PREPARATION DU SPERME DU CONJOINT POUR UNE TECHNIQUE D’AMP ou TMS

1. PREPARATION DU SPERME DU CONJOINT POUR UNE TECHNIQUE D’AMP ou TMS

2. Une technique classique de sélection des Spermatozoïdes La sélection des spermatozoïdes est effectuée à partir d’une technique de séparation par gradient de densité multicoucheen utilisant une solution colloïdaled’un dérivé du Percoll*

3. On dépose les différentes couches du gradient de densité : D’abord la couche Dense (à 90%)

4. On dépose les différentes couches du gradient de densité : D’abord la couche Dense (90%)puis la couche moins dense ( 45 %)

5. On dépose les différentes couches du gradient de densité : D’abord la couche Dense (90%) puis la couche moins dense ( 45 %) Puis une fraction du sperme

6. On centrifuge L’ensemble de manière à accélérer Le processus de sélection des cellules en fonction de leur densité. Les spermatozoïdes (lourds) migrent Vers le fond

7. On centrifuge L’ensemble de manière à accélérer Le processus de sélection des cellules en fonction de leur densité. Les spermatozoïdes (lourds) migrent Vers le fond

8. Le tri des différents types de cellules s’est alors effectué selon le schéma suivant : >>

9. On décante alors, par aspiration les couches supérieures, pour ne Garder que la préparation de spermatozoïdes purifiée.

10. On recouvre le culot spermatique avec du milieu de Culture neuf et on laisse migrer les spermatozoïdes les Plus mobile dans ce Milieu.

11. On recouvre le culot spermatique avec du milieu de Culture neuf. et on laisse migrer les spermatozoïdes les Plus mobile dans ce Milieu. C’est le SWIM-UP

12. La couche intermédiaire est alors constituée de spermatozoïdes très mobiles en voie de « capacitation » (prêts à féconder les ovules qu’on mettra en contact : IAC, FIV, ICSI, IMSI…)