350 likes | 447 Views
Fermentacions i fermentadors. ÍNDEX: Preparació d’inòculs. Cinètica del creixement bacterià. Disseny i tipus de fermentadors. Tipus de fermentacions: Discontinua o per càrregues. Discontinua alimentada. Continua. Sistemes de control. Escalat d’un procés: placa, matrau, fermentador.
E N D
Fermentacions i fermentadors ÍNDEX: Preparació d’inòculs. Cinètica del creixement bacterià. Disseny i tipus de fermentadors. Tipus de fermentacions: Discontinua o per càrregues. Discontinua alimentada. Continua. Sistemes de control. Escalat d’un procés: placa, matrau, fermentador. Recuperació i purificació de productes.
Preparació d’inòculs ÍNDEX: • Definició d’inòcul. • Cultius purs o axènics i cultius mixtes. • Definició d'esterilitat i la seva importància.
Cinètica del creixement bacterià ÍNDEX: • Determinació de cèl·lules viables (creixement actiu). • Absorbància. • Corba de viables. • Fases de creixement. • Creixement exponencial. • Importància del nombre de microorganismes.
Disseny i tipus de fermentadors ÍNDEX: • Parts d’un fermentador “típic”: • Recipient de fermentació. • Entrada i sortida de gasos. • Entrada d’inòculs, medis de cultiu i additius. • Sortida de mostres i productes. • Sistemes d’agitació, d’escalfament i refrigeració. • Sondes de mesures fisicoquímiques.
Filtre d’aire Sortida d’aire MOTOR Refrigerador SONDES Entrada d’aire Sonda de Temperatura Recol·lector de mostra Filtre d’aire Sonda de pH Sonda de pO2% PALETA TRENCADORA Sortida d’aigua Recipient Camisa d’aigua Sonda de escuma PALETES AGITADORES Sonda de nivell Entrada d’aigua AIREADOR
Disseny i tipus de fermentadors ÍNDEX: • “Classificació” dels fermentadors: • Fermentadors per a cultius líquids. • Fermentadors per a cultius en fase sòlida. • Fermentadors de cèl·lules immobilitzades.
Disseny i tipus de fermentadors ÍNDEX: • Fermentadors per a cultius líquids: • Fermentadors de laboratori. • Fermentadors d’escala pilot. • Fermentadors de producció. • Fenòmens de transport en medis líquids, reologia i número de Reynolds.
Disseny i tipus de fermentadorsFermentadors per a cultius líquids Fermentador de laboratori (2 a 15 litres) Fermentador escala pilot (30 a 100 litres) Fermentador de producció ( >100 litres)
Tipus de fermentacionsDiscontinua, alimentada i continua • Fermentació discontinua: • Preparació del fermentador • Inoculació • Fermentació • Recuperació del cultiu Substrat Producte Biomassa Temps
Tipus de fermentacionsDiscontinua, alimentada i continua • Fermentació alimentada: • Preparació del fermentador • Inoculació • Fermentació • Addició de substrat • Recuperació del cultiu Producte Biomassa Substrat Substrat Temps
Tipus de fermentacionsDiscontinua, alimentada i continua • CONTINUA: EL QUIMIOSTAT • Flux d’entrada = Flux de sortida • (volum constant) • Taxa de dilució > Taxa de creixement: Rentat del cultiu • Taxa de dilució < Taxa de creixement: • Sobrecreixement • Taxa de dilució = Taxa de creixement: Cultiu en estat d’equilibri Flux sortida Flux d’entrada Medi Recol·lecció de cultiu La taxa de flux s’ha de seleccionar per proporcionar un cultiu en estat d’equilibri i en fase de creixement (taxa de creixement = taxa de dilució)
Sistemes de control ÍNDEX: • Control de la temperatura. • Control de l’agitació. • Control del pH. • Control d’escumes. • Control de substrats.
Escalat d’un procés:Des del tub o la placa fins al fermentador ÍNDEX: • Importància de l’inòcul. • Avantatge econòmica. • Punts de control.
Escalat d’un procés:Línies de producció • Línia de producció: fermentadors funcionant de forma cooperativa. • El volum de inoculació és aproximadament 1:50 fins el 10% del volum total. 4500+500 PRODUCCIÓ 5.000 litres 4,5+0,5 LABORATORI 5 litres 45+5 PILOT 50 litres 450+50 PRODUCCIÓ 500 litres
Escalat d’un procés:Línies de producció Exemple: el rendiment d’un cultiu microbià s’atura a 108 CFU ml-1; ¿quina és la relació de temps entre l’obtenció d’aquest tipus de cultiu amb escalat i sense escalat (500L en 4500L o 0,5L en 4999,5L)?
Escalat d’un procés:Línies de producció front a processos únics Cost per producció En 1 mes s’aconsegueix 1 producció amb un cost de 400.000 En 1 mes s’aconsegueixen 4 produccions amb un cost de 444.400 L’escalat d’un procés és més econòmic
Recuperació i purificació de productes • Iniciació del creixement bacterià. • Ajustament de les condicions de màxima producció. • Concentració dels bacteris. • Obtenció de proteïnes, productes... • Purificació, conservació, esterilització per radiació... Línia de producció. Concentració Liofilització Esterilització.
Recuperant el producte:Sistemes de recuperació: centrifugadores i filtres ÍNDEX: • Centrifugació per lots. • Centrifugació contínua. • Filtració i ultrafiltració.
Recuperant el producte:Centrifugació per lots Centrifugació per lots: La centrifugació és un procés de separació que utilitza l'acció de la força centrífuga per a promoure l'acceleració de partícules en una mescla de sòlid-líquid. Dos fases clarament distintes es formen en el recipient durant la centri-fugació. La recuperació de cèl·lules es porta a terme amb la totalitat del cultiu.
Recuperant el producte:Centrifugació continuada ÍNDEX: • Centrifugadores tubulars. • Centrifugadores de discs. • Decantadors.
Recuperant el producte:Centrifugació continuada Centrifugadores tubulars: En un recipient cilíndric que gira a una velocitat angular w (rad/s) o N (rpm) i conté un anell de líquid d'un radi significatiu R (m), l'acceleració centrifuga FC a la que estan sotmeses les partícules és: FC = w2R = 0,011·N2R La força aplicable a cada partícula per unitat de pes ve expressada com: FC = 0,011·N2R (rs – rL) x 1·g-1 = G (rS – rL) On G = w2R·g-1 = 0,11·N2R / 9,81 = 11,2x10-4·N2R rS : densitat de la partícula rL : densitat del líquid intersticial
Recuperant el producte:Centrifugació continuada Centrifugadores tubulars: Hidrociclons Campana tubular
Recuperant el producte:Centrifugació continuada Centrifugadores tubulars: Càmares de centrifugació Campana de tambor
Recuperant el producte:Centrifugació continuada • Centrifugadores de discs: Relació entre la velocitat de rotació i la força centrífuga: La relació existent entre l’acceleració centrípeta i la velocitat de rotació (mesurada en rpm) de la centrifugadora és la següent: A on: g = acceleració centrípeta Rt= radi del tambor de la centrífuga rpmt = revolucions per minut del tambor (rpmt x 2 x x 60-1) representa la velocitat angular
Recuperant el producte:Centrifugació continuada • Centrifugadores de discs:
Recuperant el producte:Centrifugació continuada • Centrifugadores de discs:
Recuperant el producte:Centrifugació continuada • Decantadors:
Recuperant el producte:Filtració ÍNDEX: • Filtres de tambor. • Filtres de disc. • Filtres de premsa. • Filtres de borsa. • Filtres de cartutx.
Recuperant el producte:Filtració • Filtres de tambor:
Recuperant el producte:Filtració • Filtres de disc:
Recuperant el producte:Filtració • Filtres de premsa:
Recuperant el producte:Filtració • Filtres de borsa Filtres de cartutx