RETT FENOTÍPUST MUTATÓ BETEGEK MOLEKULÁRIS GENETIKAI VIZSGÁLATA

1. RETT FENOTÍPUST MUTATÓ BETEGEK MOLEKULÁRIS GENETIKAI VIZSGÁLATA Hadzsiev Kinga, Polgár Noémi, Melegh Béla Pécsi Tudományegyetem Orvosi Genetikai Intézet k

2. Történeti áttekintés • 1954 • Rett, A. Über ein eigenartiges hirnatrophisches Syndrom bei Hyperammoniamie in Kindesalter. Wien. Med. Wschr. 116: 723-738, 1966 • Rett, A. Cerebral atrophy associated with hyperammonaemia. In: Vinken, P. J., Bruyn, G. W. Handbook of Clinical Neurology. Amsterdam: North Holland (pub.) 29: 305-329, 1977 • Hagberg, B., Aicardi, J., Dias, K., Ramos, O. A progressive syndrome of autism, dementia, ataxia, and loss of purposeful hand use in girls: Rett's syndrome: report of 35 cases. Ann. Neurol. 14: 471-479, 1983 • Amir, R. E., Van den Veyver, I. B., Wan, M., Tran, C. Q., Francke, U., Zoghbi, H. Y. Rett syndrome is caused by mutations in X-linked MECP2, encoding methyl-CpG-binding protein 2. Nature Genet. 23: 185-188, 1999

3. Andreas Rett (1924-1997)

4. Szükséges tünetek • Látszólag normális fejlődés 6. - 18. hónapközött • Születéskor normális fejkörfogat, majd csökkenő növekedési ütem • Beszéd és a kéz céltudatos használata elveszik • Sztereotip kézmozgások • Törzs remegése, amely kiterjedhet a végtagokra is • Bizonytalan, széles alapú, merev lábú/lábujjon járás

5. Támogató kritériumok • Légzési működészavarok, amelyek magukban foglalják a lélegzet elakadását, vagy apnoét, a hyperventilatiot, és levegőnyelést, amely hasi puffadást eredményezhet • EEG-eltérések – a normális elektromos minták lassulása, epileptiform minták megjelenése, továbbá a normális alvási jellemzők elvesztése • Görcsök • Izommerevség/spaszticitás/ízületi kontraktúrák kialakulása és fokozódása az életkor előrehaladtával • Scoliosis

6. Támogató kritériumok • Fogcsikorgatás (bruxizmus) • Kis láb (a testalkathoz képest) • Növekedésbeli visszamaradás • Csökkent testzsír- és izomtömeg (egyes felnőttekben azonban elhízásra való hajlam) • Abnormális alvásminták, nyugtalanság, ingerlékenység • Rágási és/vagy nyelési nehézségek • Az alsó végtagok rossz vérkeringése, hideg és kékes-vörös lábak • Az életkor előrehaladtával csökken az önálló hely-és helyzetváltoztatás szintje • Gyakori székrekedés

7. Rett-szindróma klinikai lefolyásának szakaszai I.stádium (preregresszió - néhány hónap) • Korai kezdet: 6. hónaptól 1 évig • Enyhe, nem specifikus tünetek: kevesebb szemkontaktus, csökken játékai iránt az érdeklődés • „jó, csendes gyermek”, • a mozgásfejlődés elmaradása (fordulás, kúszás, mászás stb.) • izomhypotonia

8. Rett-szindróma klinikai lefolyásának szakaszai II. stádium (regresszió, hetek- hónapok): 1-4 év • rohamos/fokozatos kezdet, gyors leromláscéltudatos kézhasználat és beszéd elvész, sztereotip kézmozgások (éber állapotban) • légzési szabálytalanságok • autisztikus jelek • nyugtalanság, ingerlékenység, alvászavarok testtartási instabilitás • a fej növekedési ütemének lassulása (3-48 hó)

9. Rett-szindróma klinikai lefolyásának szakaszai III. Stádium(posztregresszió, évek): 4-10 év • apraxia, a motoros problémák, görcsök • enyhül az ingerlékenység/nyugtalanság, kevesebb autisztikus vonás • éberség, figyelmi kör és kommunikációs készség javulnak

10. Rett-szindróma klinikai lefolyásának szakaszai • IV. A stádium (korábban járóképes volt)IV. B stádium (sohasem volt járóképes)Késői motoros hanyatlásÉletkor: a III. stádium elmúlását követőenIdőtartam: évtizedekre terjedhetEz a stádium általában a 10. életéve után kezdődhet, és a csökkent mobilitás jellemzi. A lányok egy része abbahagyja a járást, míg mások soha sem tudtak járni. Nincs hanyatlás a gondolkodásban, a kommunikációban vagy a kézügyességben. Az ismétlődő kézmozgások csökkenhetnek. A scoliosis a legjellemzőbb és a leginkább meghatározó tünet. A tekintettel mutatás általában javul. Az izomzatra jellemző a rigiditás (merevség) és a dystonia (fokozott izomtónus abnormális végtag- vagy törzshelyzetekkel). A pubertás a várható életkorban kezdődik a legtöbb lánynál

11. MECP2 • Xq28 • 4 exon • Protein: 486-498 aminosav ~ 53 kD • Gén reguláció (DNS metiláció és hiszton deacetiláció) • KIR expresszálódik • RettBASE • T158M MBD mutációk súlyosabb vs missense enyhébb

12. MECP2 MUTÁCIÓK

13. Atípusos Rett szindróma • Megőrzött beszéd forma(Zapella variant): beszéd lassú visszaépülése, normál fejkörfogat, autisztikus viselkedés, 3 stádium, átmenetileg kéz sztereotípia • Korai görcs forma (Hanefeld szindróma): igen korai csecsemőkorban (3-6 hét) megjelenő, később gyakran terápia rezisztens epilepszia • „Csonka forma”: enyhébb fenotípus, későbbi gyermekkorban fellépő regresszió • Kongenitális forma: megszületéstől fennálló progresszív enkefalopátia

14. „Korai görcs” forma • Hanefeld 1985 • Korai infantilis spasmus, hypsarrythmia és súlyos fejlődésbeni elmaradás • MECP2- egy betegben sem • CDKL5 mutációk

15. Tünetek • Első tünetek < 3 hó • epilepszia • izomhypotonia • látásfejlődés elmaradás • Súlyos fejlődésbeli késés • ritkán regresszió • Kéz sztereotípiák, apraxia • Autisztikus viselkedésjegyek

16. Tünetek-CDKL

17. Észlelt MR eltérések Betegek ~ 20% nincs MR eltérés Bahi-Buisson, N. et al. Brain 2008 131:2647-2661;

18. Xp22.3-p21.3, 21 exon Protein: 1030 aminosav, ~116kDa Kb. 25 ismert mutáció Agy, thymus, testis MeCP2 interakció CDKL5

19. CDKL5 MUTÁCIÓK

20. Atípusos Rett szindróma • Megőrzött beszéd forma (Zapella variant): beszéd lassú visszaépülése, normál fejkörfogat, autisztikus viselkedés, 3 stádium, átmenetileg kéz sztereotípia • Korai görcs forma (Hanefeld szindróma): igen korai csecsemőkorban (3-6 hét) megjelenő, később gyakran terápia rezisztens epilepszia • „Csonka forma”: enyhébb fenotípus, későbbi gyermekkorban fellépő regresszió • Kongenitális forma: megszületéstől fennálló progresszív enkefalopátia

21. FOXG1 • 14q13 • Protein: 476 AS • Transzkripciós faktor (represszor) • KIR • Kong. Rett szindr.

22. FOXG1 MUTÁCIÓK

23. MÓDSZEREK • 199 érintett és 73 hozzátartozó perifériás vérből izolált DNS mintái • Az érintett gének molekuláris analízise során: • DNS izolálás perifériás vérből • polimeráz láncreakció • bidirekcionális DNS szekvenálás • MLPA

24. ANYAG ÉS MÓDSZER • 199 Rett szindróma jeleit mutató beteg • MECP2 tesztelés – 52 megerősítő diagnózis • CDKL5 tesztelés – 2 megerősítő diagnózis • FOXG1 tesztelés • MLPA vizsgálat – 2 megerősítő diagnózis

25. Rett fenotípus 11 beteg egyéb diagnózis