Universidad Nacional Autónoma de México Facultad de Estudios Superiores Iztacala

1. Actividad antibiótica de una nueva especie del género Streptomyces evaluada en contra de Staphylococcus aerus y Escherichia coli Universidad Nacional Autónoma de México Facultad de Estudios Superiores Iztacala Metodología Científica III Avila Suárez Ana Belem

2. ACTINOMICETOS FORMAN SON MUESTRAN PARA TINCIÓN DE GRAM BACTERIAS FILAMENTOS ESPORAS REPRODUCCIÓN DEPENDIENDO DE CON IMPORTANCIA FUNCIONES DIVERSAS CLASIFICACIÓN TALES COMO EVOLUTIVA FIJADORES DE NITRÓGENO TAXONÓMICA PATÓGENOS TERMÓFILOS SAPRÓFITOS RECICLADORES PRODUCTORES DE ANTIBIÓTICOS DIVIDIDA EN 8 GRUPOS ACTINOMYCETES MYCOBACTERIA ACTINOPLANES ESTREPTOMYCETOS DERMATOPHILUS NIOCARDIAS FIJADORES DE NITRÓGENO MICROMONOSPORAS COMO PRODUCTORES DE ANTIBIÓTICOS NUEVA CEPA POSIBLEMENTE SON STREPTOMYCES CUENTAN CON PRODUCEN HABITAN EN FORMAN METABOLISMO VERSÁTIL ESPERMATÓFOROS MULTICROMOSOMALES FILAMENTOS SUSTANCIAS EXTRACELULARES SUELOS POR CON TABICACIÓN CRECIMIENTO EN EXTREMO DE FORMAN SON ACTIVIDADES REGULADAS POR HIFAS CONIDIOSPORAS SON ACTIVIDADES REGULADAS POR GENES

3. Antecedentes:

4. Objetivo general: Objetivos particulares: • Determinar si los compuestos antibióticos son termolábiles o termoestables. • Evaluar si los compuestos antibióticos producidos por Streptomyces sp., son activos contra bacterias Gram-positivas y Gram-negativas. Evaluar la actividad antibiótica de una nueva especie del género Streptomycessobre el crecimiento de Staphylococcus aureus y Escherichia coli.

5. Hipótesis: Algunas especies del género Streptomyces muestran actividad antibiótica en contra de microorganismos; entonces, la nueva especie, posiblemente biosintetize compuestos con actividad antibacteriana.

6. Metodología:

7. Resultados: Inhibición de Streptomyces sp.en contra de S. aerus Cuadro 1. Promedio de la distancia de inhibición de Streptomyces sp. contra S. aerus, con diferentes días de incubación.

9. Inhibición de Streptomyces sp.en contra de E. coli No se encontró un área de inhibición después del primer día de incubación . Cuadro 2. Promedio de la distancia de inhibición de Streptomyces sp. contra E. coli, en el primer día de incubación. No existen diferencias significativas en la inhibición de Streptomyces sp. Contra E. coli y S. aerus al primer día de incubación con una t0= 1.81 y valores críticos de ±2.776.

10. Naturaleza termoestable del antibiótico producido por Streptomyces sp. No fue evidente el crecimiento de S. aerus en trozos de agar con antibiótico sometido a 70°C de temperatura. No fue evidente el crecimiento de S. aerus en trozos de agar con antibiótico mantenidos a temperatura ambiente.

11. Discusión: • En general, en suelos neutros-alcalinos como el de Zapotitlán, Puebla, la mayoría de los organismos que pueden competir por recursos con los individuos del género Streptomyces, son bacterias Gram-positivas (Nkanga E. y Hagedorn C.), por lo que resulta lógico que la nueva cepa, hallada en tal contexto, muestre actividad en contra de S. aerus, que es una bacteria Gram-positiva. • El agente antibiótico producido por Streptomyces sp. es activo en contra de la bacteria Gram-positiva Staphylococcus aerus, por lo que es posible que el mecanismo de acción tenga lugar sobre la pared celular de este tipo de organismos. • La producción de antibióticos por bacterias del género Streptomyces, está determinada por su crecimiento y reproducción, pues la presencia de estos les permite el desarrollo de la colonia. Las tres actividades ocurren simultáneamente y están reguladas por genes, que pueden ser clusters; en el caso de S. coleicolor el gen regulador es el bld, que codifica el RNA t que especifica la leucina que forma parte de los péptidos que actúan como señales químicas para la producción de antibióticos (Chater K., 2006).

12. Conclusiones: • La nueva cepa de Streptomyces sp. produce un agente antibiótico en contra de la bacteria Gram-positiva Staphylococcus aerus, que inhibe su crecimiento. • A mayor tiempo de incubación, mayor es la inhibición de Streptomyces sp. contra S. aerus. • El agente antibiótico producido por la nueva cepa de Streptomyces sp. no es bactericida con respecto a la bacteria Gram-negativa E. coli . • El agente antibiótico producido por Streptomyces sp. contra S. aerus es termoestable.

13. Bibliografía: • Busti E., Monciardini P., Cavaletti L., Bamonte R., Lazzarini A., SosioMargherita y Donadio S., 2006. Antibiotic-producingabilitybyrepresentatives of a newlydiscoveredlineage of actinomycetes. Microbiology. 152:675-683 • Chater K., 2006. Streptomycesinside-out: a new perspectiveonthe bacteria thatprovideuswithantibiotics. Philosophicaltransactions of the royal society. 361: 761-768 • Majer J. y Chater K., 1986. Streptomyces albus G produces anantibioticcomplexidenticaltopaulomycins A and B. Journal of General Microbiology. 133: 2503-2507 • Nkanga E. y Hagedorn C., 1978. Detection of Antibiotic-ProducingStreptomycesInhabitingforestsoils. Antimicrobialagents and Chemotherapy. 14 (1): 51-59 • Taechowisan T., Chunhua L., Shen Y. y Lumyong S., 2005. SecondarymetabolitesfromendophyticStreptomyces aureofaciens CMUAc 130 and theirantifungicalactivity. Microbiology. 151: 1691-1695

14. Propuestas: • Aislar el (los) compuesto (s) químicos producidos por Streptomyces sp., que actúan como antibióticos en contra de S. aerus. • Determinar la estructura química del (los) compuesto (s) antibióticos producidos por Streptomyces sp.

15. CULTIVADO EN STREPTOMYCES SP. MEDIO RENNIE PRODUCE ANTIBIÓTICOS PUEDEN SER METABOLÍTOS SECUNDARIOS ENZIMAS LÍTICAS SE AISLAN POR SE OBTIENE CROMATOGRAFÍA HPLC PREPARATIVA COMPUESTO PURO SE ELUCIDA MEDIANTE SEPHADEX LH20 PLACA FINA COLUMNA SE PURIFICA POR ESPECTROSCOPÍA ESPECTROMETRÍA DE MASAS SE OBTIENEN SE SEPARAN SE EMPLEA PARA MOLÉCULAS PEQUEÑAS FRACCIONES SEPARACIÓN DE MOLECULAS SE OBTIENEN UV IR RESONANCIA MAGNETICA NUCLEAR PESO MOLECULAR EVALUACIÓN FRACCIÓN ACTIVA POR CRITERIO DE SE USA PARA PESO MOLECULAR CONTRA DETECTA EMPLEA MEDIANTE EL METODO SE USA PARA DETECTAR DOBLES ENLACES BACTERIAS GRAM + ISÓTOPOS POSICIÓN DE C e H MENOR DE 800 UMA EN COMO IDENTIFICAR GRUPOS FUNCIONALES KIRBY BAUER MOLÉCULA 13 C Y 1H

16. PRIVACIÓN DE NUTRIENTES EFECTOS DE pH CODIFICADOS POR EVITAN SUSTANCIAS EXTRACELULARES GENES CLUSTERS ENSAYOS ALTERNATIVOS SE TRADUCEN EN TUBOS CON CALDO PUEDEN SER UN MISMO PRODUCTO ANTIMICROBIANOS ENZIMAS PEPTIDASAS SE PRUEBAN MEDIANTE DILUCIÓN EN PLACAS DE AGAR CON MATERIAL LIPÍDICO PUEDEN SER DISCOS DE PAPEL BACTERICIDAS ANTIFÚNGICOS GRADIENTES EN PLACAS TALES COMO ESTREPTOMICINA ANFOTERICINA B NEOMICINA ESPECTINOMICINA TETRACICLINAS CLOROTETRACICLINAS CLORANFENICOL NISTATINA ERITROMICINA CLINDAMICINA

17. SUELO Neutro Alcalino pH 6.9 pH 8.2 Muestreo Área de cobertura 30 cm de distancia del tronco Zona de raíces de mezquite 10 cm de profundidad Cribado y molienda Aislamiento Siembra por estrías Medio Rennie

18. GENES bld tRNA CODÓN UUA LEUCINA PÉPTIDOS SEÑALES QUÍMICAS

19. Área de inhibición producida por Streptomyces sp. contra S. aerus después de 1 día de incubación. Área de inhibición producida por Streptomyces sp. Contra S. aerus después de 6 días de incubación.

20. Inhibición producida por Streptomyces sp. Contra E. coli después de 1 día de incubación.