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Introducción a la Célula Microscopía

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Introducción a la Célula Microscopía. JA Cardé, PhD UPR-Aguadilla. Objetivos. Repasar las partes que componen el microscopio y sus funciones. Conocer los diferentes microscopios utilizados para estudiar la célula.

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introducci n a la c lula microscop a

Introducción a la CélulaMicroscopía

JA Cardé, PhD

UPR-Aguadilla

objetivos
Objetivos
  • Repasar las partes que componen el microscopio y sus funciones.
  • Conocer los diferentes microscopios utilizados para estudiar la célula.
  • Establecer la importancia que posee el uso del microscopio en el estudio de la célula a distintos niveles.
  • Practicar en el uso y manejor el correcto del microscopio.
terminolog a
Terminología
  • magnificación
  • resolución
  • apertura numérica
  • índice de refracción
  • inversión
  • profundidad
  • contraste
  • parfocal
resoluci n
Resolución

= 0.6 x largo de onda ____________________ Apertura Numérica (NA)

01 06 what can we see jpg
01_06_What can we see.jpg

Resolución: distancia mínima entre dos puntos a la que son distinguidos como dos puntos

Cuál microscopio tendrá una mejor resolucion: uno con 200nm o uno con 0.2 nm?

tipos de microscopios
Tipos de Microscopios
  • Tipo Uso / Imagen
  • campo brillante : tejido, células, microorganismos vivos o fijos. Imagen: gris o negro con fondo blanco. Comunes, baja resolución
  • campo oscuro : especímenes sin tinción. Imagen: fondo oscuro imagen brillante
  • invertidos: morfología de cultivos vivos, Imagen: gris cultivo de tejido
  • contraste de fase: especímenes vivos, no tinción, Imagen: grises;
slide12
-1000X
  • r: 0.2um
  • 3 factores
  • luz enfocada por condensador
  • buena preparación para que la luz pase
  • conjunto de lentes y buen enfoque
tipos de microscopios1
Tipos de Microscopios
  • Tipo Uso / Imagen
  • fluorescencia: estructuras discretas, fluorocromos, UV
  • confocal: organelos, citoesqueleto, macromoleculas, laser, imagen fluorescente, alta resolución
  • TEM: estructuras internas celulares, imagen blanco/negro 2D, alta resolución
  • SEM: estructuras externas, image, 3D, alta resolución
01 27 cytoskeleton jpg
01_27_cytoskeleton.jpg

Citoesqueleto

  • -Unico de eucariotas
  • Actina, tubulina
  • Dirigen y Guian los Movimientos celulares
01 28 microtubules jpg
01_28_Microtubules.jpg

- Abonan al concepto de un citop dinamico!!

slide40
Ocular

Cuerpo tubular

Brazo

Revolver

Pinzas

Objetivos

Carro mecanico

Laminilla

Platina

Macro

Condensador/Diafragma

Lampara

Micro

Nivel

Base

visualizaci n c lula
Visualización Célula

Microscopios

Laminillas

Cubreobjetos

Cubeta o bandeja de tinción

Agujas

Pinzas

Escalpelo

Pinzas

Acetocarmín y Azul de metileno

Goteros

Cebolla

Palillos de dientes

Agua

protocolo
Protocolo
  • Separar una de las hojas internas de la cebolla y desprender la tenue membrana que está adherida por su cara inferior cóncava.
  • Depositar el fragmento de membrana en una laminilla con unas gotas de agua. Pon el porta sobre bandeja de tinción para que caiga en ella el agua y los colorantes.
  • Escurrir el agua, añadir una gotas de Acetocarmín sobre la membrana y dejar actuar durante 5 minutos aproximadamente.
  • ¡No debe secarse la epidermis por falta de colorante o por evaporación del mismo!
protocolo1
Protocolo…
  • Con el cuentagotas bañar la epidermis con agua abundante hasta que no suelte colorante.
  • Colocar sobre la preparación un cubreobjetos evitando que se formen burbujas y llevarla al microscopio.
  • Observa la preparación a distintos aumentos, empezando por el más bajo. (10x y 40x)
  • Identifica las distintas células del tejido epidérmico y las de las hojas del bulbo de cebolla si estuviera disponible
cebolla nativa 150x
Cebolla nativa (150x)

Cebolla azul metilen (150x).

n cleo 600x
Núcleo (600x)

Retículo Endoplásmico (600x)

c lulas epiteliales bucales
Células Epiteliales Bucales
  • Raspa suavemente el interior de la mejilla con un palillo (siempre por la parte roma, procurando no cortarse).
  • Coloca la mucosa blanca que se obtiene en el portaobjetos, añade una gota de agua.
  • Realiza una extensión (frotis) deslizando el borde de un porta sobre el que tiene la muestra.
protocolo2
Protocolo…
  • Coloca el porta en la placa de Petri, añade unas gotas de colorante sobre la muestra y déjalo actuar durante cinco minutos.
  • Lava con cuidado el exceso de colorante y sécalo con un poco de papel de filtro.
  • Añade una gota de agua a la muestra.
  • Coloca el cubreobjeto apoyándolo por un lado y dejándolo caer para que no queden burbujas.
  • Observa la preparación al microscopio, utilizando varios objetivos, realiza un dibujo detallado de las células e indica el aumento del mismo.
resultados y discusi n
Resultados y Discusión
  • Prepara en tu libreta dibujos de las células sin tinción y con tinción en distintos aumentos.
  • Rotula e identifica las partes de la célula en los dibujos.
  • Busca en internet las estructuras principales de la célula con su nombre y función.
  • Compara y contrasta células animales con vegetales.
  • A que se podría deber que el núcleo adquiera mas intensidad de color?
  • Que mas se observo ademas de células de mucosa bucal?
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