mikroskopia i techniki wizualizacji n.
Download
Skip this Video
Loading SlideShow in 5 Seconds..
Mikroskopia i techniki wizualizacji PowerPoint Presentation
Download Presentation
Mikroskopia i techniki wizualizacji

Loading in 2 Seconds...

play fullscreen
1 / 39

Mikroskopia i techniki wizualizacji - PowerPoint PPT Presentation


  • 259 Views
  • Uploaded on

Mikroskopia i techniki wizualizacji. Milena Damulewicz Zakład Cytologii i Histologii Uniwersytet Jagielloński. http://www.microscopy.fsu.edu/primer/java/wavebasics/index.html. http://www.microscopy.fsu.edu/primer/java/lenses/converginglenses/index.html

loader
I am the owner, or an agent authorized to act on behalf of the owner, of the copyrighted work described.
capcha
Download Presentation

PowerPoint Slideshow about 'Mikroskopia i techniki wizualizacji' - ronia


An Image/Link below is provided (as is) to download presentation

Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author.While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server.


- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - E N D - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -
Presentation Transcript
mikroskopia i techniki wizualizacji

Mikroskopia i techniki wizualizacji

Milena Damulewicz

Zakład Cytologii i Histologii

Uniwersytet Jagielloński

slide2

http://www.microscopy.fsu.edu/primer/java/wavebasics/index.htmlhttp://www.microscopy.fsu.edu/primer/java/wavebasics/index.html

slide5

http://www.microscopy.fsu.edu/primer/java/lenses/converginglenses/index.htmlhttp://www.microscopy.fsu.edu/primer/java/lenses/converginglenses/index.html

http://www.microscopy.fsu.edu/primer/java/lenses/diverginglenses/index.html

slide9

ABERRACJA SFERYCZNA

Wiązki światła symetryczne względem osi optycznej i różnie od niej oddalone, po przejściuprzez układ nie przecinają się w jednym punkcie

http://www.microscopy.fsu.edu/primer/java/aberrations/spherical/index.html

slide10

ABERRACJA CHROMATYCZNA

Wada soczewkowych układów optycznych spowodowana zależnością współczynnika załamaniaświatła materiału soczewek od długości fali świetlnej; przejawia sięw powstawaniu na obrazie barwnych obwódekwskutek rozszczepienia światła przy załamaniu w materiale soczewki.

http://www.microscopy.fsu.edu/primer/java/aberrations/chromatic/index.html

slide11

KOMA

Wiązka promieni świetlnych, wychodząca z punktu położonego poza osią optyczną, tworzy po przejściu przez układ plamkę w kształcie przecinka; ujawnia się tym bardziej, im dalej punkt leży od osi.

http://www.microscopy.fsu.edu/primer/java/aberrations/coma/index.html

slide12

Astygmatyzm

Obraz punktu położonego poza osią optyczną układu nie tworzy punktu, lecz dwie linie

ogniskowe, z których jedna leży w płaszczyźnie padania, obejmującej oś soczewkii przedmiotpunktowy, a druga jest do tej płaszczyzny prostopadła.

http://www.microscopy.fsu.edu/primer/java/aberrations/astigmatism/index.html

slide13

http://www.microscopy.fsu.edu/primer/java/microscopy/transmitted/index.html

http://www.microscopy.fsu.edu/primer/java/kohler/condenseraperture/index.html

slide16

Zdolność rozdzielcza mikroskopu

0,61 l

L =

NA

NA = n sinm

slide19

Powiększenie mikroskopu

L

D

M =

f1

f2

L – mechaniczna długość tubusa

D – odległość dobrego widzenia (250 mm)

f1 – ogniskowa obiektywu

f2 – ogniskowa okularu

typy mikroskop w
Typy mikroskopów
  • Mikroskop świetlny
    • Jasnego pola
    • Ciemnego pola
    • Kontrastu fazowego
    • Interferencyjny
    • Polaryzacyjny
  • Fluorescencyjny
  • Elektronowy
    • Skaningowy
    • transmisyjny
  • Konfokalny
mikroskop interferencyjny
Mikroskop interferencyjny
  • Kontrast Nomarskiego
  • Analiza ilościowa suchej masy
  • Określenie grubości skrawków
  • Optyczne „wybarwienie”
  • Plastyczny obraz
mikroskop fluorescencyjny
Mikroskop fluorescencyjny
  • Filtr wzbudzenia
  • Filtr absorbujący
  • Filtr barierowy
metody wizualizacji
Metody wizualizacji
  • Barwienie przyżyciowe
  • Barwienie histologiczne
  • Barwienie histochemiczne
  • Barwienie immunohistochemiczne
  • Barwienie fluorescencyjne
  • Barwienie immunofluorescencyjne
  • Barwienie radioimmunoizotopowe
  • Barwienie enzymatyczne
  • GFP
przygotowanie materia u
Preparaty parafinowe

Utrwalenie tkanek – formalina

Odwodnienie

Przepojenie

Zatopienie w parafinie

Skrawanie

Odparafinowanie

Nawodnienie

barwienie

Preparaty mrożeniowe

Krioprotekcja

Utrwalenie w ciekłym azocie

Skrawanie

barwienie

Przygotowanie materiału
barwienie histologiczne
Kontrastowanie struktur komórkowych

Hematoksylina + eozyna

fiolet krystaliczny

Barwienie histologiczne
barwienie histochemiczne
Barwienie histochemiczne
  • Uwidocznienie określonych substancji w komórce
  • PAS = z odczynnikiem Schiffa – wykrywa cukry
barwienie immuno
Barwienie immuno-

Przeciwciało drugorzędowe

znacznik

Przeciwciało

Przeciwciało pierwszorzędowe

barwienie immunohistochemiczne
Barwienie immunohistochemiczne
  • Wykrywanie antygenów za pomocą znakowanych przeciwciał
barwienie radioimmunoizotopowe
Barwienie radioimmunoizotopowe
  • Tryt
  • Jod 125
  • Fosfor 32
  • Fosfor 33
  • Siarka35
  • Węgiel 14
barwienie enzymatyczne
Barwienie enzymatyczne
  • Peroksydaza chrzanowa
  • Alkaliczna fosfataza
barwienie fluorescencyjne
Barwienie fluorescencyjne
  • DiIC18 – błona komórkowa
  • Hoechst –DNA – niebieskie
  • DAPI
  • Oranż akrydyny – DNA zielone; RNA pomarańczowe
barwienie immunofluorescencyjne
Barwienie immunofluorescencyjne
  • FITC
  • Texas red
  • Cy3
  • rodamina
slide38
GFP

www.greenspine.ca/en/GFP_neuron.html

o wietlenie kohlera
Oświetlenie Kohlera
  • Kondensor przesuwamy pod stolik
  • Ustawiamy ostro widziany preparat
  • Zamykamy przesłonę polową i aperturową
  • Ustawiamy na środku plamkę światła
  • Ustawiamy ostre brzegi plamki
  • Rozszerzamy plamkę do granic pola widzenia
  • Ustawiamy włókna żarówki centralnie