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红细胞稀有血型 2013-08-27. 朱自严. 稀有血型的定义. 当一个人的血型需要在一千个人中找到一个与他一样的血型时,我们把这个人的血型称为稀有血型 稀有血型与其他血型一样不会对你产生任何的问题除非你需要输血. 各国对稀有血型的定义. 德国 1/1000 法国 4/1000 以色列 1/200 中国香港 1/600 中国 1/1000. 美国 1/1000 英国 1/200 荷兰 1/100
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稀有血型的定义 • 当一个人的血型需要在一千个人中找到一个与他一样的血型时,我们把这个人的血型称为稀有血型 • 稀有血型与其他血型一样不会对你产生任何的问题除非你需要输血
各国对稀有血型的定义 • 德国 1/1000 • 法国 4/1000 • 以色列 1/200 • 中国香港 1/600 • 中国 1/1000 • 美国 1/1000 • 英国 1/200 • 荷兰 1/100 • 日本 1/100~1000 • 巴西 1/1000
最具临床价值的稀有血型 • 高频率组抗原 • 具特定表型组合的血型抗原 • 血型系统的无标志细胞 Rh null ,Oh • 同时缺失几个免疫原性很强的血型抗原 E- M- JKa- • 缺失某一血型系中一组或大部分血型抗原 D--,D..
您是与众不同的,也许您的血也是 You're one in a million. Maybe your blood is too. • 稀有血型筛选 • 中国稀有血型库 • 寻找稀有血型--难!
稀有血型库 CLB 2000 Osaka 1000 New York 30000 Bristol 4000
稀有血型筛选项目 • 2008 年开始 • 目前共有十三个省市血液中心参加 • 共筛选献血员140万人次 • 筛选的民族包括 汉族、回族、壮族、蒙古族、维吾尔族、侗族、塔吉克族、土族、僳僳族、怒族 • 共获得各类稀有血型献血员1300多名
中国大规模筛选稀有血型项目 • Large-scale screening by serological methods
稀有血型筛选方法 • 微量板改良IAT试验 • 尿素筛选试验 • 分子生物学筛选试验
Mab for Rare Blood Anti-Rh17 Anti-GPA Anti-GPC Anti-Wrb Anti-Kell Anti-I Anti-Lu Anti-Tn Anti-Kpb Anti-H Mab and Poly-ab Anti-Mur Anti-Dia Anti-Dib Anti-Lan Anti-PP1Pk(Tja) Anti-Coa 用于筛选的稀有抗血清
稀有血型等位基因对照品的制备 • 定点诱变技术(SDM)制备稀有血型等位基因对照品
中国的Ko • 2 Ko out of 87,665 random donors from Shanghai. T insertion exon 3 nt185 T insertion (GenBank accession number,EF208900) Stop at 218 G 715T exon 7 nt715 GAA→TAA mutation (GenBank accession number EF208901) Stop No G715T mutation have been found in 100 donors
在中国发现的Rh null RhD CD47 GPA Wrb S Liu Y. Neg-71% +12% +16% Neg Liu B Neg-70% +4% +25% Neg
GPA突变导致Wrb不表达 • Band 3 exon16 Glu658 Wr(a-b+) • GYP A-B ; GP.Hil (MiV) • exon (1-3)GYPA • exon(4-6) GYPB • 新突变271 G>C (exon 4)
在献血员中筛选IgA缺乏的血浆 • 筛查22609人 • IgA含量≤0.05mg/dl的共7人(完全缺乏) • 0.05mg/dl<IgA含量≤0.5mg/dl的共7人(相对缺乏) • ELISA使用羊抗人IgA • 卡式凝胶使用DiaMed
血型基因诊断 • 是趋势, 好处:可解决血清学疑难问题 • 亚型、变异型 • 获得性血型 • 移植 • 胎儿血型预判 • 法医学 …… • 但目前常规应用很难 主要问题: • 人种之间的不同基因多态性 • 基因与蛋白表达上的差异
基因与蛋白表达上的差异 • 红细胞血型中,有较多存在血型基因,但抗原不表达的现象。如DEL、K0、Rh杂交基因 • 相同的抗原表达可能具有不同的基因背景。如弱D、不完全D • 有些血型抗原由多个基因座控制或修饰,如调节型Rhnull、(in)Lu。
欧盟的血型检测基因蕊片项目 • BloodGen (http://www.bloodgen.com) • 2003/09-2006/08; • Bristol英国、Ulm德国、Sanquin荷兰、Lund瑞典、Barcelona西班牙、UHKT捷克、Progenika公司(西班牙)、Biotest公司(德国) • 检测104个SNP,集中在三个MPX PCR,
MPX-PCR ABO,RHD 15个产物片段 GYPA,GYPB,RHCE,DO,JK,KEL,FY,DI20个产物片段
微矩阵分析 • PCR产物与探计(Cy Dyes)杂交 • 扫描(array scanner)蕊片 • 数据(荧光强度)分析
设备 PCR 杂交站 扫描仪
免疫血液学的研究方法 • 只有标准的操作步骤,没有通用的、唯一的方法 • 各种抗原和抗体都有自己的特性,需选用合适的方法进行测定