UNIVERSIDAD NACIONAL DE CÓRDOBA-CONICET

1. REUNIÓN JUECES DE FALTA PCIA. DE CÓRDOBA. PLAGUICIDAS EN RECURSOS HÍDRICOS. SITUACIÓN EN LA CUENCA DEL RÍO SUQUÍA (Pcia. de Córdoba) Daniel A. Wunderlin, María de los Ángeles Bistoni1, Silvia F. Pesce, María L. Ballesteros1 Presentado por: Prof. Dr. Daniel A. Wunderlin UNIVERSIDAD NACIONAL DE CÓRDOBA-CONICET Facultad de Ciencias Químicas, Dto. Bioquímica Clínica- CIBICI. 1_ Facultad Ciencias Exactas, Físicas y Naturales.

2. CÓRDOBA EN GOOGLE EARTH. AREA DE ESTUDIO

3. AREA DE ESTUDIO Sudamérica Argentina Córdoba Río Suquía Lago San Roque Dique Córdoba

4. EDAR Bajo Grande Use of Water Quality Indices to verify the impact of Córdoba City (Argentina) on Suquía River ". Pesce, S.F. and Wunderlin, D.A.Water Res. (2000) 34, 2915-2926.

5. CUENCA DEL RÍO SUQUÍA: Contaminantes Orgánicos y Toxinas Bencenos clorados Lindano (HCH) Hidrocarburos y Tensioáctivos Microcistinas

6. Intestine Corydoras paleatus Jenynsia multidentata Odontesthes bonariensis MC-RR Hígado Branquias Músculo Músculo! PARTE COMESTIBLE DEL PEZ. Jenynsia multidentata (Pisces, Anablepidae) Corydoras paleatus (Pisces, Callichthyidae) Odontesthes bonariensis (Pisces, Atherinidae) Muscle Intestine Muscle 5.0% 9.0% 0.2% Brain Muscle Gill traces 21% 6.0% Gill 24.4% Gill 12% Liver 67% Liver Liver 70.6% 84.8% Acumulación de Microcistina en Peces Expuestos: Brain Uptake, Tissue Distribution and Accumulation of Microcystin-RR in Corydoras paleatus, Jenynsia multidentata and Odontesthes bonariensis. A Field and Laboratory Study. Cazenave J., Wunderlin D.A., Bistoni M.A., Amé M.V., Wiegand C., Krause E. and S. Pflugmacher. Aquat. Toxicol. 75:178-190 (2005).

7. Hígado Algas Branquias 0,18 40 Músculo Agua 0,4 30 -1 µg·L bloom liofilizado 0,09 20 0,2 Odontesthes bonariensis (Pisces, Atherinidae) FW -1 -1 µg·g µg·g 10 ND 0,0 0 0,00 Dry Season Wet Season • MC-RR en músculo (Est. lluvia): • Min.: 0,02 µg·g -1 • Max.: 0.34 µg·g -1 • Mean: 0.13 µg·g -1 MC-RR en Agua, Algas y Tejidos de Pejerrey (Odontesthes bonariensis) del Lago San Roque. 100 g Músculo ~ 14-VECES WHO-DIA • WHO-DIA: 0.04 µg·Kg-1·day-1 • (= 2.4 µg MC en adultos de 60 Kg)

8. A C B ¿Qué compuestos organoclorados hay en la cuenca?

9. EXPUESTOS A LINDANO Diseño de los ensayos de exposición con Lindano. • Concentraciones subletales (CL50 118 g.L-1 ). • Condiciones del laboratorio (temperatura: 21±1 oC; fotoperíodo 12:12 h., luz:oscuridad). • Exposición por 24 h. a 6 – 12,5 – 25 – 50 - 75 g.L-1 de lindano (debajo del límite de solubilidad). CONTROLES Después de la exposición se analizan diversos biomarcadores

10. Corydoras paleatus (Pisces, Callichthyidae) Glutation-S-transferasa Jenynsia multidentata Glutation-S-transferasa Corydoras paleatus Distinta sensibilidad al tóxico para distintos peces y distintos órganos de un mismo pez.

11. B C.paleatus Corydoras paleatus (Pisces, Callichthyidae) C.paleatus Effecto de Lindano sobre Peces Nativos I: Bioacumulación aprox. Constante en el rango ensayado.

12. Jenynsia multidentata (Pisces, Anablepidae) J.multidentata J.multidentata Efecto de Lindano sobre peces nativos II: Aumenta la bioacumulación al inhibirse la biotransformación. Integrated Survey on Toxic Effects of Lindane on Neotropical Fish: Corydoras paleatus and Jenynsia multidentata. Pesce S.F., Cazenave J., Monferrán M.V., Frede S. and Wunderlin D.A.Environ. Pollut. 156, 775-783 (2008).

13. Efectos de Endosulfan sobre peces: Oxidative stress responses in different organs of Jenynsiamultidentata exposed to Endosulfan. Ballesteros M.L., Wunderlin D.A. and Bistoni, M.A. Ecotox. Environ. Safety 72(1), 199-205 (2009). ¿Cambios Conductuales? ¿Bioacumulación?

14. Endosulfan en Laguna Mar Chiquita (Cba.): En época de aplicación el nivel de Endosulfan Sulfato (ES) en agua supera Niveles Guía Protección Biota Acuática. Mar. May. Set.

15. Odontesthes bonariensis (Pisces, Atherinidae) Endosulfan en Pejerreyes de la Laguna Mar Chiquita (Cba.): Endosulfan α+β y ES se acumulan en hígado y músculo de pejerrey aún en post-aplicación. El consumo de peces contaminados alcanza al hombre!

16. Endosulfan Afecta la Natación en Peces! Endosulfan (1,4 µg/L ) causa disminución significativa de la velocidad de natación luego de 24h de exposición. Endosulfan Induces Changes in Swimming Motility and Acetylcholinesterase Activities of Jenynsia multidentata (Anablepidae, Cyprinodontiformes). Ballesteros, M.L., Durando, P.E., Nores, M.L., Díaz, M.P., Bistoni, M.A and Wunderlin, D.A.Environ. Pollut.(2009, en prensa).

17. Algunas CONCLUSIONES y sugerencias a partir del estudio integrado de la contaminación del Suquía: • El uso de plantas, peces y microorganismos que actuén como centinelas de contaminación puede mejorar nuestro nivel de alerta, permitiéndonos entender las consecuencias sobre humanos de la contaminación del agua. • El uso de especies nativas como bioindicadores es muy importante ya que los mismos están adaptados a este hábitat y en algunos casos son muy sensibles a mínimos procesos de contaminación. • Es muy importante promover el estudio de biomarcadores apropiados de contaminación que provean con sistemas de alerta temprano ante eventos de volcamiento de contaminantes en cursos de agua, evitando que estos alcancen al hombre.

18. Algunas conclusiones y sugerencias a partir del estudio integrado de la contaminación del Suquía: • En nuestro caso C. paleatus es un bioindicador más sensible que J. multidentata para el análisis de biomarcadores de exposición (GST, LPO, GPx, LPO, etc.). • La inhibición de los sistemas de detoxificación en peces (e.g. GST) conlleva un aumento en la tasa de bioacumulación, aumentando el riesgo para humanos que los consuman. • La contaminación con lindano y endosulfan afecta la capacidad natatoria de peces, constituyendo un biomarcador interesante para evaluar contaminación en recursos hídricos. • En nuestra experiencia el uso de varios bioindicadores y distintos biomarcadores asegura mas posibilidades de detección temprana de contaminantes en sistemas acuáticos.

19. AGRADECIMIENTOS • FONCyT, CONICET, Universidad Nacional de Córdoba: Subsidios, becas, etc. • Al Dr. Moreno, su esposa y la Dras. Miglioranza, Menone y Gerpe de UNMDP por su inestimable ayuda en nuestro trabajo. • ATA, SETAC-AR y la Comisión Organizadora por su gentil invitación a participar en esta mesa.

21. GRACIAS POR SU ATENCIÓN Dr. Daniel A. Wunderlin dwunder@fcq.unc.edu.ar

22. FILMACIÓN DE IMÁGENES DE PECES (Prototipo).

23. SISTEMA DE CAPTACIÓN Y ANÁLISIS DE IMÁGENES ASISTIDO POR COMPUTADO-RA. Obtención del movimiento del pez en tiempo real mediante adquisición de características y conversión a imagen binaria Seguimiento del pez Imagen binaria

24. Diseño de los ensayos de comportamiento con lindano: • Especie utilizada: C. paleatus • Concentraciones de exposición: 1 y 6 µg·L-1. • Tiempo de exposición: 24 h. • Ensayo por individuo • Tiempo de filmación: 10´ por hora. Medidas del comportamiento • Velocidad promedio (cm/s) • Porcentaje de movimiento • Proporción de tiempo que está arriba, en el medio y el fondo de la pecera Análisis estadístico • Enfoque de ecuaciones de estimación generalizadas (GEE) y SPLINE.

26. Corydoras paleatus (Pisces, Callichthyidae) Dia Noche Dia

27. Jenynsia multidentata (Pisces, Anablepidae) Estrés Oxidativo Inducido por Lindano: