1 / 20

DNA-Fingerprint

Testování produktů elektroforézou v agarózovém gelu. DNA-Fingerprint. 1. 1. Příprava elektroforézní komory. DNA-Fingerprint. 2. 1. Příprava gelové vaničky. 1.1 Přidejte 1 g agarózy k 33 ml TAE- pufru do 100 ml Erlenmayerovy baňky 1.2 Svařte směs v mikrovlnce, potom

titus
Download Presentation

DNA-Fingerprint

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Testování produktů elektroforézou v agarózovém gelu DNA-Fingerprint 1

  2. 1. Příprava elektroforézní komory DNA-Fingerprint 2

  3. 1. Příprava gelové vaničky 1.1 Přidejte 1 g agarózy k 33 ml TAE- pufru do 100 ml Erlenmayerovy baňky 1.2 Svařte směs v mikrovlnce, potom protřepejte a znovu krátce povařte 1.3 Nechte agarózový roztok zchladnout, než dosáhne 55 °C (otestujte teplotu na hřbetu dlaně) a přelijte gel DNA-Fingerprint 3

  4. DNA-Fingerprint 4

  5. 1. Příprava elektroforézní komory 1.4 Poté, co gel ztuhne, odstraňte kovové plíšky z gelovévaničky 1.5 Přilijte 270 ml TAE-pufru, abyste pokryli celý gel 1.6 Vyjměte hřebínek DNA-Fingerprint 5

  6. 2. Příprava vzorků pro gelovou elektroforézu DNA-Fingerprint 6

  7. 2. Příprava vzorků pro gelovou elektroforézu 2.1 Vyndejete 6 PCR zkumavek z termocykleru 2.2 Vložte zkumavky do držáků DNA-Fingerprint 7

  8. DNA-Fingerprint 8

  9. 2. Příprava vzorků pro gelovou elektroforézu 2.3 Do každé ze zkumavek z PCR napipetujte10 µl Orange G nanášecího barviva (LD) a promíchejte jemným potřepáváním DNA-Fingerprint 9

  10. 3. Naplnění gelových jamek DNA-Fingerprint 10

  11. 3. Naplnění gelových jamek 3.1 Naneste do gelových jamek zleva doprava: - 20 µl molecular weight ruler (MWR) - 20 µl –GMO control s PMM (1) - 20 µl –GMO control s GMM (2) - 20 µl vzorku jídla (T) s PMM (3) - 20 µl vzorku jídla (T) s GMM (4) - 20 µl +GMO-DNA s PMM (5) - 20 µl +GMO-DNA s GMM (6) DNA-Fingerprint 11

  12. 4. Průběh elektroforézy DNA-Fingerprint 12

  13. DNA-Fingerprint 13

  14. 4. Průběh elektroforézy 4.1 Zavřete elektroforézní komoru a spusťte elektroforézu při 120 V 4.2 Elektroforézu zastavte, když se barevná linie přesune 1 cm před konec gelové vrstvy DNA-Fingerprint 14

  15. 5. Zviditelňovánífragmentů DNA DNA-Fingerprint 15

  16. 5. Zviditelňování DNA fragmentů 5.1 Otevřete elektroforézní komoru a vytáhněte vaničku s gelem! Pozor, gel je velmikluzký (slijte pufr, dá se opakovaně použít) 5.2 Přeneste gel na barvící podložku, přidejte 70 ml barvicího roztoku (50x) a dvě minuty jemně protřepávejte DNA-Fingerprint 16

  17. 5. Zviditelňování DNA zlomků 5.3 Po dvou minutách slijte barvící roztok a gel odbarvěte jemným protřepáváním v teplé kohoutkové vodě(40 - 50 °C) po dobu dvaceti minut. Uschovejte barvivo pro opakované použití! DNA-Fingerprint 17

  18. 6. Vyhodnocení DNA-Fingerprint 18

  19. 6. Vyhodnocení 6.1 S pomocí měřítka molekulových hmotností (MWR) s následujícími délkami100 bp, 200 bp, 500 bp, 700 bp a 1000 bp identifikujte proužky DNA v gelu DNA-Fingerprint 19

  20. 6. Vyhodnocení 6.2 Je vaše testované jídlo geneticky modifikováno? Připravte si krátké slovní hodnocení vašich výsledků! DNA-Fingerprint 20

More Related