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SUIVI MOLECULAIRE DE LA LMC

SUIVI MOLECULAIRE DE LA LMC. Dr. Samia MENIF Laboratoire d’Hématologie Moléculaire et Cellulaire Institut Pasteur de Tunis. Introduction. t(9;22)(q34;q11) => bcr-abl Marqueur du clone tumoral Cible utile pour le suivi de la maladie résiduelle. PRINCIPE DE LA PCR. Gamme d’étalonnage.

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Presentation Transcript

  1. SUIVI MOLECULAIRE DE LA LMC Dr. Samia MENIF Laboratoire d’Hématologie Moléculaire et Cellulaire Institut Pasteur de Tunis

  2. Introduction • t(9;22)(q34;q11) => bcr-abl • Marqueur du clone tumoral • Cible utile pour le suivi de la maladie résiduelle

  3. PRINCIPE DE LA PCR

  4. Gamme d’étalonnage

  5. Courbe standard

  6. Gène de référence: abl • L’expression des résultats se fait par rapport à un gène de référence Ratio: bcr-abl / abl • Expression constante et ubiquitaire • Compense les variations de qualité de l’ARN • Permet de comparer les résultats les uns aux autres

  7. Exemple: Malade 1 Malade 2 Ratio Bcr-abl / abl : 0.001

  8. Patients • 110 patients colligés, • 66 patients évaluables avec un suivi au-delà de 12 mois de traitement, • Age médian 41 ans (7 - 61), • Suivi médian après le diagnostic: 47 mois (14 -108), • Durée moyenne du traitement: 33 mois (12-56),

  9. Délais administration Imatinib

  10. Méthodes • Recommandations de l’EAC (Europe Against Cancer Program) • 10 ml de sang périphérique • Extraction de l’ARN total • Retro-transcription (1µg d’ARN) • RQ-PCR (ABI 7700) abl: gène de référence

  11. Expression des résultats • Ratio bcr-abl/abl • Ratio 1: 1 • Ratio 2: 0.1 => réduction de 1 Log • Ratio 3: 0.01 => réduction de 2 Log • Ratio 4: 0.001 => réduction de 3 Log • RMM R < 0.001

  12. Résultats • Ratio médian au diagnostic: 1.1 (0.15 – 19), • Ratio médian au cours du suivi: 0.009 (0.0001 – 7) • RMM (réduction de 3 Log par rapport à la ligne de base ) => R < 0.001 • 28/66 patients (42%) ont achevé la RMM • 38/66 patients (58%) n’ont pas achevé la RMM

  13. RMM: R < 0.001 36% 31% 91%

  14. Résultats (2) • 38 / 66 n’ont pas achevé la RMM • 21 / 38 charge tumorale en plateau 0.01 < R < 0.001 • 13 / 38 résistance primaire • 4 résistances hématologiques • 7 résistances cytogénétiques • 4 / 38 résistance secondaire • 3 rechutes moléculaires (RCC persistante) • 1 rechute cytogénétique à 24 mois

  15. Résistance

  16. Recommandations • RT-PCR au diagnostic • Identification du variant bcr-abl • Quantification de la charge tumorale au Dgc • Caryotype tous les 6 mois jusqu’à RCC • RQ-PCR tous les 6 mois à partir de la RCC

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