1 / 20

Takarmánybiztonsági alprogram A mikotoxinok mennyiségi mérésére alkalmas módszerek

A takarmány- és környezetbiztonság aktuális kérdései Mézes Miklós – Kriszt Balázs - Urbányi Béla. Takarmánybiztonsági alprogram A mikotoxinok mennyiségi mérésére alkalmas módszerek összehasonlító értékelése Minta: kukoricadara (n=10) Mikotoxin: DON:

thi
Download Presentation

Takarmánybiztonsági alprogram A mikotoxinok mennyiségi mérésére alkalmas módszerek

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. A takarmány- és környezetbiztonság aktuális kérdéseiMézes Miklós – Kriszt Balázs - Urbányi Béla

  2. Takarmánybiztonsági alprogram A mikotoxinok mennyiségi mérésére alkalmas módszerek összehasonlító értékelése Minta: kukoricadara (n=10) Mikotoxin: DON: LC/MS vs. HPLC korrelációs együttható értéke: r = 0,646 (P0,05) LC/MS vs. ELISA korrelációs együttható értéke: r = 0,766 (P0,05) HPLC vs. ELISA korrelációs együttható értéke r = 0,898 (P0,05)

  3. Takarmánybiztonsági alprogram Országos szintű felmérés a takarmány alapanyagok és takarmányok mikotoxin szennyezettségének vizsgálatára az egyes régiókban

  4. Vizsgált minták betakarításának ideje – 2012-2013 Takarmány alapanyagok • Gabona magvak – kukorica, búza • Olajmagvak darái – szójadara, napraforgó dara • Tömegtakarmányok – kukorica szilázs, lucerna szenázs, fűszenázs Mérési módszerek • Előtisztítás immunaffinitás oszlopon + HPLC • AFB1 (AOAC) • zearalenon (AOAC) • DON (Czerwiecki and Wilczyńska, 2003) • T-2, HT-2 (Trebstein et al, 2008)

  5. Aflatoxin B1 (határérték: 20 µg/kg) DON (határérték: 5 - 12 mg/kg)

  6. T-2 toxin (határérték – 0,25 mg/kg) HT-2 toxin (határérték – nem ismert)

  7. Zearalenon (határérték: 0,1 – 3 mg/kg)

  8. Környezetbiztonsági alprogram • Takarmánybiztonság – Mikotoxinok • Mikotoxin biodegradációs vizsgálatok • Vizsgált mikroszervezetek • 14 nemzetség • 109 faj • 141 törzs • Vizsgált mikotoxinok • Aflatoxin B1 (AFB1) • Zearalenon (ZEA) • Ochratoxin (OTA) • T2-toxin (T2) • Deoxinivalenol • Multimikotoxin bontás • A prokarioták esetében elsőként mutattunk ki multimikotoxin • (AFB1-ZEA-T2) biodegradációt és biodetoxifikációt

  9. Biodegradáció Biodetoxifikáció AFB1 tartalmú kukoricán nevelt

  10. Aflatoxin az anyatejben? - Új kutatási irány • RASSF (Rapid Alert System forFood and Feed) • Riasztások magyarországi tejmintákhoz. • 2007/09/17 (450 ng/kg), 2012/01/23 (72 ng/l), 2012/10/22 (95 ng/l), 2012/10/25 (75 ng/l), 2012/11/26 (73 ng/l), 2013/08/12 (121 ng/l) • Aflatoxin előfordulás anyatejben: • Afrika, Dél-Amerika, Ausztrália, Arab államok területén sok esetben • Törökországban és Olaszországban számos esetben igazoltan • Magyarország: aflatoxin B1 van, anyatej vizsgálat nem volt! • Klímaváltozás – hogyan változik a toxin kockázat? KTIA_AIK_12-1-2013-0017

  11. Környezetbiztonsági alprogram • Szénhidrogén szennyezők biodegradációja • Az alkán-lebontás kulcsgénjének kimutatása a Rhodococcus nemzetség közel összes • képviselőjéből - kimutattuk, hogy a szénhidrogén-lebontásra a nemzetség szinte valamennyi képviselője • képes lehet – a genetikai háttér adott hozzá - a vizsgált funkciógének filogenetikai marker génként szolgálhatnak • Új szénhidrogén-lebontó mikrobafaj izolálása és leírása Zoogloea oleivorans néven • biofilm-képző baktérium, amely képes a kőolajalkotó szénhidrogének lebontására • Új molekuláris monitoring módszer az aromás szénhidrogének mikroaerob lebontásában résztvevő mikroba közösségek és funkciógének nyomon követésére

  12. Környezetbiztonsági alprogram Endokrin rendszert megzavaró anyagok (EDC-EndocrineDisruptingChemicals) forrásai(kép: Csepeli Andrea) hulladéklerakók (1), szennyvíztisztító telepek (2), ipari tevékenység (3), háztartások és kórházak elfolyó vize (4), állattartó telepek (5) szántóföldek, gabonatárolók(6)

  13. ED hatású vegyületek biodegradációja • Számos perzisztens, illetve „másodlagos” perzisztenciára hajlamos (pl. talajból mélyebb rétegekbe mosódva, reduktív körülmények között)  atrazin, betiltása ellenére egyik leggyakrabban detektálható peszticid környezeti elemekben • Endokrin diszruptor hatás • DDT (RachelCarson, 1962) • számos peszticidről bizonyosodott be, hogy EDC  atrazin (aromatáz • induktor, egyes bomlástermékei is)! • SZIE KKBT: atrazinbiodegradációjaés abontási maradékanyag biológiai hatása • Biodegradációra képes analitika alapján (50 mg/l atrazin 50-97%-os bontása): • 13 Rhododoccus spp.; 1 Cupriavidussp.; 1Olivibactersp.; 1Serratiasp • Biodetoxifikációs vizsgálat • Aromatáz enzim indukciója, CYP19 gén expressziója humán sejtvonalon • Emelkedett ösztrogén termelés mérése - egyszerű, gyors és költséghatékony - biolumin- • eszcencián alapuló bioriporter teszttel • Cél: Biodegradáció biológiai hatás megszüntetésével

  14. 5α-dihidro-tesztoszteron (DHT) • Androgén hatás kimutatására alkalmas biomonitoring rendszer kidolgozása • Biodegradáció és biodetoxifikáció igazolása (Rhodococcus és Cupriavidus nemzetség, 10 törzs) • Vizsgálataink alapján az összes törzs képes volt a DHT bontására • DE! nem mindegyik törzs szűntette meg az androgén hatást • Feltételezhető androgén hatású metabolitok keletkezése • A bontás enzimatikus alapjainak igazolása • RhodococcuspyridinivoransAK37 sejtmentes extraktumával bontási kísérlet • az androgén hatás megszűnése már az első órában • a DHT bontásban konstitutív és extracelluláris enzimek vesznek részt

  15. ED hatású vegyületek hatásának vizsgálata zebradánió lárva modellben Zearalenon vizsgálata klasszikus toxikológiai tesztekkel, vitellogenin szint mérése Transzgenikus vonal létrehozásának elindítása pajzsmirigy zavaró anyagok vizsgálatához Máj (vitellogenin) transzgenikus vonal létrehozása és vizsgálata

  16. EKG mérés érzékenységének tesztelése halakon • A munka elsődleges célja volt elektrokardiográfia segítségével vizsgálni, a zebradánió modell érzékenységét egy szívműködést befolyásoló anyag hatására. • A krónikus nátrium-fluorid (NaF) kezelés hatására a halaknál hasonló szívműködésbeli elváltozások voltak megfigyelhetőek, mint amiket emlősökön írtak le szintén krónikus kitettség esetén.

  17. Etológiai vizsgálatok zebradánión • Egyszerűen értékelhető, színpreferenciával kapcsolt területhasználati és mozgásvizsgálati teszt került kialakításra, amely jól illeszthető a zebradánió embrióra alapozott toxikológiai szabvány tesztekhez. • Elébe megy a kísérleti állatok felhasználását szabályozó rendeleteknek, remekül illeszkedik a „3R” stratégiába. • A teszt kialakítása lehetővé teszi annak illesztését a standard zebradánió embrió protokollokhoz azok befejezése után. • Segítheti egy tesztelt anyag neurotoxikus hatásának felderítését.

  18. Fejlődő embrió 96 órás elúszó lárva Teszt edény a vizsgálathoz Vizsgálat időtartam: 1 óra OECD vagy EPA szabvány toxikológiai teszt Vizsgálat időtartama: 96 óra

  19. Köszönjük megtisztelő figyelmüket!

More Related