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Jena, 29.04.2005

Tissue-Micro-Array von multiplen Lungenmetastasen des Nierenzellkarzinoms: Konzeption und erste Immunhistochemische Ergebnisse. Jena, 29.04.2005. Peter Schneider , A. Rolle, B. Baier, O. Holotiuk, M. Meinhardt, G. Baretton, M.P. Wirth, A. Meye. Gliederung.

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Jena, 29.04.2005

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  1. Tissue-Micro-Array von multiplen Lungenmetastasen des Nierenzellkarzinoms: Konzeption und erste Immunhistochemische Ergebnisse Jena, 29.04.2005 Peter Schneider, A. Rolle, B. Baier, O. Holotiuk, M. Meinhardt, G. Baretton, M.P. Wirth, A. Meye

  2. Gliederung 1. Metastasenproblematik beim NZK 2. Laserchirurgie von Lungen-MS 3. TMA-Technik 4. Patienten & MS-Gewebeproben 5. Bisherige Stanz- und Färberesultate 6. Vor- und Nachteile der TMA-Technik & Zusammenfassung

  3. 1861 erste Tumornephrektomie (Wolcott) Standardtherapie beim primären NZK: Nephrektomie -> Viel Primärmaterial -> Viele Studien Therapie bei Metastasen: Chirurgisch (bei solitär Metastasen) Cytokine (IL2 , IFNα)/Immunchemotherapie (20% Ansprechrate) 33% bei Erstdiagnose Metastasen 40% Metastasen nach Nephrektomie Lokalisation der Metastasen 75% Lunge 36% Lymphknoten 20% Knochen 18% Leber <10% Haut, ZNS (Maldazys et.al. 1986)

  4. Seit 1996 Lungenchirurgie mit einem neuen Nd:YAG-Laser (1318nm) (Precision Resection) Festkörper Laser: Neodym-Yttrium-Aluminium-Granat (Nd:YAG) Eigenschaften: Schneiden, Koagulation, Versiegelung Entwickelt von PD. Dr. med. A. Rolle (FKH Coswig) und Fa. Martin-Medizin-Technik umfassendes Patientengut (1999 bis 2003) Aufarbeitung und Begutachtung in pathologischer Einrichtung (Gemeinschaftspraxis für Pathologie Dresden)

  5. Stanzen mit Tissue-Micro-Arrayer (Beecher Instruments) Anzeichnen des Stanzareals

  6. Anordnung der Proben auf dem TMA 72 Metastasen/TMA + 6 bis 16 Normalstanzen

  7. Alter bei Metastasen-Resektion : 64 ± 7 Jahre (min: 42 max: 80) Anzahl OPs : 1,7 (min: 1 max: 5) : 7,2 (min: 1 max: 45 Abweichung 7,8) 87 Patienten (♂ 55 / ♀ 32 ) 86 klarzelliges NZK 1 chromophobes NZK 626 Metastasen 1243 Einzelstanzen 2 Stanzen pro Metastase: 121 Stanzen von autologem Lungengewebe

  8. Ergebnisse des Stanzens Tumorstanzen: 93,4 % Tumorhaltiges Gewebe 5,6 % Lunge 1 % Verlust 6% Artefakte (Koagulation/Nekrosen) Kontrollstanzen: 86,7 % Lunge 12 % Tumorhaltiges Gewebe 1,3 % Verlust 34,7 % Artefakte (Laserkoagulation) Nachevaluation HE zeigte hohe Übereinstimmung mit Primärevaluation (Institut für Pathologie, Universitätsklinikum C.G.Carus Dresden)

  9. 9 Blöcke mit je ~150 Stanzen 10 Schnitte pro Block, 2µm Färbungen HE (Schnitt 1 und 10) Ki 67 CD10 XIAP Survivin Mortalin

  10. Fläche pos. Stanzen : 0,51 (min: 0,05 max: 1,0) Abweichung: 0,34 Intensität pos. Stanzen : 2,04 (min: 1 max: 3) Abweichung: 0,6 CD 10 (common akute lymphatic leukämie antigen – CALLA) 100-kDa Typ II Membran-Metalloproteinase Neutrale Endopeptidase Färbeergebnisse 69,2 % pos. 26,7 % neg. 4,1 % nicht auswertbar 81% - 94% (Avery et.al. 2000, Bazille et.al. 2004, Ordonez et.al. 2004)

  11. Anzahl pos. Zellen /Stanzen : 19,5 % (min: 3 % max: 80 %) Abweichung: 12,5 Ki67 Proliferationsmarker in G1, S, G2 und M-Phase exprimiert Färbeergebnisse 63,2 % pos. 34,4 % neg. 2,4% nicht auswertbar 1% -23% beim NZK 2% im normalen Nierengewebe (de Riese et.al. 1993)

  12. Mortalin 74 kDa Protein, heat shock protein Gruppe 70 Inaktivierung von P53 in G1-Phase P53-Gen downregulation (Wadhwa et.al. 2000) In allen Geweben vorhanden (Wadhwa et.al. 1995) Überexprimiert in Tumoren (Bini et.al. 1997) Überexprimierung korreliert mit geringer Überlebensrate (Dundas et.al. 2005)

  13. Herstellung der TMAs ist aufwendig Sortieren der Proben, Auswahl des Stanzareals am HE-Schnitt Stanzen (1 Block ~ 150 Stanzen in 4 h) Vorteile Materialeinsparung Weitere, ähnlich TMA‘s möglich Kosten und Zeitersparniss Färbung von vielen Proben auf einmal möglich 9 Träger ~ 626 Einzelfärbungen Sicherung von gleichen Färbebedingungen Immunhistochemie & FISH Effizientere Auswertung Multizentrisches Arbeiten

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