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TEMA 1:VARIACIONES EN LAS MEDIDAS DEL LABORATORIO PROF.ADJ.DRA. CRISTINA MIER

TEMA 1:VARIACIONES EN LAS MEDIDAS DEL LABORATORIO PROF.ADJ.DRA. CRISTINA MIER LICENCIATURA DE LABORATORIO CLÍNICO EUTM mcmier@yahoo.es. IMPORTANCIA DEL TEMA.

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TEMA 1:VARIACIONES EN LAS MEDIDAS DEL LABORATORIO PROF.ADJ.DRA. CRISTINA MIER

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  1. TEMA 1:VARIACIONES EN LAS MEDIDAS DEL LABORATORIO PROF.ADJ.DRA. CRISTINA MIER LICENCIATURA DE LABORATORIO CLÍNICO EUTM mcmier@yahoo.es EUTM,JULIO,2006

  2. IMPORTANCIA DEL TEMA • El nivel de calidad de la fase preanalítica condiciona el nivel de calidad de las fases siguientes. la obtención correcta de la muestra es la primera condición de un resultado correcto EUTM,JULIO,2006

  3. Def preanalitica :ISO 15.189 3.10 Todos los pasos a seguir en orden cronológico, partiendo desde la solicitud del clínico, incluyendo solicitud, preparación del paciente obtención de la muestra primaria, transporte hacia y dentro del laboratorio y finaliza cuando el procedimiento analítico comienza . EUTM,JULIO,2006

  4. ETAPA PREANALÍTICA atención al usuario solicitud del examen, preparación del paciente, toma de muestra, transporte almacenamiento separación y centrifugación EUTM,JULIO,2006

  5. Secuencia recomendada en el uso de tubos • Tubo de separación de suero • Tubo de coagulación • Tubos con anticoagulantes: • citrato de sodio • EDTA • Heparina • Facilitar el reconocimiento de los tubos/tapones EUTM,JULIO,2006

  6. % DE ERROR Preanalítico Analítico Postanalítico 46% 7% 47% (Rose,Boone) 68,2% 13,3% 18,5% (Plebani) EUTM,JULIO,2006

  7. RECHAZO DE MUESTRA • Datos incompletos o ilegibles • Discordancia entre datos solicitud y muestra • Proporción inadecuada de sangre-anticoagulante • Muestra incorrecta. Uso de anticoagulante incorrecto • Transporte inapropiado • Presencia de interferentes como hemólisis, turbidez • Cantidad insuficiente de muestra • Tiempo de recolección incorrecto MUESTRA NO VÁLIDA EUTM,JULIO,2006

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  11. 5.4.6 Control de traslado de muestras • tiempo apropiado • temperatura especificada • seguridad del transportador, público en general y laboratorio que la recibe • cumpliendo con los requisitos regulatorios nacionales, regionales, o locales. EUTM,JULIO,2006

  12. 5.4.14 • Almacenaje por tiempo especificado • Condiciones que aseguren estabilidad de las propiedades para repeticiones o análisis adicionales SISTEMAS BIOLÓGICOS SON INESTABLES ADSORCIÓN,DESNATURALIZACIÓN,EVAPORACIÓN, CONGELACIÓN LENTA,ALÍCUOTAS, EUTM,JULIO,2006

  13. ISO 15189 :2003 3.3 análisis conjunto de operaciones que tienen el objeto de determinar el valor o características de una propiedad. NOTA En algunas disciplinas (ejemplo: microbiología) un análisis es la actividad total de un conjunto de ensayos/pruebas, observaciones o mediciones. EUTM,JULIO,2006

  14. MÉTODOS ANALÍTICOS (DE MEDICIÓN) MÉTODO ANALÍTICO: CONJUNTO DE PROCEDIMIENTOS (CONJUNTO DE INSTRUCCIONES ESCRITAS) Y TÉCNICAS PARA REALIZAR UNA ACTIVIDAD ORDENADO EN FORMA SISTEMÁTICA. FORMAN PARTE DEL PROCESO ANALÍTICO INEVITABLEMENTE EL INSTRUMENTO EMPLEADO ESTÁ INVOLUCRADO EN EL MÉTODO EUTM,JULIO,2006

  15. VARIACIÓN ANALÍTICA INCERTIDUMBRE ( DE LA MEDICIÓN): ES EL PARÁMETRO ASOCIADO A UN RESULTADO QUE CARACTERIZA LA DISPERSIÓN DE VALORES QUE PODRÍA TENER ESA MEDICIÓN ENGLOBA TODAS LAS POSIBLES FUENTES DE VARIACIÓN ESTIMADORES: s C.V. INTERVALO DE CONFIANZA I.C. EUTM,JULIO,2006

  16. ERROR ANALÍTICO O ERROR DE LA MEDICIÓN: TIPOS DE ERROR: • ERROR SISTEMÁTICO ES CONSTANTE O VARÍA EN FORMA PREDECIBLE EQUIPO,REACTIVOS,METÓDICA, CALIBRACIÓN SE CONOCE SU EXISTENCIA • ERROR ALEATORIO SE PRODUCE AL AZAR REACTIVOS ,EQUIPO, PIPETEO,TRANSCRIPCIÓN ES VARIABLE ERROR SISTEMÁTICO + ERROR ALEATORIO • ERROR TOTAL EUTM,JULIO,2006

  17. Tiempo entre toma de muestra y procesamiento Sangre con EDTA Hasta 48 horas aTºA Hasta 7 días a 4ºC Sangre con heparina Hasta 24 horaTºA Sangre sin anticoagulante Hasta 24 horas a TºA Suero Hasta 48 horas a 4ºC. Meses a -20ºC o -70ºC Tº Ambiente 18-22 ºC EUTM,JULIO,2006

  18. CARACTERÍSTICAS DE DESEMPEÑO ANALÍTICO PRECISIÓN :GRADO DE CONCORDANCIA ENTRE RESULTADOS INDEPENDIENTESDE LA MISMA MUESTRA REPETIBILIDAD:CUANDO SE MANTIENEN LAS CONDICIONES ANALÍTICAS REPRODUCTIBILIDAD : CUANDO ALGUNAS DE ELLAS VARÍAN(PRECISIÓN INTERMEDIA) ESPECIFICIDAD ANALÍTICA:CAPACIDAD DE PRODUCIR UNA SEÑAL EXCLUSIVAMENTE CON UN ANALITO ENPRESENCIA DE OTROS COMPONENTES (MATRIZ) SENSIBILIDAD ANALÍTICA:CAPACIDAD DE PRODUCIR UNA SEÑAL DISTINTA FRENTE A CANTIDADES DISTINTAS DEL ANALITO LINEALIDAD:CAPACIDAD DE PRODUCIR SEÑALES CUYA INTENSIDAD VARÍE PROPORCIONALMENTE CON LA CANTIDAD DEL ANALITO EUTM,JULIO,2006

  19. LÍMITES DE DETECCIÓN Y CUANTIFICACIÓN EXACTITUD:GRADO DE CONCORDANCIA ENTRE UN RESULTADO Y EL VALOR VERDADERO: VALOR CONSISTENTE CON LA DEFINICIÓN DE UNA CANTIDAD PARTICULAR DADA. VERACIDAD: GRADO DE CONCORDANCIA ENTRE EL PROMEDIO DE UNA SERIE DE RESULTADOS DE LA MISMA MUESTRA Y EL VALOR VERDADERO VALIDACIÓN EUTM,JULIO,2006

  20. NECESIDAD DE CALIBRACIÓN: CONJUNTO DE OPERACIONES QUE ESTABLECEN LA RELACIÓN ENTRE LA RESPUESTA DEL SISTEMA Y LA CANTIDAD DEL ANALITO UTILIZA UN MATERIAL DE REFERENCIA (CALIBRADOR) EUTM,JULIO,2006

  21. BALANZA:DETERMINACIÓN DE MASA –PESADA EQUILIBRAR UNA MASA DESCONOCIDA CON OTRA CONOCIDA CAPACIDAD -SENSIBILIDAD –PRECISIÓN PESO = MASA . GRAVEDAD USO,EN LA PREPARACIÓN DE: MATERIALES DE REFERENCIA(ESTÁNDARES) REACTIVOS SOLUCIONES (1º PASO) CALIBRACIÓN DE EQUIPAMIENTO VOLUMÉTRICO EUTM,JULIO,2006

  22. INSTRUMENTOS MAS PRECISOS DEL LABORATORIO UBICACIÓN EN LUGARES LIBRES DE VIBRACIONES Y PROTEGIDOS DE LA LUZ SOLAR PESAS CALIBRADAS:ESPECIFICACIONES DEL N B S EUTM,JULIO,2006

  23. 1-COMPROBAR EL NIVEL2-VERIFICARLA SITUACIÓN DE MOVIMIENTO3-FIJAR EL PUNTO 0 (TARAR),VENTANAS LATERALES CERRADAS.4-ABRIR, COLOCAR LA MUESTRA (NO DIRECTAMENTE),CERRAR5-EQUILIBRAR HASTA EL REPOSO6-REGISTRAR7-RETIRAR LA MUESTRA8-EQUILIBRAR (RETIRAR LAS PESAS)9-VERIFICAR EL CERO (VENTANAS LATERALES CERRADAS) PASOS ELECTRÓNICA: COMPENSACIÓN ELECTROMAGNÉTICA RELACIÓN ENTRE LA MASA(FUERZA) Y LA CORRIENTE DE COMPENSACIÓN (CORRELACIÓN) EUTM,JULIO,2006

  24. MEDICIÓN DE VOLUMEN MATERIAL DE VIDRIO VOLUMÉTRICO (CALIBRADO, NO CALENTAR) :PIPETAS ,MATRACES AFORADOS, VASOS NO VOLUMÉTRICO- NO CALENTAR A LA LLAMA DIRECTA JARRAS,BOTELLAS,VASOS, MATRACES CLASE A – CAP PIPETAS-AFORADAS:TD-TC(SE SOPLA) GRADUADAS:TD-TC ELEGIR LA ADECUADA TODO EL MATERIAL:SANO, LIMPIO, SECO Y DESENGRASADO EUTM,JULIO,2006

  25. PASOS 1-COLOCAR PROPIPETA O PERA DE GOMA AL EXTREMO 2-INTRODUCIR LA PIPETA EN LA SOLUCIÓN 3- SUCCIONAR LENTAMENTE(NO DEBE ENTRAR AIRE),HASTA UN NIVEL POR ENCIMA DE LA MARCA DE CALIBRACIÓN 4-RETIRAR LA PIPETA 5- ENJUAGAR LA PUNTA(ERROR) 6-VACIARLA EN POSICIÓN VERTICAL HASTA QUE EL EXTREMO INFWERIOR DEL MENISCO LLEGUEA LA MARCA DE CALIBRACIÓN 7-DRENARLA EN EL RECIPIENTE DEFINITIVO EN POSICIÓN VERTICAL, SI ES TC, TOCAR LA PARED DEL RECIPIENTE EUTM,JULIO,2006

  26. PIPETAS AUTOMÁTICAS ASEGURA UN VERTIDO EFICAZ DE VOLÚMENES IGUALES (DILUCIÓN) POR DESPLAZAMIENTO DE AIRE CALIBRACIÓN MANTENIMIENTO LUBRICACIÓN PRECISIÓN (COEFICIENTE DE VARIACIÓN 0.1%- 1%) VERIFICACIÓN SECAR LA PUNTA DE ARRIBA HACIA ABAJO PUNTEROS CALIBRADOS INSTRUCCIONES EUTM,JULIO,2006

  27. SOLUCIONES- PREPARACIÓN 1-PESAR EL SOLUTO SÓLIDO EN UN VASO(GUANTES) 2-AGREGAR SOLVENTE AL VASO EN CANTIDAD SUFICIENTE PARA DILUÍR 3-COLOCAR UNAVARILLA DE VIDRIO( O UN EMBUDO DE VIDRIO) EN EL MATRÁZ. (EN EL QUE SE VA A MEDIR EL VOLUMEN FINAL DE SOLUCIÓN) 4-VERTER EL CONTENIDO DEL VASO EN EL MATRÁZ A TRAVÉS DE LA VARILLAO EL EMBUDO(PUEDE SER POR LA PARED CON PIPETA O GOTERO) 5-AGREGAR SOLVENTE AL VASO Y REPETIR LA OPERACIÓN HASTA QUE NO RESTE MAS SOLUTO Y EL NIVEL CASI ALCANCE LA MARCA DEL MATRÁZ(ENRASE) EUTM,JULIO,2006

  28. 6-AÑADIR SOLVENTE GOTA A GOTA POR EL CUELLO DEL MATRÁZ PARA ARRASTRAR SOLUTO7-TAPAR EL MATRÁZ Y MEZCLAR INVIRTIÉNDOLO Y AGITANDO 4 VECES 8-DEJAR REPOSAR (QUE DESCIENDA TODO )Y AJUSTAR EL ENRASE AGITADOR MAGNÉTICO , CORRECCIÓN DE PH SI ES NECESARIO TRASVASE O TAPADO PARA ALMACENAR EVITANDO EVAPORACIÓN EUTM,JULIO,2006

  29. CENTRIFUGACIÓN DISPOSITIVO QUE ACELERA LA SEPARACIÓN GRAVITACIONAL DE LAS SUSTANCIAS QUE DIFIEREN SIGNIFICATIVAMENTE EN SUS MASAS LABORATORIO:SEPARAR PARTÍCULAS EN SUSPENSIÓN(CÉLULAS) SEPARAR DOS LÍQUIDOS UTILIZA LA FUERZA CENTRÍFUGA RELATIVA = FCR FCR = 1.118*10 – 5 * radio * rpm ( RADIO EN CENTÍMETROS,REVOLUCIONES POR MINUTO,VELOCIDAD ROTATORIA) EUTM,JULIO,2006

  30. PRECAUCIONES :TUBOS EN EQUILIBBRIO (DISPOSICIÓN GEOMÉTRICA, PESAR)TUBOS TAPADOSINSTRUCCIONES Y ESPECIFICACIONESREFRIGERADAS, TIPO DE CABEZALESPLASMA FCR: 850-1000g 10 MINUTOS EUTM,JULIO,2006

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