Cocos Gram Negativo Neisseria spp

1. Cocos Gram NegativoNeisseriaspp M. Paz Microbiología UMG-2014

2. Familia Neisseriaceae • Géneros • Neisseria • Patógenos humanos • Kingella • Eikenella • Simonsiella • Alysiella

3. Género Neisseria • Único reservorio: ser humano • Dos especies patógenas • N. gonorrhoeae • Gonorrea • N. meningitidis • Meningitis epidémica/meningitis meningocóccica • Muchas especies no patógenas habitantes del tracto respiratorio.

4. Género Neisseria • Neisser (1879) • Describió al agente causal de la gonorrea • Leistikow & Loeffler (1882) • Cultivo por primera vez • Weichselbaum (1887) • aisló a N. meningitidisde LCR de un paciente con meningitis purulenta • endémica, epidémica y meningococcemia • estado de portador

5. Género Neisseria: Morfología • Aerobios • Cocos Gram Negativo • No móviles • Crecen en parejas • No formadores de esporas • Los cocos individuales son pequeños (0.8 x 0.6 µm) • Tienen forma de riñón (ladosplanosadyacentes) • Citoplasma y pared celular son similares entre las dos especiesy similitud de ADN de 70%

6. Género Neisseria: Morfología • Pared celular: tieneunacapadensa y unamembranaexterna • Meningococos: tienencápsula de polisacáridos y pocosplásmidos • Gonococos: no cápsula y sícontienenplásmidos • Ambasespeciesformancoloniasconvexas, brillantes y mucoides de 1-5 mm. • Medios de crecimiento: agar chocolate y CO2 al 5%

7. Características de cultivo • Crecen mejor en condiciones aeróbicas. • La mayoría oxidan carbohidratos, producen ácido pero no gas. • Producen oxidasa. • Susceptibles a ácidos grasos y a metales traza contenidos en la peptona y en el agar (se contrarresta con sangre, suero, almidón o carbón) • El agar “chocolate” es más adecuado

8. Características de cultivo • Baja Resistencia a condicionesfísicas y químicas • Sufrenautólisis • Susceptiblesa desecación • Oxidasa(+) • Oxidanrápidamente DPD o TPD (dimetil o tetrametilparafenilendiamina) • Produce un color de rosado a negro en lascolonias

9. Género Neisseria: Metabolismo

10. Neisseria meningitidis

11. Neisseria meningitidis • Usualmentehabita en la nasofaringe sin causarsíntomas (microbiotatransitoria) • Desde la nasofaringeacceden a la sangre y causanmeningococcemia • Complicación: meningitis • Meningococcemia grave: fulminante, fiebreelevada y exantemahemorrágico, CID y colapsocirculatorio (Waterhouse-Friderichsen)

12. Patogenicidad y virulencia de N. meningitidis • Mediadapor los pili • Colonizaciónespecífica de receptor de lascélulas no ciliadas de la nasofaringe • Cápsulaantifagocítica de polisacáridoque le permitediseminarse en ausencia de inmunidadespecífica. • Efectostóxicosmediadosporhiperproducción de lipooligosacárido • Serogrupos A, B, C, Y, W135 responsables de 90% de todaslasinfecciones

13. Patogenicidad y virulencia • Receptoresparalasfimbriasbacterianas (gangliósido GD1) sobrelascélulascolumnaresepiteliales no-ciliadas en la nasofaringe del hospedero. • Los m.o. son internalizados en vacuolasfagocíticas, evitando la muerteintracelular. • Replicaciónintracelular y migración al espaciosubepitelialdondeliberafragmentos de membrana. • Hiperproducción de endotoxina (lípidoA) y se disemina al ambientecircundante (espaciossubepiteliales, torrentesanguíneo): causa la mayoría de manifestacionesclínicas de daño vascular: dañoendotelial, vasculitis, trombosis, CID.

15. Epidemiología • Diseminaciónpersona-persona víaaerosolización de secrecionesrespiratorias • Másaltaincidencia en niñosmenores de 5 años, personas institucionalizadas y pacientesinmunodeficientes • Meningitis y meningococcemia: serogrupos B y C • Neumonía: serogrupos Y yW135 • Infeccionesen paísessubdesarrollados: serogrupo A • Mayor incidencia en lasépocasfrías y secas del año en todo el mundo (Se presenta en ondas)

16. Diagnóstico • Muestras: LCR, sangre y aspirados petequiales • Frote de Gram: difícil cuando hay pocos m.o (centrifugar y obtener sedimento para la tinción) • Cultivo: en agar chocolate o TM en jarra con candela a 37C • Identificación: Oxidasa y pruebas de oxidación de carbohidratos

18. Cultivo • Medioselectivo de Thayer Martin • Agar chocolate con Vancomicina (inhibe a Gram +), Colistina (inhibe a Gram -), Nistatina (inhibehongos) y Trimetoprim (inhibe a Proteus sppqueocasiona swarming) • Las coloniasrequieren 48-72 horasparacrecer. • Medioalternativo: Agar Lewis Martin agar (similar al TM, perousaanisomicina en lugar de nistatina, parainhibirmejor a Candida albicans).

19. Cultivo en jarra con candela

20. Cultivo de N. meningitidis

21. Enfermedades asociadas con Neisseria meningitidis • Después de la diseminación de organismos virulentos de la nasofaringe: • Meningitis • Septicemia (meningococcemia) con o sin meningitis • Meningoencefalitis • Neumonia • Artritis • Uretritis

23. Infecciones por MGC • Síntomas: fiebrealta, escalofríos, dolor muscular y rash petequial (típico de infeccionespor MGC) • Enfermedadpuedesercrónica, moderada o fulminante.   • Tipofulminante: Síndrome de W-F con CID, hemorragiadentro de la piel, glándulasadrenales y otrosórganos. • Muerterápidapor la toxemia generalizada y el shock.

24. Rash Petequial

25. Síndrome de Waterhouse-Friderichsen

26. Prevención y Tratamiento • Inmunidad pasiva por lactancia • Droga de elección: penicilina • Drogas alternativas: cloranfenicol, ceftriaxona y cefotaxima. • Quimioprofilaxiapara contactos: rifampicina o sulfadiazina • Inmunoprofilaxia: vacuna (no efectiva para el serogrupo B)

27. Prevención y Tratamiento • Vacunas de polisacárido conjugado para niños menores de 2 años (18 meses). • Serogrupos A, C, Y y W-135 • No se muy inmunogénica ni confiere inmunidad prolongada • Vacuna conjugada con el toxoide diftérico • Autorizada para 11-55 años

29. Neisseria gonorrhoeae

30. Neisseria gonorrhoeae • Únicohospedero natural: humano • Portadorasintomáticoes el mayor reservorio. • Edadmásafectada: 15-24 años • Patogenia: gonorrea • Uretritis • Cervicitis

31. Generalidades deNeisseriagonorrhoeae • Fácilmentetransmitidoporcontacto sexual • Diplococos Gram-negativoachatadospor el lado de unión. • Fastidiosos, capnofílicos y susceptibles a temperaturasfrías, a la desecación y a ácidosgrasos. • Requieremedios pre-calentadoscomplejos • El mediodebellevaralmidón soluble paraneutralizar la toxicidad de los ácidosgrasos • Crecemejor en atmósferahúmedasuplementada con CO2 • Produce ácido de la oxicación de glucosa, pero no de otrosazúcares.

32. Diagnóstico, tratamiento y prevención • Tinción de Gram es precisa en muestras masculinas. • Cultivo: diagnóstico definitivo • Biología molecular • Tratamiento: Cefixima, Ceftriaxona, Ciprofloxacina y ofloxacina en casos no complicados. Penicilina debe evitarse porque ya se presenta mucha resistencia. • Doxiciclina y Azitromicina en casos complicados con Chlamydia sp. • Profilaxia de conjuntivitis neonatal: nitrato de plata 1% • Prevención: educación (ETS) • NO HAY VACUNA

33. Crecimiento de GC enMTM

34. Oxidasa positivo

35. Prueba de Oxidasa en placa

36. Prueba de Oxidasa en papel

37. Identificación Bioquímica • Para diferenciar entre las especies de Neisseria y B.  catarrhalis. • Pruebas de utilización de carbohidratos. • Oxidación de Carbohidratos • Se usa un Agar Cistina-Triptosa (CTA) con azúcares. Requiere una inoculación grande e incubación sin CO2 y observación por 24-72 horas. • Resultados: GC: + para glucosa solamente

38. Azúcares en CTA

39. Epidemiología de la Gonorrea • Serio subregistro • Diferencia epidemiológica entre hombres y mujeres • Mayor reservorio: portador sintomático • Transmisión sexual • No hay inmunidad protectora para la reinfección (en parte por la diversidad antigénica de las cepas) • Mayor riesgo de enfermedad diseminada en pacientes inmunocomprometidos.

41. Patogenia de Neisseria gonorrhoeae • Bacterias fimbriadas se adhieren al epitelio de la membrana mucosa intacta • N. gonorrhoeae tiene capacidad de invadir membranas intactas o piel con abrasiones. • Adherencia al epitelio mucoso • Penetración y multiplicación antes de pasar a través de las células epiteliales de la mucosa • Establecimiento de la infección en la capa subepitelial • Sitios más comunes de inoculación: • Cervix (cervicitis) o vagina en la mujer • Uretra (uretritis) o pene en el hombre

42. Factores de virulencia asociados a Neisseria gonorrhoeae

43. Gonorrea

44. Ophthalmia neonatorum

45. Significancia clínica del GC • Infeccionescomplicadas • Ocurrenmásfrecuentemente en mujeres • Diseminación del cérvix a lastrompas de falopio • Endometritis • Salpingitis • Peritonitis (EIP) • Ocurre en 10-20% de mujeresinfectadas • Síntomas: dolor abdominal bajo, flujo cervical y vaginal anormal, úteroblando. • Puederesultar en infertilidad o en embarazoectópico.

46. Salpingitis

47. GONOCOCCEMIA • Presencia de N. gonorrhoeaeen el torrente sanguíneo que puede llevar al desarrollo de una infección gonocóccica diseminada (IGD). • Ocurre en aprox 0.5-3% de pacientes con gonorrea.

48. Manifestaciones clínicas • Cuadro bifásico: • Fase temprana • Tenosinovitis • Artralgias • Dermatitis • Fase localizada • Artritis séptica • Complicaciones: osteomielitis, meningitis, endocarditis, síndrome de dificultad respiratoria y shock séptico fatal

49. Pacientes a riesgo • Mujeres embarazadas o menstruando • Personas con inmunodeficiencias • Deficiencia de complemento • Enfermedad por VIH • Lupus Eritematoso Sistémico

50. Fisiopatología • Diseminación del gonococo desde un sitio primario como el endocérvix, la uretra, la faringe o el recto hacia la sangre y luego a un órgano final. • Usualmente son infectados múltiples sitios • Articulaciones y piel • Depende de cambios fisiológicos del paciente y de factores de virulencia del GC