Kumulativni uspjeh IVF-a je značajan doprinos

1. Kumulativni uspjeh IVF-a je značajan doprinos Patrik Stanić Zavod za humanu reprodukciju Klinike za ženske bolesti i porode Kliničkog bolničkog centra Zagreb

2. Priprema hranilišta i otopina Izdvajanje i koncentriranje spermija Stimulacija jajnika Aspiracija folikula Izdvajanje oocita IVF/ICSI Prikupljanje ejakulata Kriopohrana Sekundarni ICSI Kultivacija 18-20 h Kriopohrana Potvrda oplodnje (2PRN) Promjena hranilišta Transfer odmrznutih embrija (FET) Kriopohrana Kultivacija 24 h Broj i morfologija zametaka Kultivacija gameta i zametaka Transfer embrija 2/3 dan Kultivacija 24 h Promjena hranilišta Kultivacija 24-48 h Transfer morula/blastocista

3. ŽIVOROĐENA DJECA –najrelevantniji indeks uspjeha • KRYO OOCITA • sekundarni ICSI + ET • IVF/ICSI • svježi ET: SET, DET, SBT • KRYO EMBRIJA • FET Kumulativno povećanje stupnja trudnoća/poroda po aspiriranim oocitama (sve trudnoće/porodi iz jedne aspiracije oocita)

4. Indikacijezazamrzavanjehumanih embrija • smanjenje višeplodnih trudnoća • MPR SET: ~ 1% • MPR DET: 30 – 50% • smanjenje broja transferiranih embrija • zakonske odredbe o zabrani ET više embrija • medicinski razlozi za odgodu ET: • OHSS • endometralni polip • ? kvaliteta endometrija

5. Indikacijezazamrzavanjehumanih oocita • kemoterapija ili radijacijska terapija • kirurške operacije na spolnom sustavu • donorska banka oocita • zakonske odredbe o ograničenju broja oplođenih oocita

6. Zamrzavanjaiodmrzavanja u MPO • početna kvaliteta gameta i zametaka • dehidracija i rehidracija • toplinski šok • unutarstanično stvaranje kristala leda • sastav medija za zamrzavanje • postupak zamrzavanja i odmrzavanja

7. Odabir kompetentnih MII oocita Utjecaj na fiziologiju i starenje oocite Oštećenja citoplazme i citoskeleta Propusnost membrane Stvrdnuće zone pellucide Depolimerizacija diobenog vretena Degeneracija polarnog tjelešca

8. Odabir kvalitetnih embrija • Dan 1 • PN score • rana dioba • Dan 2/3 • broj blastomera • fragmentacija • veličina stanica • broj jezgri • Dan 5/6 • ICM • trofoektoderm

9. Postupcizamrzavanja • Kontrolirano sporo zamrzavanje (Whittingham et al., 1972) • Vitrifikacija - ultra brzo zamrzavanje (Rall & Fahy, 1985)

10. Sporo zamrzavanje vs vitrifikacija • sporo zamrzavanje • 50-76% stupanj preživljenja • 13-38% stupanj trudnoća/ET (Porcu 2000, Boldt 2006, Borini 2007) • 91% stupanj preživljenja (La et al., 2010) • vitrifikacija • 63-100% stupanj preživljenja • 6,4-61% stupanj implantacije (Cobo, 2009)

11. Sporo zamrzavanje vs vitrifikacija • mnoge studije su retrospektivne, ne komparativne • podaci o trudnoćama nedostatni za analize • preživljenje embrija/blastocista favorizira vitrifikaciju • razvoj do stadija blastociste iz zamrznutih embrija u stadiju diobe favorizira vitrifikaciju • nema statistički značajne razlike u stupnju kliničkih trudnoća/ET

12. Elektivni SET vs DET -randomizirane studije Gelbaya. IVF outcomes after e-SET or DET. Fertil Steril 2010

13. Elektivni SET vs DET -meta-analiza randomiziranih studija (Medline, Embase, CochraneCentral Register of Controlled Trials) *uključene samo dvije studije McLernon et al., 2010, BMJ

14. Kumulativno SET vs DET -živorođena djeca CLBR = cumulative live birth rate; CMBR = cumulative multiple births rate; DET = double-embryo transfer; SET = single-embryo transfer Gelbaya. Fertil Steril 2010

15. Kumulativni utjecaj FET-a – živorođena djeca iz SET-a i DET-a (689 parova) Lundin i Bergh, 2007.

16. DET vs SETCochrane Database Syst Rev • Živorođene djece više iz svježeg DET-au odnosu na SET (OR 2.10,95% CI 1.65 do 2.66, p<0.00001) • Višeplodnih trudnoća manje nakon SET-au odnosu na DET (OR 0.04, 95%CI 0.01 do 0.11; p <0.00001) • Kumulativno stupanj živorođene djece nema razlike nakon1DET-a i 1SET+1FET (OR 0.81, 95%CI 0.59 do 1.11; p=0.28) • Kumulativno stupanj živorođene djece nema razlike nakon 1DET-a i 2SET-au svježem ciklusu (OR1.23, 95% CI 0.56 do 2.69, p= 0.60 ) Pandian et al., Cochrane Database Syst Rev. 2009

17. SET vs SBT *P<0,01

18. Kumulativno porodi – prospektivnane-randomizirana studija SET vs SBT(478 parova) Guerif et al., 2009, Hum Rep *veći broj transfera/paru (x1,25)

19. Kumulativno trudnoće – randomizirana prospektivna studija SET vs SBT(404 para, žene < 36 god., >5 oocita, >3 top embrija na dan 2) Brugnon et al., 2010, ESHRE

20. Kumulativni rezultati – trudnoće prije i nakon uvođenja ograničenja oplodnje Borini et al., 2008.

21. Kumulativni rezultati – trudnoće nakon svježeg ciklusa te vitrifikacije oocita u neplodnih pacijentica Ubaldi et al., 2010, Hum Reprod

22. ART u Europi – 2006: ESHRE (Hum Reprod, 2010) • Kumulativno porodi po započetom stimuliranom ciklusu • Porodi iz FET-a dodani porodima iz stimuliranih ciklusa u jednoj godini

23. Kumulativni rezultati – trudnoće po stimuliranom ciklusu u neplodnih pacijentica sa vitrificiranim oocitama i embrijima • Cilj studije – odrediti kumulativno stupanj trudnoća u neplodnih pacijentica u uvjetima ograničenog broja oplođenih oocita (do 3) po ciklusu. • U studiju je uključeno 126 stimuliranih ciklusa (KBC Zagreb: svibanj 2010 - listopad 2011) : • 109 ciklusa sa zamrznutim oocitama • 17ciklusa sa zamrznutim embrijima u slučaju odgode ET • (7 pacijentica sa zamrznutim embrijima ima i zamrznute oocite) • MII oocite i embriji vitrificirani prema Cryotop protokolu. • Ako trudnoća nije ostvarena u stimuliranom ciklusu: • Sekundarni ICSI • FET

24. Kumulativni rezultati – trudnoće po stimuliranom ciklusu u neplodnih pacijentica sa vitrificiranim oocitama i embrijima