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Microbiología Aplicada Trabajo Práctico N°1

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Microbiología Aplicada Trabajo Práctico N°1. Estudios de la actividad antimicrobiana . Antecedentes históricos. Descubrimiento de los antibióticos…. Alexander Fleming (1928): Observó que el hongo Penicillium notatum impedía el crecimiento de Staphylococcus aureus

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microbiolog a aplicada trabajo pr ctico n 1

MicrobiologíaAplicadaTrabajo Práctico N°1

Estudios de la actividad antimicrobiana

slide2

Antecedentes históricos.Descubrimiento de los antibióticos…

Alexander Fleming (1928):

Observó que el hongo Penicillium notatum impedía el crecimiento de Staphylococcus aureus

Florey y Chain (1939): aislaronPenicilina G

Penicillium notatum

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Antecedentes históricos.Descubrimiento de los antibióticos…

Foto original tomada por Fleming

Foto actual

El hongo Penicillium notatum impide el crecimiento de Staphylococcus aureus

slide4

Antibióticos…

Antimicrobiano:

Sustancia capaz de actuar sobre los microorganismos, inhibiendo su crecimiento o destruyéndolos.

Antibiótico:

  • Sustancia producida por el metabolismo de organismos vivos,principalmente hongos microscópicos y bacterias, que posee la propiedad de inhibir el crecimiento o destruir microorganismos.
  • Según su origen, los antibióticos pueden ser:
    • Biológicos (naturales):sintetizados por organismos vivos, ej. Penicilina, Cloranfenicol.
    • Semisintéticos:obtenidos por modificación química de antibióticos naturales, ej. Ampicilina.
    • Sintéticos:generados mediante síntesis química, ej. Sulfas.
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Evaluación de la susceptibilidad a un antibiótico…

En el laboratorio se puede estudiar la susceptibilidad a antimicrobianos que presentan bacterias aisladas desde una muestra biológica...

La susceptibilidad a antimicrobianos, junto con la identidad de la bacteria aislada y ciertos factores del hospedero constituyen las bases para la elección de una terapia antimicrobiana adecuada…

slide6

Concentración inhibitoria mínima (CIM)

Corresponde a la menor concentración de antimicrobiano que inhibe el crecimiento bacteriano luego de 18 a 24 horas de incubación.

Concentración bactericida mínima (CBM )

Corresponde a la menor concentración capaz de matar un 99,9% la población bacteriana.

Definiciones…

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Antibiograma pordilución…

  • Técnica de referencia en la mayoría de los estudios clínicos de susceptibilidad a antimicrobianos.
  • Entrega un resultadocuantitativo, ya que permite determinar la concentración inhibitoria mínima(CIM).
  • Se puede realizar en medio líquido(dilución en caldo)o en medio sólido(dilución en agar).
  • Método complejo y de alto costo.

Lectura del CIM

CIM

Dilución seriada en caldo

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Antibiograma pordifusión…

“(Técnica de Kirby-Bauer)”

  • Es el método más usado…
  • Es práctico y sencillo de realizar e implementar…
  • Permite analizar un gran número de antibióticos al mismo tiempo y bajo las mismas condiciones…
  • Entrega un resultadocualitativo…(bacteria sensible o resistente)

Bauer AW, Kirby WM, Sherris JC, Turck M. Antibiotic susceptibility testing by a standardized single disk method. Am J Clin Pathol. 1966 Apr;45(4):493–496.

slide9

Antibiograma pordifusión…

“(Técnica de Kirby-Bauer)”

Análisis de

varios antibióticos en un mismo ensayo

Resistente

(No hay halo de inhibición)

Sensible

(Presencia de halos de inhibición)

slide10

Factores que afectan la actividad antibacteriana“in vitro”…

  • pH del medio de cultivo:algunos antibióticos son activos a pH ácido (nitrofurantoína) y otros lo son a pH alcalino (aminoglucósidos).
  • Componentes del medio de cultivo:pueden antagonizar al antibiótico (extracto de levadura antagoniza a sulfonamidas).
  • Estabilidad del medicamento:algunos antibióticos se inactivan a la temperatura de cultivo (clortetraciclina, en menor grado penicilina)
  • Tamaño del inóculo:si hay muchas bacterias, la susceptibilidad es menor y pueden aparecer mutantes resistentes.
  • Tiempo de incubación:si es muy breve los m.o. no mueren; si es muy largo, pueden aparecer mutantes resistentes o inactivarse el medicamento.
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