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Objectifs

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Objectifs

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  1. Réalisation d’une Structure animalière protégée à l’Institut Pasteur pour la production et l’expérimentation sur animaux standardisés Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet 24 - 25 mai 2007

  2. Objectifs • Production reproductive des animaux: Fournir des animaux standardisés • Expérimentation: avoir les conditions pour la réalisation de l’expérimentation dans les conditions requises pour le type de manipulation souhaitée. Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet 24 - 25 mai 2007

  3. Référentiel normatif -1- • Directive 86-609-CEE ( 24 novembre 1986) relative à la protection des animaux utilisés à des fins expérimentales ou à d’autres fins scientifiques:assurer aux animaux des soins adéquats et empêcher les douleurs ou souffrances inutiles Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet 24 - 25 mai 2007

  4. Soins prodigués aux animaux • Conditions de vie hygiéniques; • Limiter au maximum les restrictions apportées au comportement des animaux. • Conditions physiques de l’environnement contrôlées; • Le bien-être de l’animal doit faire l’objet d’une observation par une personne compétente afin d’éviter toute souffrance. Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet 24 - 25 mai 2007

  5. Référentiel normatif - 2- • Directive 2004-1-CEE: application des Bonnes Pratiques de Laboratoires telles que spécifiées par les directives de l’OCDE, traite de la conformité: • Des installations d’essais • Des modes opératoires normalisés Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet 24 - 25 mai 2007

  6. Référentiel normatif - 3 - • Directive 2000-54-CEE du 18 septembre 2000: protection des travailleurs contre les risques liés à des agents biologiques. • Classification des agents biologiques en fonction du danger qu’ils peuvent constituer pour le personnel et l’environnement, • Définition des niveaux de confinement Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet 24 - 25 mai 2007

  7. Animaux standardisés • Trois paramètres : Statut Génétique Statut Sanitaire Environnement Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet 24 - 25 mai 2007

  8. Définition • Animaux standardisés= animaux définis par rapport à: • Leur statut génétique, • Leur statut sanitaire, Maintenus dans un environnement contrôlé Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet 24 - 25 mai 2007

  9. Environnement contrôlé Environnement protégé par: • Une barrière physique: maîtrise des paramètres de l’ambiance; • Séparation des secteurs: sale, propre et technique; • Procédures opératoires normalisées (soins et manipulations) Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet 24 - 25 mai 2007

  10. Statut Génétique Dépend du système d’élevage: • Colonies non consanguines (panmictiques):génétiquement non définies sauf pour certains caractères = outbred (ex: souche SWISS); • Colonies consanguines:génétiquement définies; accouplement (FxS ) > 20 générations; gènes fixés à l’état homozygote= inbred ( ex: lignée Balb/C). Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet 24 - 25 mai 2007

  11. Statuts génétiques Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet 24 - 25 mai 2007

  12. Statuts sanitaires • AXENIQUE ou GERM FREE (= 0 microbe) Redérivation. • GNOTOXENIQUE: mono-,… (Gnotobiotique). • HETEROXENIQUE(agnotobio-tique): EOPS(SPF); SSC; SOPF. • HOLXENIQUE: Conventionnel Néoholoxénique: conventionnalisé Élevage en isolateur Élevage sous Barrière Animalerie conventionnelle Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet 24 - 25 mai 2007

  13. Exempts d’Organismes Pathogènes Spécifiques Synonyme = IOPS (Indemnes OPS) Animaux EOPS • Bactéries : • Bordetella bronchiseptica • Pasteurella sp. • Salmonella • Streptobacillus moniliformis • Streptococci  hémolytiques(sauf groupe D) • Maladie de Tyzzer • Si lésions / signes cliniques : • Clostridium sp. • Dermatophytes • Escherichia coli ( + sérotype) • Klebsiella pneumoniae / oxytoca • Proteus sp. • Pseudomonas aeruginosa • Staphylococcus aureus • Treponema cuniculi (+ sérotype) • Yersinia pseudotuberculosis Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet 24 - 25 mai 2007

  14. Parasites : Arthropodes Helminthes Eimeria sp. Giardia sp. Spironucleus sp. Klosiella sp. Encephalitozoon cuniculi Toxoplasma gondii Trichosomoides crassicauda Virus: Sérologie ( tous les 3 mois) : Virus de la pneumonie de la souris (PVM) Virus de la maladie hémorragique du lapin (RHDV) Poxvirus du lapin (myxomatose) Rotavirus du lapin Virus Sendaï Virus simien 5 (SV 5) Animaux EOPS Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet 24 - 25 mai 2007

  15. Animaux standardisés + confinement • Quatre paramètres : Statut Génétique Statut Sanitaire confinement Environnement Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet 24 - 25 mai 2007

  16. Le niveau de confinement • La manipulation d’agents biologiques (virus, bactéries, parasites…) est la composante majeure de l’expérimentation animale. • L’évaluation du risque inhérent à la manipulation d’agents pathogènes a généré la même classification que pour les laboratoires de même ordre. Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet 24 - 25 mai 2007

  17. Le niveau de confinement • Cette classification a été étendue à la manipulation des Organismes Génétiquement Modifiés = OGM • À chaque niveau de risque correspond un niveau de confinement: Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet 24 - 25 mai 2007

  18. Correspondance Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet 24 - 25 mai 2007

  19. Définitions Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet 24 - 25 mai 2007

  20. Caractéristiques du projet Création d’une animalerie répondant aux standards internationaux avec: • Une zone de production: élevages reproducteurs d’animaux standardisés; • Une zone d’expérimentation:boxes individualisés comportant une aire de manipulation et une aire de stabulation Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet 24 - 25 mai 2007

  21. Principes généraux 1- Séparation des types d’activité: REPRODUCTION / EXPERIMENTATION 2- Séparation des espèces , des souches et des lignées 3-Etage technique accessible de l’extérieur Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet 24 - 25 mai 2007

  22. Etage technique Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet 24 - 25 mai 2007

  23. Zone de reproduction: Animalerie d’élevage pour animaux EOPS Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet 24 - 25 mai 2007

  24. Capacités de production escomptées Au démarrage: • Souris: 60 000 de diverses souches et colonies. • Rats: 3 000 Non consanguins • Cobayes: 2 000 • Hamsters: 1 000 syriens Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet 24 - 25 mai 2007

  25. Principaux éléments de la barrière: • Zone d’élevageisolée par une barrière de pressions positives • Accès réglementé • Matériel autoclavé, à l’entrée • Flux unidirectionnels • Séparation des zones " Sales / Propres" Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet 24 - 25 mai 2007

  26. Paramètres physiques Environnement: 6 salles d’élevage indépendantes, de 30 m2 chacune (ILAR*) • P° positives; • θ = 22 + 1°C; • H° = 55 + 5%; • Ventilation: 20 renouvellements horaires; • Filtres HEPA (H14) au niveau de chaque salle • Filtration de l’air à l’extraction :HEPA + Charbon * Institute For Laboratory Animals Research Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet 24 - 25 mai 2007

  27. Schéma de principe: gradient de pressions Couloir sale 0 SALE SALE PROPRE Élevage Élevage +2 +2 +4 Zône centrale propre +2 Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet 24 - 25 mai 2007

  28. Schéma de principe: les flux Couloir sale SALE SALE Élevage PROPRE Élevage Matériel stérile Arrivée animaux Zône centrale propre Arrivé personnel Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet 24 - 25 mai 2007

  29. zone d’expérimentation de niveau II Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet 24 - 25 mai 2007

  30. La Barrière et le confinement • Zone d’élevage isolée (pression positive) • Accès réglementé • Matériel autoclavé, stérilisé à l’entrée • Flux unidirectionnels • Séparation des zones " Sales / Propres"  • Confinement II Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet 24 - 25 mai 2007

  31. Structure d’un boxe d’expérimentation COULOIR SALE P R O P R E PSM II Stabulation SALE Paillasse Stabulation Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet 24 - 25 mai 2007

  32. Ventilation des boxes Air neuf Air viscié Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet 24 - 25 mai 2007

  33. Prestations à l’échelle du pays En 3 phases: • 2ème semestre 2008: fourniture d’animaux, • Année 2009: accueil d’expérimentateurs sur cahier de charge et établissement d’un devis, • Plus tard(?): réalisation d’études à façon. Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet 24 - 25 mai 2007

  34. Merci pour votre attention ..!.. Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet 24 - 25 mai 2007