slide1
Download
Skip this Video
Download Presentation
Emmanuel BOUVIER

Loading in 2 Seconds...

play fullscreen
1 / 51

Conception, synth se et valuations biologiques de prodrogues du paclitaxel et du docetaxel activ es par voie enzymati - PowerPoint PPT Presentation


  • 143 Views
  • Uploaded on

Conception, synthèse et évaluations biologiques de prodrogues du paclitaxel et du docetaxel activées par voie enzymatique dans le cadre des stratégies ADEPT et PMT. Emmanuel BOUVIER. Conception, synthèse et vectorisation de biomolécules UMR 176 Paris CNRS-Institut Curie. Plan de l’exposé.

loader
I am the owner, or an agent authorized to act on behalf of the owner, of the copyrighted work described.
capcha
Download Presentation

PowerPoint Slideshow about 'Conception, synth se et valuations biologiques de prodrogues du paclitaxel et du docetaxel activ es par voie enzymati' - lourdes


An Image/Link below is provided (as is) to download presentation

Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author.While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server.


- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - E N D - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -
Presentation Transcript
slide1

Conception, synthèse et évaluations biologiques de prodrogues du paclitaxel et du docetaxel activées par voie enzymatiquedans le cadre des stratégies ADEPT et PMT

Emmanuel BOUVIER

Conception, synthèse et vectorisation de biomolécules

UMR 176 Paris CNRS-Institut Curie

plan de l expos
Plan de l’exposé
  • Généralités
  • Synthèse et évaluations biologiques de prodrogues
  • Conclusion
slide3

I Généralités

Paclitaxel et Docetaxel

ADEPT et PMT

slide4

Paclitaxel

Paclitaxel

Découverte dans les années 60, suite au criblage

de l’activité anticancéreuse de substances d’origine végétale

Activité cytotoxique

sur différentes

lignées cellulaires

mode d action
Mode d’action

le paclitaxel promeut la formation des microtubules et les stabilise

perturbation du fuseau mitotique lors de la mitose

mort cellulaire

le paclitaxel en clinique
Le paclitaxel en clinique

3 AMM: 1993 cancer des ovaires

1996 cancer du sein

1998 cancer du poumon non à petites cellules

mais mauvaise sélectivité et

problème de solubilité (injecté avec un détergent)

effets secondaires graves dûs

au principe actif et à la formulation

besoins de dérivés présentant de meilleures

propriétés pour élargir son utilisation clinique

relations structure activit
Relations structure-activité
  • Fragilité du squelette taxane
  • aux bases: saponification, rétro-aldol en 7,9
  • aux acides: ouverture de l’oxétane, réarrangement de carbocations
docetaxel
Docetaxel

Docetaxel

Découverte fortuite, intermédiaire de synthèse

Activité supérieure au paclitaxel sur certaines lignées cellulaires

AMM cancers du sein et du poumon NPC

Solubilité aqueuse double de celle du paclitaxel

--> injecté avec un détergent également

besoins de dérivés présentant de meilleures

propriétés pour élargir son utilisation clinique

slide9

I Généralités

Paclitaxel et Docetaxel

ADEPT et PMT

objectif des strat gies
Objectif des stratégies
  • But: amélioration de la sélectivité des antitumoraux

amélioration de leurs propriétés pharmacologiques

  • Comment: modification de la distribution de la ‘‘drogue’’ par concentration au niveau du tissu tumoral
  • Moyen: emploi d’une prodrogue conçue spécifiquement
slide12
PMT

De la b-glucuronidase est présente dans le milieu

intercellulaire des zones nécrotiques de certains cancers

vectorisation de l’enzyme pas nécessaire

prodrogue tripartite
Prodrogue tripartite
  • Prérequis:
  • Prodrogue: détoxification facteur 100

stable dans le plasma

hydrophile

bon substrat de l’enzyme

libération efficace de la drogue

  • ‘‘Drogue’’: très cytotoxique

hydrophobe pour internalisation rapide

durée de vie courte

plan de l expos14
Plan de l’exposé
  • Généralités
  • Synthèse et évaluations biologiques de prodrogues
  • Conclusion
slide15

II Synthèse et évaluations biologiques

de prodrogues

Introduction

Prodrogue du paclitaxel

Prodrogues du docetaxel

Prodrogue en 7 du paclitaxel

travaux ant rieurs
Travaux antérieurs

Prodrogue à espaceur

ortho aminophénol cyclisant

Mauvaise hydrolyse enzymatique (T1/2 = 115 mn, 190 U/mL)

Modélisation moléculaire: environnement acide glucuronique encombré

Faciliter l’approche entre enzyme et substrat

  • modification de l’espaceur
  • changer le site d’accrochage

Alternative:

choix de l espaceur
Choix de l’espaceur

efficace avec une

moutarde à l’azote

slide19

II Synthèse et évaluations biologiques

de prodrogues

Introduction

Prodrogue du paclitaxel

Prodrogues du docetaxel

Prodrogue en 7 du paclitaxel

slide21

Synthèse de 221 (1)

Couplage glycosidique

slide22

Synthèse de 221 (2)

Changement des groupements protecteurs de lapartie sucre

slide23

Synthèse de 221 (3)

Ajout dela chaîne diamine,couplage avec le paclitaxel et déprotections

hydrog nolyse et r duction

Benzyle

Nitro

Hydrogénolyse et réduction

Modélisation moléculaire

(HyperChem, champ MM+)

Nitro

Benzyle

Benzyle

Nitro

slide25

Etudes in vitro 221 (1)

  • Stabilité dans un tampon phosphate (pH 7.2):
  • pas d’évolution visible après 24h
  • pas de libération prématurée du paclitaxel
  • Cytotoxicité: IC50 sur lignée L1210
    • Paclitaxel: 9.8 nM
    • Prodrogue: 1200 nM
  • détoxification par un facteur 120
slide26

Etudes in vitro 221 (2)

Hydrolyse

enzymatique:

T1/2 = 10 min

(disparition prodrogue)

HPLC: colonne C18

Tampon phosphate

(0.02M pH 7)

Prodrogue: 0.25 g/mL

-glucuronidase (E. coli):

50 g/mL (12 U/mL)

slide28

II Synthèse et évaluations biologiques

de prodrogues

Introduction

Prodrogue du paclitaxel

Prodrogues du docetaxel

Prodrogue en 7 du paclitaxel

hydrog nolyse et r duction32
Hydrogénolyse et réduction

Modélisation moléculaire

(HyperChem, champ MM+)

Benzyle

Nitro

Benzyle

Nitro

slide35

Etudes in vitro

des prodrogues 225 et 226 (1)

  • Stabilité dans un tampon phosphate (pH 7.2):
  • pas d’évolution visible après 24h
  • pas de libération prématurée du docetaxel
  • Cytotoxicité: IC50 sur lignée L1210
    • Docetaxel: 14.4 nM
    • Prodrogue 225: 4860 nM --> détoxification par 340
    • Prodrogue 226: 2690 nM --> détoxification par 190
slide36

Etudes in vitro

prodrogue nitrée 225 (2)

Hydrolyse

enzymatique:

T1/2 = 8 min

(disparition prodrogue)

Pas d’intermédiaire chaîne diamine-docetaxel détecté

slide37

Etudes in vitro

prodrogue aminée 226 (2)

Hydrolyse

enzymatique:

T1/2 = 9 min

(disparition prodrogue)

Pas d’intermédiaire chaîne diamine-docetaxel détecté

slide38

Comparaison de la disparition

des 3 prodrogues

  • évolution générales similaires
  • faible influence de la drogue
  • identité NO2/NH2 hydrolyse enzymatique
comparaison
Comparaison
  • Meilleure hydrolyse enzymatique espaceur double / espaceur simple
  • Bonne efficacité de l’espaceur double nitré ou aminé avec le docetaxel
  • Divergence paclitaxel/docetaxel:
      • hydrogénolyse du benzyle
      • détection d’un intermédiaire lors de l’hydrolyse enzymatique
slide40

II Synthèse et évaluations biologiques

de prodrogues

Introduction

Prodrogue du paclitaxel

Prodrogues du docetaxel

Prodrogue en 7 du paclitaxel

prodrogue en 7 du paclitaxel
Prodrogue en 7 du paclitaxel

Prodrogue à espaceur

ortho aminophénol cyclisant

Mauvaise hydrolyse enzymatique (T1/2 = 115 mn, 190U/mL)

Modélisation moléculaire: environnement acide glucuronique encombré

Faciliter l’approche entre enzyme et substrat

  • modification de l’espaceur
  • changer le site d’accrochage

Alternative:

protection du paclitaxel
Protection du paclitaxel

Choix d’un éther de silyle:

  • Facilité d’introduction
  • Déprotection concomitante aux silyles de l’espaceur
synth se du bras espaceur de 236
Synthèse du bras espaceur de 236

Préparation de l’aromatique et couplage glycosidique

slide45

Synthèse de 236 (1)

Changement des groupements protecteurs, couplage

Pas de couplage avec le TBS

slide46

Synthèse de 236 (2)

premier carbamate

N,N-disubstitué

décrit en position 7

Problèmes: purification

quantité

pas d’évaluations biologiques

slide47

Plan de l’exposé

  • Généralités
  • Synthèse et évaluations biologiques de prodrogues
  • Conclusion
slide48

CONCLUSION (1)

Espaceur double élimination 1,6-chaîne diamine:

  • synthèse longue

groupements protecteurs

adéquats:

  • obtention

de prodrogues

du paclitaxel

et du docetaxel:

bonnes hydrolyses enzymatiques validant l’approche

Org. Biomol. Chem. 2003, 1(19), p. 3343

Bioorg. Med. Chem. 2004, 12(5), p. 969

slide49

CONCLUSION (2)

Espaceur double élimination 1,6-chaîne diamine:

Espaceur cyclisant en position 7 du paclitaxel:

  • synthèse de l’espaceur ad hoc:
  • obtention de la prodrogue cible:

faisabilité de la synthèse mais problèmes à surmonter

Ann. Pharm. Françaises 2005, 63, p. 53

remerciements
REMERCIEMENTS

ARC (bourse 2 ans)

Institut Curie

CNRS

Laboratoire de Pharmacochimie

UMR 176 CNRS-IC

slide51

Développement de « caged compounds » présentant de meilleures propriétés photochimiques et physico-chimiques

Emmanuel BOUVIER

Laboratoire de Physiology et Pharmacology

Drexel University College of Medicine

Philadelphia, PA USA

ad