slide1 n.
Download
Skip this Video
Loading SlideShow in 5 Seconds..
Metode microbiologice de detectie a alimentelor iradiate PowerPoint Presentation
Download Presentation
Metode microbiologice de detectie a alimentelor iradiate

Loading in 2 Seconds...

play fullscreen
1 / 13

Metode microbiologice de detectie a alimentelor iradiate - PowerPoint PPT Presentation


  • 181 Views
  • Uploaded on

Metode microbiologice de detectie a alimentelor iradiate. Mioara Alexandru, Eva-Ruxandra Almajan, Laura Trandafir, Mihai Constantin. Laboratorul de microbiologie IRASM.

loader
I am the owner, or an agent authorized to act on behalf of the owner, of the copyrighted work described.
capcha
Download Presentation

PowerPoint Slideshow about 'Metode microbiologice de detectie a alimentelor iradiate' - siegfried


An Image/Link below is provided (as is) to download presentation

Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author.While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server.


- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - E N D - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -
Presentation Transcript
slide1

Metode microbiologice

de detectie a

alimentelor iradiate

Mioara Alexandru, Eva-Ruxandra Almajan, Laura Trandafir, Mihai Constantin

laboratorul de microbiologie irasm
Laboratorul de microbiologie IRASM
  • Laborator de control al calitatii independent autorizat de Agentia Nationala a Medicamentului pentru efectuarea testelor de:

- incarcatura microbiana

- teste de sterilitate

pentru produse farmaceutice: comprimate, capsule, unguente / creme, perfuzabile, injectabile, siropuri, supozitoare, suplimente alimentare etc.

laboratorul de microbiologie irasm1
Laboratorul de microbiologie IRASM
  • Sistem de management al calitatii certificat conform cu standardul ISO 9001:2000
  • Acreditare conform cu standardul ISO 17025:2005 de catre RENAR – in curs
detectia alimentelor iradiate
Detectia alimentelor iradiate
  • Legislatia romana vs. legislatia europeana
  • Sanatatea publica – problema de interes general – controlul calitatii alimentelor
  • Proiectul LDAI – implementarea pentru prima data in Romania a metodelor standardizate de detectie a alimentelor iradiate, din care 3 sunt metode microbiologice
detectia alimentelor iradiate1
Detectia alimentelor iradiate
  • Aplicarea unui tratament cu radiatii ionizante – modificari la nivel celular si molecular.
  • Pot fi detectate si prin 3 metode microbiologice:

- DNA Comet Assay

- DEFT / APC - Direct Epifluorescence Filter Technique / Aerobic Plate Count

- LAL / GNB - Limulus Amoebocyte Lysate / Gram Negative Bacteria

detectia alimentelor iradiate2
Detectia alimentelor iradiate
  • Principiile metodelor:

- DNA Comet assay – migrarea in camp electric a fragmentelor de ADN din celulele produsului iradiat

- DEFT / APC – diferenta dintre numarul total de microorganisme (DEFT) si numarul de microorganisme viabile (APC)

- LAL / GNB - compararea numarului de bacterii gram negative cu concentratia de endotoxine de la suprafata probei

dna comet assay en 13784 2002 carne seminte fructe uscate condimente

PROBA DE TESTAT

Obtinere celule izolate

Fixarea celulelor pe lama in agaroza

Electroforeza – Migrarea fragmentelor de ADN

Colorare cu AO

Vizualizare la microscop cu epifluorescenta

DNA Comet Assay – EN 13784: 2002(carne, seminte, fructe uscate, condimente)
slide8

Suspensia din proba

DEFT

APC

Inoculare directa in placi cu agar

Filtrare

Colorare cu AO

Numarare UFC

Vizualizare la microscop cu epifluorescenta

Calculare Nr. DEFT

DEFT / APC – EN 13783:2002

(ierburi si condimente)

slide9

Suspensia din proba

LAL

GNB

Inocularea la suprafata pe mediu neselectiv

Prepararea dilutiilor in eprubete de titrare LAL

Incubare 90 min la t ˚ camerei

Incubare 1 ora, 37 ˚ C

Adaugarea unui strat de mediu selectiv

Calcularea concentratiei de endotoxine in functie de aglutinare

Numarare GNB

LAL / GNB – EN 14569: 2005

(carne pasare)

echipamente si infrastructura
Echipamente si infrastructura
  • Laboratorul de Microbiologie IRASM detine spatii si materiale necesare pentru aplicarea celor 3 metode specifice fiecarei etape (preparare medii de cultura, pregatire sticlarie, camere cu hote cu flux laminar, camera de incubare, camera pentru electroforeza)
  • Echipamente achizitionate in cadrul proiectului:
    • Autoclav
    • Etuva
    • Microscop cu Epifluorescenta
    • Dispozitiv filtrare
    • Electroforeza
recomandari
Recomandari
  • DEFT / APC, LAL / GNB – se recomanda estimarea prealabila a incarcaturii microbiene pentru produsul de testat pentru stabilirea dilutiilor de lucru

(din literatura sau din istoricul probelor testate, de exemplu condimentele au aproximativ 108 UFC/g)

  • DNA Comet Assay – se recomanda ca suspensia din proba sa fie suficient de diluata pentru a evita suprapunerea celulelor in urma inglobarii in gelul de agaroza
concluzii
Concluzii
  • Cele 3 metode nu sunt specifice pentru detectia tratamentului cu radiatii, rezultate pozitive putand fi obtinute si in urma altor tratamente de conservare, fiind metode de screening
  • Diagnosticul se poate pune doar dupa confirmarea rezultatului pozitiv folosind metode standardizate specifice pentru tratamentul cu radiatii ionizante
  • Datorita costurilor reduse cele 3 metode pot fi aplicate unui numar mare de probe, doar probele cu rezultate pozitive fiind supuse unor teste suplimentare specifice.