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第五部份:食品與病害. 食品微生物感染疾病 I Foodbrone Microbial Infections I. 黃顯宗 東吳大學 M202. Indigestion Food intolerance, Food sensitivity Algal toxins Metal poisons Phyllotoxins Manufactured, Agricultural / household Chemicals. Zootoxins Protozoan disease Infestations Microbial infection
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第五部份:食品與病害 食品微生物感染疾病 IFoodbrone Microbial Infections I 黃顯宗 東吳大學 M202
Indigestion Food intolerance, Food sensitivity Algal toxins Metal poisons Phyllotoxins Manufactured, Agricultural / household Chemicals Zootoxins Protozoan disease Infestations Microbial infection Bacterial / fungal intoxification Foodbrone Illnesses
教學目標 • 瞭解食品中微生物感染的疾病 • 病毒 • 細菌
Enteroviruses 腸道病毒 • 病毒的特徵 • http://virology-online.com/viruses/Enteroviruses.htm
台灣疾病管理局資訊 • 腸病毒屬於小RNA病毒科(Picornaviridae),為一群病毒的總稱 • 在1997年以前,已知而被分類的腸病毒共有小兒麻痺病毒(Poliovirus)共3型(1至3型)、克沙奇病毒(Coxsackievirus),含23種A型(A1至A22型,A24型)及6種B型(B1-B6型)、伊科病毒(Echovirus)共30型(1至33型,但8、10及28型除外)及腸病毒(Enterovirus)(68型~)等60餘型 • 近年來又陸續發現多種型別,依據基因序列分析結果將之重新歸類,分為人類腸病毒A、B、C、D(Human enterovirus A、B、C、D)型,其中腸病毒71型被歸類於人類腸病毒A型。在所有腸病毒中,除了小兒麻痺病毒之外,以腸病毒71型(Enterovirus Type 71)最容易引起神經系統的併發症 http://www.cdc.gov.tw/sp.asp?xdurl=disease/disease_content.asp&id=1662&mp=1&ctnode=1498#1
腸病毒疫情 • 疫情查詢 • http://nidss.cdc.gov.tw/singledisease.aspx?Pt=s&dt=3&dc=1&disease=0749&d=3&i=all&s=determined_cnt&RK=Y&Q=N
Infectionus Hepatitis • A型肝炎 • 通常由糞便污染飲水或食物傳染,水產食物如牡蠣 • 有許多outbreak發生 • Hepatitis A病毒,可耐冰箱儲存、60度30分鐘加熱、1 ppm氯、耐乾性易強 • 症狀為:噁心、嘔吐、下痢、發熱、疲倦態、肝肥大、黃疸等 • 潛伏期 10~50日 http://www.kuleuven.ac.be/rega/mvr/pictures/HepatitisA-1.jpg
Polimyelitis 小兒痲痹病毒 • 水傳染 • 極少食物傳染 • 病毒本身不耐熱、耐乾耐冷 • 小兒麻痺 • http://health.online.sh.cn/health/gb/images/2005-04/26/xin_150402261427531192002.jpg • http://www.dls.ym.edu.tw/neuroscience/poliov_c.htm • http://www.epochtimes.com/b5/4/8/4/n616296p.htm
Other Viruses 其他病毒 • Other Viruses 其他病毒 • Coxsackie viruses • ECHO viruses • Norwalk viruses • Norwalk-like viral agent • 水海產食品污染較多 • 食物病毒研究困難
Streptococci • 唯一致病者 S. pyogenes • 引起喉部感染,scarlet fever 腥紅熱 • 引起的急性呼吸道傳染病,以發熱,咽喉炎,周身皮膚起細小密集的腥紅色皮疹為主 • 主要污染原是各種消毒不良的乳品,畜產品等 • 現代的殺菌法,動物病時 sulfa drugs與抗生素應用減少污染的可能
Salmonellosis • 各種Salmonella 菌病的總稱,包括腸胃炎,傷寒,副傷寒等 • 美國發生最多的食物中毒,每年只有10%舉報 • 每年中夏季(7~9月)最多,冬季(2~4月)最低,台灣夏季較長,冬季較短,分布未知 美國分佈 Ayres et al., 1980
Salmonella 菌 • G- non-spore forming rods,通常不用lactose • 生長溫度低至6.7~7.8度(雞肉)受食物影響,最高45.6度,最適溫度37度 • pH range 4.1~9.0 • 最低Aw 0.93-0.95 • D60C 0.06~11.3 min
Salmonella 菌 • 血清型命名多樣化,如感染主地名等,不合命法Nomenclature • 多依據血清型 • Kauffman-White Scheme • 有O (somatic) 體抗原 • K or Vi (capsular) 夾膜抗原 • H (flagella) 鞭毛抗原 • 超過兩千種血清型(serovar)
Salmonella 菌新命名法則 • 舊名 Salmonella typhimurium • 新名 • 全寫 Salmonella enterica serotype Typhimurium • 縮寫S. enterica serotype Typhimurium • 縮寫S. enterica Typhimurium • 縮寫S. Typhimurium Serotype 或稱 serovar
Sources of Salmonella • 可能傳自帶原者 • “Typhoid Mary” 傷寒瑪莉 • 禽類與蛋 • 飼養動物等家庭小動物(蒼蠅、老鼠、蟑螂)幫忙傳播 • 食物中毒以各式肉類製品於室溫長期放置過久、水海產、乳品等
The Disease • 發病菌數因種因人而異 • 潛伏期(incubation time)12~36小時,5 - 72小時少見 • 症狀:nausea,vomiting,abdominal pain,diarrhea,headache,chills,watery stool,prostration,muscular weakness,moderate fever … • 維持2~6天,極少死亡 • 0.025%病人成為帶原者,傷寒瑪莉
發病的認定 • 食物中檢出Salmonella • 有相當菌數,原污染高或該食物適合生長 • 有攝取活菌
Shigellosis 赤痢 • 或稱為桿菌性痢疾 • Salmonella與Shigella很類似,Shigella 無motility • Shigella有四種,各種serotypes • S. dysenteriae • S. flexneri • S. boydii • S. sonnei • 都有endotoxin,而S. dysenteriae type II的Shiga-toxin赤痢毒素為1A5B subunit結構
Shiga toxin http://template.bio.warwick.ac.uk/staff/toxin/molecules/sltb.html http://www.nature.com/emboj/journal/v19/n22/images/7593408f1.jpg
Shigellosis 赤痢 • 潛伏期incubation 1~7日,長至2週,症狀:腹絞痛、血痢、發熱等,腸道紅腫腐蝕,兼或有腎功能失調、黃疸、但無菌血症 Septicemia • 多是水污染為主waterborne,亦可經由食物傳播,無明顯季節性
腸毒性的測定Enteropathogenicity • 對已知的腸毒素,可用EIA (ELISA)等法,有商業化產品 • 對未有商品化產品,或對未知菌種或對未知毒素時,要用Bioassays法
Bioassays 生物檢測 • Rabbit Ileal Loop Ligation (RIL) • Removable Intestinal Tie Adult Rabbit Diarrhea (RITARD) • Infant Mouse test • Vasucular Permeability • Cell Culture Assay • Adrenal 1 cell • Chinese Hamster Ovary (CHO) • http://micro.magnet.fsu.edu/primer/techniques/phasegallery/chocells.html • HeLa cell, Vero cell … • HEp-2
Enteropathogenic E. coli • E. coli通常不致病,只作為指標菌 • 1966年開始發現有腸毒性,1971年流行後開始引起注意 • 許多有遊客帶回,故稱為 • Montezuma’s revenge • Traveler’s diarrhea • 許多致病特性或毒素是在plasmid上
Enteropathogenic E. coli 分類 • Enterotoxigenc E.coli (ETEC) • 產生腸毒素,引發腸炎 • Enteroinvasive E.coli (EIEC) • 可破壞腸道壁,進而感染血液、尿道、闌尾appendix、腹膜炎等 • Hemorrhagic E.coli (EHEC) • 感染尿道等,出血性 • Enteropathogenic E.coli (EPEC) • 一般感染型腸胃炎 • http://www.textbookofbacteriology.net/e.coli.html
Enteropathogenic E. coli 血清型 • Classical pathogenic • Non-classical • 多種致病型
Enteropathogenic E. coli • 腸毒素 Enterotoxin • ST heat-stable enterotoxin • 可耐60度30min由18~19種氨基酸組成,有多種異構型 • LT heat-labile enterotoxin與 Aeromonas,Vibrio等腸毒素有相似性(免疫相似性),由1個A subunit與5個B subunit組成,各有功能,也有多種異構型
Enteropathogenic E. coli • Shiga-like toxin • EPEC與EHEC不產生LT與ST,產生類似Shiga-toxin之毒素 • 英國稱為verotoxin • 分成SLT-I與SLT-II兩型,受到鐵的調控 • 同樣是1A5B subunit的結構 • 影響ribosome蛋白質合成
Enteropathogenic E. coli • Hemolysin • 產生cell-free的alpha-hemolysin • 研究最多,產生beta-hemolysis • 通常由O4,O6,O18,O75等型產生 • cell-bound的beta-hemolysin • Adherence • 有fimbriae或pilus等小纖毛結構與細胞吸附能力有關
影響 • 85年日本大爆發O157:H7 • 牛肉回收
Cholera 霍亂 • 霍亂弧菌 • http://www.sicurezzadeglialimenti.it/images/vibriocholerae02.jpg • 霍亂毒素Cholera Toxin • http://www.bmsc.washington.edu/WimHol/grafx%20research%20sum%20part%201/choleratoxIa.jpg
Cholera 霍亂 • 霍亂弧菌 Vibrio cholerae或稱V. comma • 小型1~3 μm X 0.4~0.6μm active motile,G-,no spore • 在15℃以下不長 • 主要流行自東南亞、印度等地 • 霍亂,潛伏期六小時至三天,嚴重下痢如米湯,嘔吐,脫水,眼皮下陷,皮膚鬆懈,身體無熱,死亡 • 疾病管理局資訊http://www.cdc.gov.tw/sp.asp?xdurl=disease/disease_detail.asp&id=1653&mp=1&ctnode=1498
Vibrio cholerae 分型 • Serotype血清型 • O抗原,O1…….O139…等多型 • O1 variants ,Ogawa,Inaba,Hikojima • O1 Biotype (biovars)生物型biovars • Classical, nonhemolytic • El Tor, hemolytic, nonhemolytic
V. cholerae Infections • Cholera霍亂, pandemics • Gastroenteritis, localized • Non-O1:引起腸胃炎,有腸毒素,溶血 素等 • Non-O1 Non-O139 • 1992, Bangladesh
霍亂大流行 • 第一次在1817-1823年,達到歐洲邊境 • 第二次在1826-1837年,分三路穿過俄羅斯到達德國,又從德國帶到英國東北的森德堡。1832年被愛爾蘭僑民傳到加拿大,在同一時候又到達美國 • 第三次流行時間特別長,1846-1863年,1848年到達北美並波及整個北半球 • 第四次1865-1875年的世界性大流行是通過一艘從埃及到英國的航船流傳開來的 http://www.qingdaonews.com/big5/content/2003-05/11/content_1377481.htm
霍亂大流行 • 第五次和第六次分別發生在1883-1896年和1910-1926年。 • 第七次,自1961年起,由埃爾托El Tor生物型霍亂弧菌引起的霍亂,開始從印度尼西亞的蘇拉威西島向毗鄰國家和地區蔓延,迄今已波及五大洲140個以上的國家和地區,報告患者350萬以上 • 1992年10月,由非 O1群的一個血清型——— O139霍亂弧菌引起的新型霍亂,席卷印度和孟加拉國的某些地區,至1993年4月已報告十萬餘病人,現已波及許多國家和地區,有人將其稱為霍亂的第8次世界性大流行。 http://www.qingdaonews.com/big5/content/2003-05/11/content_1377481.htm
Cholera 霍亂Pandemics • Pandemic 1-6, Classical O1 • Pandemic 7, El Tor O1 • Pandemic 8(?), O139 (since 1992) 1961-1972 Cholera Pandemic
國內霍亂 • 國內霍亂自民國以後共發生4次大流行,分別是在民國1年、8至9年、35年及51年。前3次患者人數共10,648人,死亡6,834人(死亡率約64%),由於醫療進步,民國51年發生流行的383名患者中,死亡人數為24人(死亡率約6%)。 • 隨著生活條件的改善,自來水供應及下水道公共設施的普及,再加上公共衛生的改善等,近年國內霍亂病例數多僅為零星、散發個案,例如於民國89年有8例、90年為0例、91年有2例(皆由印尼境外移入)、92年有1例(泰國境外移入)、93年有1例(菲律賓境外移入),且皆無死亡病例。 http://www.sangha-care.org.tw/book37/look.html
台灣O139霍亂 • 50年代初 • 1992年O139霍亂菌緣起孟加拉 • 民國86年8月底
霍亂菌來自何方? • Pulsed-field gel electrophoresis
請思考 • 為何台灣民國50年代後沒有發生霍亂大流行? • 如何發現新的腸道致病菌? • 有哪些毒素具有1A5B的subunits結構?