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第十章 生物氧化 ( biological oxidation ). 主讲老师:华南师范大学生命科学学院 陈文利. 生物氧化 Biological oxidation 的特点: (与体外燃烧相比) (1) 要求温和的环境条件, pH 近中性; (2) 由酶催化逐步进行的; (3) 放出的能量有相当一部分转换为 ATP 分子中的能量。. 第一节 生物能学的基本概念. 生物氧化的概念 (广义) 有机物在生物细胞里氧化分解为 CO 2 和 H 2 O ,并释放出能量的过程叫 生物氧化 。 因为要生成 CO 2 ,所以要 ①脱羧 - CO 2
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第十章 生物氧化 (biological oxidation) 主讲老师:华南师范大学生命科学学院 陈文利
生物氧化Biological oxidation的特点: (与体外燃烧相比) (1)要求温和的环境条件,pH近中性; (2)由酶催化逐步进行的; (3) 放出的能量有相当一部分转换为ATP 分子中的能量。
生物氧化的概念 (广义)有机物在生物细胞里氧化分解为CO2 和H2O,并释放出能量的过程叫生物氧化。 因为要生成CO2,所以要 ①脱羧-CO2 直接脱羧 氧化脱羧(脱羧过程中伴随着氧化(脱氢)反应 要生成H2O,所以要 ②脱氢-NADH+H+FADH2 ③呼吸链电子传递 使电子传给O2生成H2O ④ADP磷酸化ATP (狭义)生物氧化:包括①、 ② 、③、④
1878年,Josiah Willard Gibbs提出关于自由能的公式。△G为在恒压和恒温下发生变化的体系的自由能的变化。反应的自由能变化(△G)是反应能否自发进行的重要标准。 △G<0,反应才能自发进行; △G=0,体系处于平衡,不能发生净变化; △G>0,反应不能自发进行,需要输入自由能以推动这样的反应。
四. 生物化学中能量变化的一些规定 P262
六. 高能生物分子 高能化合物 高能磷酸化合物
高能化合物的概念 (high-energy 或energy-rich compound) 在生化反应中,某些化合物发生水解(或基 团的转移反应)可以释放出大量的自由能来, ΔG0′一定是负值。 Δ G0′>5000cal/mol(20.92kJ/mol),这样一类化合物就称为高能化合物。P222 含磷酸基团的这类化合物叫高能磷酸化合物。 (High-energy phosphate compound)
最重要的高能化合物――ATP (adenosine triphosphate) ATP作用: ①在生命活动中,直接用来做功 ( 化学功、渗透功-物质跨膜的转移, 主动运输中需ATP、机械功) ②作为能量转换中的中间载体(桥梁)
生物体内高能磷酸化合物ATP的生成主要由三种方式:生物体内高能磷酸化合物ATP的生成主要由三种方式: • 氧化磷酸化 • 底物水平磷酸化 • 光合磷酸化
底物水平磷酸化指ATP的形成直接与一个代谢中间物(PEP)上的磷酸基团转移相偶联的作用。底物水平磷酸化指ATP的形成直接与一个代谢中间物(PEP)上的磷酸基团转移相偶联的作用。 1、底物水平磷酸化 特点:ATP的形成直接与中间代谢物进行的反应相偶联;在有 O2或无O2条件下均可发生底物水平的磷酸化。
(1)氧化磷酸化(oxidative phosphorylation) 定义:生物体通过生物氧化所产生的能量,除 一部分用以维持体温外,大部分可以通过磷酸 化作用转移至高能磷酸化合物ATP中。此种伴 随放能的氧化作用而进行的磷酸化称为 氧化磷酸化作用。 (2) 底物水平的磷酸化 高能磷酸化合物作为酶的底物,这些底 物在酶的催化下,用这些底物的能量使ADP 磷酸化生成ATP的过程叫底物水平的磷酸化。
2、氧化磷酸化 • 是与电子传递过程偶联的磷酸化过程。即伴随电 子从底物到O2的传递,ADP被磷酸化生成ATP的酶促过程,这种氧化与磷酸化相偶联的作用称为氧化磷酸化。 • 这是需氧生物合成ATP的主要途径。 • 真核生物的电子传递和氧化磷酸化均在线粒体内膜上进行。原核生物则在质膜上进行。
第二节 电子传递与氧化磷酸化 • 一、生物体电子传递的方式与电子载体 • 电子传递的几种方式 • 电子载体 • NAD+ NADP+ FAD FMN CoQ • 铁硫蛋白 细胞色素类
二、呼吸链(respiratory chain)及其组成 在生物氧化中,代谢脱下的H,经过一系列按一定顺序的氢-电子传递体系传给分子氧,这一系列的氢-电子传递体系叫电子传递链。(electron transport chain)
呼吸链的组成和电子传递顺序 MH2→NAD(NADP)→FMN(FAD)→Fe-S→CoQ→Cyt→O2 Succinate FAD Fumarate
2.呼吸链的组成 (1) NADH-Q还原酶 P268 黄素蛋白(flavo protein) 以FAD(黄素腺嘌呤二核苷酸)、FMN(黄素单核苷酸)为辅基的一类化合物。
Fe3+ + e Fe2+ 铁硫蛋白类
辅酶Q类 (coenzyme Q, CoQ) 又称泛醌(Ubiquinone,UQ)(不是蛋白质,是一个脂溶性的,存在于mt内膜) P269
(3)细胞色素(cytochrome,Cyt)bc1复合物 (细胞色素还原酶、复合体Ⅲ、辅酶Q-细胞色素C还原酶) 是一类以铁卟啉为辅基的蛋白质
细胞色素(cytochrome,cyt) • 细胞色素是以铁卟啉(血红素)为辅基的电子传递蛋白质(有颜色,红色或褐色)的总称。几乎存在于所有的生物体内。高等动物线粒体呼吸链中主要含有5种细胞色素a、a3、 b、 c 、c1等,细胞色素b的辅基是铁-原卟啉Ⅳ(也叫b型血红素),细胞色素c 、c1的辅基是c型血红素,细胞色素a、a3的辅基为血红素A。 • 细胞色素主要是通过辅基中Fe3+ Fe2+的互变起传递电子的作用。一个细胞色素每次传递一个电子。
细胞色素c • 起着在复合体III和Ⅳ之间传递电子的作用。(细胞色素c 交互地与细胞色素还原酶的C1和细胞色素氧化酶接触) • 是唯一能溶于水的细胞色素。由一条多肽链组成,含104个氨基酸残基,分子量13000。
(4)细胞色素c氧化酶 (复合体Ⅳ、细胞色素氧化酶)
是嵌在线粒体内膜的跨膜蛋白。其辅基包括两个血红素 cyt.a和a3组成及2个铜原子(CuA,CuB)。构成4个氧化-还原活性中心。 • Cyta与CuA相配合,cyta3与CuB相配合,当电子传递时,细胞色素的Fe3+ Fe2+间循环,同时Cu2+ Cu+间循环,将电子从cytc直接传递给O2。 O2是最终的电子受体。 • 细胞色素氧化酶也叫末端氧化酶。
细胞色素氧化酶(10个亚基的多聚蛋白) 血红素a位于亚基Ⅱ上,与CuA接近,形成血红素a- CuA聚簇,血红素a3位于亚基Ⅰ上,与CuB接近,形成血红素a3-CuB聚簇。
Fe3+ + e Fe2+ Fe-S Cytb Cytc1→Cytc→Cyta→Cyta3→O2 细胞色素类(cytochromes) Cyt是一类以铁卟啉为辅基的蛋白质
Complex I NADH Coenzyme Q reductase Accepts e- from NADH NADH can only participate in 2 e- transfer reactions 2 cofactors 1 FMN 6-7 Fe-S centers 2e-transferred 4 protons pumped
Complex II Succinate Coenzyme Q oxidoreductase succinate dehydrogenase. Has FAD and Fe-S cofactors as electron carriers, also cytochrome b. Succinate fumarate FADH2 FAD Q QH2 No ATP is generated, but it gets electrons from FADH2 into the ETC.
Complex III Coenzyme Q- Cytochrome c oxidoreductase Cytochrome bc1 complex Fe-S centre cytochromes Electron carriers Cytochrome b Cytochrome c1 Can only participate in single e- transfers
Complex IV Cytochrome c oxidase Four redox centers Cytochrome a Cytochrome a3 A pair of copper atoms: the CuA centre A copper atom: CuB
2、呼吸链中传递体排列顺序的确定 呼吸链中氢和电子的传递是有着严格的顺序 和方向的。这些顺序和方向,是根据各种电 子传递标准氧化还原电位(Eo’)的数值测定。
(2)电子传递抑制剂 能够阻断呼吸链中某一部位电子传递的物质称电子传递抑制剂。 a)鱼藤酮(rotenone) 作用:阻断电子由NADH向CoQ的传递。 鱼藤酮是一种极毒的植物物质,常用作 重要的杀虫剂 b)抗霉素A(antimycinA) 作用:抑制电子从细胞色素b到细胞色素C1传 递的作用。 c)氰化物、叠氮化物、一氧化碳 作用:有阻断电子由Cytaa3传至氧的作用。
三、氧化磷酸化作用 • 是与电子传递过程偶联的磷酸化过程。即伴随电 子从底物到O2的传递,ADP被磷酸化生成ATP的酶促过程,这种氧化与磷酸化相偶联的作用称为氧化磷酸化。 • 这是需氧生物合成ATP的主要途径。 • 真核生物的电子传递和氧化磷酸化均在线粒体内膜上进行。原核生物则在质膜上进行。
1. 氧化磷酸化的作用机制 三个假说: 化学偶联假说(1953) Chemical coupling hypothesis 构象偶联假说(1956) Conformational coupling hypothesis 化学渗透学说(1961) Chemiosmotic hypothesis __只有它的实验证据比较多。
化学渗透假说 要点: (1)氢原子与电子在呼吸链上进行交替传递 (2)H+定向从膜内泵至膜外 形成膜内外[H+]梯度(pH)和跨膜 的电位梯度()质子千方百计地向膜 内渗透----质子的迁移力 质子迁移力就是ATP形成的动力。 (是合成ATP的能量形式。)