 Tutorial Nikon 14
Trabajar en Luz Reflejada (Fluorescencia) 5-El cambio de filtro se realiza a través del panel de control de fluorescencia(1) Filtros disponibles : -Dapi/Azul -Rojo -Verde 6-Para evitar la visión directa de la fluorescencia es posible usar el protector retráctil (2) 7-Aplicar el OBTURADOR de fluorescencia (3) para evitar quemar la fluorescencia cuando no estemos trabajando con la muestra. 1 1 3 2 Tutorial Nikon 14
Utilidades de Interés Barra reguladora de imagen Tarjeta de configuración. 1 2 NOTA :Nikon 14 posee una tarjeta accesoria Nikon IC card (2) que permite configurar y grabar en la tarjeta 3 parámetros: -diafragma de campo. -diafragma de apertura. -intensidad de transmitida. Por defecto las condiciones están optimizadas para la visión y captura de imágenes. Nikon 14 presenta una barra reguladora (1) para trabajar en 2 modos posibles 1-OBSERVACIÓN. Posición Interna: permite la observación de la muestra 2-CAPTURA IMAGENES. Posición Externa: permite la captura de imágenes (Modo Captura de imágenes) Tutorial Nikon 14
Unidad de Microscopía Centro de Investigación del Cáncer Campus Miguel de Unamuno 37007 Salamanca (Spain). Tutorial Nikon 14