Coordonator: USAMV Bucuresti Facultatea Biotehnologii

1. PNCDI IIContract 51-065/2007- DIVINMOLStudiul ecologic si molecular asupra diversitatii microorganismelor din areale viti-vinicole consacrate in contextul programelor europene de gestionare a bioresurselor naturale Coordonator: USAMV Bucuresti Facultatea Biotehnologii Director proiect: Dr Florentina Matei

2. http://www.biotehnologii.usamv.ro/cercetare/proiecte/view/pncdi-ii-nr-51-065-2007-divinmolhttp://www.biotehnologii.usamv.ro/cercetare/proiecte/view/pncdi-ii-nr-51-065-2007-divinmol Parteneri implicaţi în proiect

3. Obiectivul general este acela de a caracteriza biodiversitatea microorganismelor din areale vitivinicole consacrate prin tehnici moderne de biologie moleculara si de a crea un fond de germoplasma cu tulpinile caracterizate in vederea utilizarii acestuia in cercetare fundamentala si in cea aplicativa Rezultate • Elaborarea unui memoriu bibliografic asupra rezultatelor studiilor clasice de biodiversitate a microorganismelor din areal vitivinicole consacrate romanesti • Izolarea, purificarea si caracterizarea clasica (morfologica si fiziologica) a unor microorganisme (drojdii, fungi filamentosi) din areale viticole romanesti • Crearea unui fond de germoplasma sub forma liofilizata • Caracterizarea biodiversitatii drojdiilor si mucegaiurilor prin metode moleculare (profiluri ADN, microsateliti) • Testarea oenologica si senzoriala (olfactometrie si gaz cromatografie) a unor tulpini valoroase • Elaborarea hartilor de biodiversitate a microorganismelor de vinificatie • Diseminarea rezultatelor la nivel national si international

4. Elementele de noutate ale proiectului, originalitate • Contributii • brevetarea unor drojdii de vinificatie selectionate in vederea introducerii lor in studiile de biodiversitate si distributie geografica la nivel european; • formarea resursei umane din cercetare in vederea stapanirii tehnicilor de cercetare a biodiversitatii practicate in prezent in laboratoarele de profil la nivel european (PCR interdelta, Q-RT-PCR, profile de restrictie ITS, microstaeliti, etc); • introducerea tulpinilor romanesti valoroase in circuitul colectiilor internationale de microorganisme si in circuitul comercial de LSAV • un management mai riguros, durabil, al resurselor de drojdii autohtone in vederea obtinerii unor vinuri romanesti cu specificitate • crearea unui fond de germoplasma util in cercetarea fundamentala si cea aplicativa. • Elementele de originalitate la nivel national sunt date de abordarea biodiversitatii levuriene prin prisma celor mai recente tehnici de biologie moleculara pornind de la relatia efect-cauza si nu cum acest lucru a fost abordat pana in prezent la nivel pur tehnologic, adica al efectului final al activitatii levuriene. • Tema propusa va fi in masura sa dovedeasca pe baza profilului genetic al fiecarei tulpini corelatia dintre polimorfismul genetic intraspecific si calitatea produslui finit. Pe plan european, studiul fiziologic si molecular al diversitatii levurilor din podgoriile romanesti face posibila integrarea cercetarii fundamentale si aplicative in contextul programelor europene de gestionare a bioresurselor naturale.

5. Beneficiarii rezultatelor, potentialul de aplicare in economie: • Principalii beneficiari ai acestui proiect vor fi producatorii de vinuri din areale viticole autohtone care vor putea obtine vinuri cu tipicitate pronuntata prin utilizarea de culturi starter locale obtinute din tulpinile pastrate in colectie sub forma liofilizata. • Producerea vinurilor tipice va impulsiona dezvoltarea regiunilor viticole din Romania, ceea ce va conduce la cresterea nivelului de trai al producatorilor de vinuri • Din punct de vedere stiintificproiectul contribuie la dezvoltarea resursei umane, fiind implicati in cecetarile de biologie moleculara un numar impresionant de tineri cercetatori (7 sunt tineri, respectiv 3 doctoranzi, 2 masteranzi), creeandus-e astfel o premisa pentru viitoarele cercetari.

6. Etapa I/2008: Studiul documentar asupra biodiversitatii microorganismelor din areale viti-vinicole consacrate. Izolare drojdii vinificatie din areale consacrate. • Buget de stat: 263 000 lei • Precursori/rezultate intermediare: • Fise de izolare si colectie drojdii vinificatie (200) • Studiu asupra microflorei viticole specifice arealelor nationale (1) • Achizitii realizate • Echipamente CD: • Microscop trinocular cu camera digitala Krüss • Balanta KERN –analitica • Biureta digitala Brand III

7. Etapa II/2008:Izolare de noi tulpini de drojdii vinificatie si mucegaiuri de alterare. Caracterizare morfo-fiziologica tulpini pure • Buget de stat: 362 363 lei • Precursori/rezultate intermediare: • Raport de izolare-fise tulpini pure (+ 242) • Caiet colectie tulpini drojdii si mucegaiuri (total 442 drojdii din care 52 Saccharomyces) • Achizitii realizate • Echipamente CD: • Microscop XDS-3 • Spectrometru de masa Waters Surse de ionizare

8. Etapele IIIA-IIIB/2009:Identificare taxonomica tulpini drojdii si mucegaiuri. Conservare fond germoplasma • Buget de stat: 280643 lei • Precursori/rezultate intermediare: • Raport asupra biodiversitatii microorganismelor in areale viti-vinicole • Teste de rezistenta a drojdiilor • Catalog/Caiet de colectie cu fise descriptive (450 fise) • Punere la punct metoda de liofilizare drojdii (randament de liofilizare intre 35 si 77% ) • 50 tulpini Saccharomyces rezistente au fost liofilizate pentru colectie • Achizitii realizate • Echipamente CD: • Autoclav vertical • Balanta analaitica • Distilator • Liofilizator

9. Participare tineri cercetatori • Numar participanti sub 35 de ani: • 2008: 17 • 2009: 13 • Masteranzi: • Luminita Dejan: tehnici de identificare rapide drojdii API 20C • Doctoranzi: • Catalina Voaides (2009): stagiu la INRA-Colmar Franta pentru perfectionare in tehnici moleculare aplicate in studiile de biodiversitate a drojdiilor • Camelia Diguta (2008/2009): stagii perfectionare la Universitatea Bourgogne-IUVV Jules Guyot, Dijon, Franta in tehnici de izolare si caracterizare moleculara a fungilor filamentosi • Licente (lucrari absolvire): • 2008: Ana Cucu, Facultatea de Biotehnologii,USAMV Bucuresti: “IZOLAREA, PURIFICAREA SI CONSERVAREA UNOR TULPINI DE DROJDII DE VINIFICATIE DIN AREALE VITI-VINICOLE ROMANESTI” • 2009: Mihaela Florea, Facultatea de Biotehnologii,USAMV Bucuresti : Biodiversitatea drojdiilor prezente în procesul devinificaţie • In curs de elaborare: • Getuta Nicolae, Facultatea de Biotehnologii,USAMV Bucuresti : Punerea la punct de metodei de liofilizare a drojdiilor de interes industrial • AnaMaria Nicolae, Facultatea de Biotehnologii,USAMV Bucuresti: Studii comparative asupra tehnicilor clasice si rapide API 20C de identificare a drojdiilor de vinificatie

10. Diseminare - articole • Ioana Vatuiu, Daniela Vatuiu, Beatrice Gilea, Luminita Dejan, Catalina Voaides, Calina Petruta Cornea, Florentina Matei (2008): Improvement of biomass production and DNA extraction from filamentous fungi Proceedings of the International Symposium “New Research in Biotechnology”, Bucharest, Nov 2008. p.267-272. • Fl.Radoi-Matei, M. Burcea, E. Brinduse, A.Kontek (2008): Improvement of Romania wines characteristics by using autochthonous yeast starter cultures. Proceeding of the International Conference BIOATLAS 2008, Transilvania Univ. Brasov,Romania • Camelia Diguta, Michele Guilloux Benatier, Herve Alexandre, Florentina Matei, Sandrine Rousseaux(2008): Isolation et caracterisation des souches de Fusarium isolees dans les vignoble. Journee de Jeune chercheurs, Dijon, France, Nov. 2008. • Mioara Varga, Florentina Matei (2009): The application of statistical modeling tools to predict the growth evolution of food born moulds. Roum. Biotech. Lett., Vol.15, No.2, p.4249 – 4259 (ISI).

11. Diseminare- Comunicari stiintifice • Radoi-Matei F, Brinduse E, Ciubuca A,Kontek A (2008): Studies on the autochthonous wine yeast potential in Dealu Mare (Romania) vineyard. XII IUMS Internat. Congress – Micology, Istanbul Turkey, 5-9th August. • Camelia Diguta, Stelica Cristea, Luminita Visan, Florentina Matei: Moulds diversity in Romanian vineyards, Simpozion International ICEADR 2009, Bucuresti, Romania • Florentina Radoi Matei, Aurel Ciubuca, Luminita Dejan, Elena Postolache: Wine yeast biodiversity in Moldavia County, Romania,FEMS 2009, Goteborg, Suedia • Elena Brinduse, Florentina Matei, Luminita Dejan, Armand Kontek: Studies on yeast biodiversity in ecological and non-ecological vineyardCongresul International OIV 2009, Zagreb. • Matei Florentina - CONSERVATION OF WINE YEAST BIODIVERSITY IN THE CONTEXT OF AUTOCHTONOUS WINE PRODUCTION, SimpBTH2009 “New Research in Biotechnology”, Bucuresti, 19-20 noiembrie 2009 • ANA-MARIA NICOLAE, GETUTA NICOLAE, ELENA BRINDUSE, FLORENTINA MATEI - COMPARISON BETWEEN CLASSICAL IDENTIFICATION METHODS FOR YEAST AND RAPID PHYSIOLOGICAL TESTS API 20-C, SimpBTH2009 “New Research in Biotechnology”, Bucuresti, 19-20 noiembrie 2009 • GETUTA NICOLAE, ANA-MARIA NICOLAE, PETRE STELIAN, FLORENTINA MATEI, STEFANA JURCOANE - CONSERVATION METHODS USED FOR YEAST ISOLATED FROM VINEYARDS – LYOPHILISATION ADVANATGESSimpBTH2009 “New Research in Biotechnology”, Bucuresti, 19-20 noiembrie 2009

12. Exemple de postere prezentate in manifestari internationale