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Cuarto de cultivo

Cuarto de cultivo. Bio 225 Técnicas de cultivo de tejidos. Equipos y materiales. Equipo Básico de un laboratorio de Cultivo Celular. Campana de flujo laminar Baño termostatizado Incubador CO 2 Autoclave. 5. Nevera y Congelador 6. Microscopio Invertido 7. Microcentrifuga

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Presentation Transcript

  1. Cuarto de cultivo Bio 225 Técnicas de cultivo de tejidos

  2. Equipos y materiales

  3. Equipo Básico de un laboratorio de Cultivo Celular • Campana de flujo laminar • Baño termostatizado • Incubador CO2 • Autoclave 5. Nevera y Congelador 6. Microscopio Invertido 7. Microcentrifuga 8. Depósito de Nitrógeno líquido

  4. Autoclave Cualquier recipiente, herramienta... Debe ser esterilizada

  5. Autoclave • El método más utilizado para esterilizar materiales es el autoclave (aproximadamente 121ºC, 1.0 bar, 15min).

  6. Cabina de flujo laminar

  7. Flujo laminar vertical, unidireccional • Área segura para trabajar con partículas y aerosoles submicrón • Aire pasa por filtro HEPA (High Efficiency ParticulateAir) • Class II, Type A/B3 • Class100 Federal Standard No. 209 partículas de 0.5 micron no exceda un conteo de 100 metros cúbico

  8. Cabina vertical

  9. Flujo de aire

  10. Cabina y flujo de aire

  11. BBF

  12. Tipos de Cabinas • Proteger al operario de agentes patógenos o contaminantes del interior de la cabina • Proteger el cultivo de patógenos o contaminantes externos o internos de la cabina • Proteger el medioambiente de patógenos o contaminantes del interior de la cabina

  13. Cabinas Según importancia de la protección de estos tres elementos se distinguen cabinas de clase I, II y III • Clase I: Protege al operario y al medioambiente (campanas de gases) • Clase II: Protegen al operario, el cultivo y el medioambiente • Clase III: Cabina de seguridad estanca para trabajo con agentes biológicos de alto riesgo

  14. Incubadora CO2

  15. Incubadora de CO2 Esto son equipos • que mantienen la temperatura, además poseen un sistema de inyección de CO2 generalmente entre 4-7%, y finalmente controlan la humedad ambiente. • El nivel de CO2 se ajusta para mantener equilibrio carbonato-bicarbonato del medio de cultivo.

  16. Incubador CO2 Atmósfera controlada con elevada humedad y tensión de CO2

  17. Incubadora CO2

  18. Incubadora -roller

  19. Roller - incubadora

  20. Microscopio Invertido

  21. Microscopio Invertido • Fuente de luz y condensador están sobre la platina . Apuntando hacia abajo • Los objetivos están debajo de la platina hacia arriba • Permite observar organismos o tejidos sin preparación previa • Las observaciones se hacen a través de diferentes recipientes con espesores y características ópticas variables • Los objetivos son adaptados para trabajar a largas distancias pero con magnificación limitada

  22. Microscopio invertido

  23. Microscopio invertido de fase

  24. Seguimiento del cultivo: viabilidad, multiplicación, contaminación. Control sobre cambios morfológicos (efectos de hormonas, de tratamientos con medicamentos, de iones, interacciones, etc.

  25. Tanque de nitrógeno líquido

  26. Tanques de criogenia

  27. Tanque de Nitrógeno líquido Congelación de líneas estables

  28. Contador de células

  29. Contador de células

  30. Micro Centrifuga Suspensiones celulares (lavados, concentrados, subcultivos)

  31. Centrifuga

  32. Metro de pH

  33. Pipeteador automático

  34. Filtro sellado

  35. Filtro para jeringuillas

  36. Botellas y Placas de Cultivo

  37. Botella de cultivo

  38. Laminilla de cultivo

  39. Puntos Importantes • Esterilidad • Asepsia • Hábito de trabajo

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