アザン染色 （ Azan stain ） 結合組織の染色

1. アザン染色（Azanstain）結合組織の染色

2. 目的 膠原線維と筋線維を染め分ける染色法。 原理 酸性タール色素の重染色（配合染色） 酸性色素の分子量（分散度）の差に基づく方法であり、分子量の小さい色素は密な組織に、分子量の大きい色素は粗な組織に吸着されることを利用している。 膠原線維は粗構造で間隙が広く、筋線維では密構造で間隙が狭い。 負電荷小色素分子のアゾカルミンＧ、オレンジＧは密構造に入りやすく内面を密におおう。 アニリン青は、一部正帯電のNH3基をもち親水性に乏しいので吸着性が大きく、広い間隙に入り小色素分子を押し退けて定着する。 アニリン青＞酸性フクシン＞アゾカルミンＧ＞オレンジG＞ピクリン酸

3. 結合組織 体の中のいろいろな構造や臓器のすき間を埋めて支える組織。 結合組織は全身のいたるところにあり、細胞への栄養分を補給したり細胞から 老廃物を排除するなど、新陳代謝に関わっている。 煮魚が冷えると、煮こごりができることがある。 これは魚に含まれる膠原線維が分解されて、膠（にかわ）状に なったもので、膠原線維の名前の由来になっている。

4. 試薬 • 媒染液 10%トリクロル酢酸水溶液　　　　　　10%重クロム酸カリウム水溶液　 • アゾカルミンＧ液 使用する前に60℃に暖めておく • アニリン・アルコール • 酢酸アルコール • リンタングステン酸液 • アニリン青オレンジＧ液 リンモリブデン酸

5. アゾカルミン SO3Na SO3Na N N N+ N+ NH NH SO3Na SO3 SO3- アゾカルミンG アゾカルミンB

6. オレンジG HO N ＝ N NaO3S SO3Na

7. 染色法 アゾカルミンＧ液 軽く水洗（流水×） アニリンアルコール 酢酸アルコール 流水水洗 リンモリブデン酸 流水水洗 アニリン青オレンジＧ液 アルコール×３ キシロール・封入 脱パラ・流水水洗 染色 分別 分別停止 媒染 染色 分別脱水・透徹

8. 注意 • 　アゾカルミンＧは十分濃く染色しておく。 • 　アニリン・アルコールによる分別はかなり速く脱色される。 • リンタングステン酸でもある程度脱色されるので、少し濃い程度にしておく。 • 　アニリン青の分別は非常に大切で、この分別１つでアザン染色の成否が決まるといってよい。できるだけ早く染色液を純エタノールと置換することが大切。 • 　染色をやり直す時は、薄いアンモニア水か、アンモニアアルコールに入れ脱色し、水洗して染色をやり直す。

9. 染色結果