1 / 40

Molekulární genetika v diagnostice a výzkumu dětských akutních leukemií

Molekulární genetika v diagnostice a výzkumu dětských akutních leukemií. J an Trka Childhood Leukaemia Investigation Prague Klinika dětské hematologie a onkologie, UK 2.LF. Molekulární genetika v diagnostice & výzkumu akutních leukemií. CHEMOTERAPIE. ETIOLOGIE. URČENÍ RIZIKA.

leyna
Download Presentation

Molekulární genetika v diagnostice a výzkumu dětských akutních leukemií

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Molekulární genetika v diagnosticea výzkumu dětských akutních leukemií Jan Trka Childhood Leukaemia Investigation Prague Klinika dětské hematologie a onkologie, UK 2.LF

  2. Molekulární genetika v diagnostice & výzkumu akutních leukemií CHEMOTERAPIE ETIOLOGIE URČENÍ RIZIKA SLEDOVÁNÍ MRN VÝBĚR PROTOKOLU Diagnosa Relaps Dobrá rada...

  3. Česká republika 2005: 66 nově diagnostikovaných ALL 9 nově diagnostikovaných AML Dětské akutní leukemie Akutní lymfoblastická leukemie (ALL) = nejčastější dětská malignita

  4. Vývoj prognosy dětské ALL60. – 90. léta, SJCRH Pui & Evans, NEJM 1998

  5. Zlepšení prognosy dětské ALL Nové léky…? Transplantace hemopoetických progenitorů…? Intensivní chemoterapie Nová schémata léčby: indukce – konsolidace – reindukce – udržovací Prevence CNS leukemie Podpůrná léčba Stratifikační kriteria Cytogenetika - molekulární genetika - imunologie

  6. Molekulární genetika v diagnostice & výzkumu akutních leukemií Určení rizika Výběr protokolu

  7. Genotypové subtypy dětských ALL ALL heterogenní skupina onemocnění různé genotypy = klinické důsledky Náhodné (?) 28% Hypodiploidie 1% E2A/PBX1 5% Hyperdiploidie 25% MYC 2% TcR ad, b 7% MLL 6% 11q23 TEL/AML1 22% t(12;21) BCR/ABL 3% t(9;22)

  8. Zlepšení prognosy dětské ALL Cytogenetika Mol. genetika Imunologie Prognosa t(9;22) BCR/ABL  t(4;11) MLL/AF4  t(1;19) E2A/PBX1 ~ () t(12;21) TEL/AML1 ~ () hyperdiploidie hyperdiploidie  hypodiploidie hypodiploidie  imunofenotyp residuální nemoc residuální nemoc 

  9. ALL BFM 95 (CZ)[n = 365; median sledování = 54M] 1 TEL/AML1+: n=85 (16 events) ,8 Ostatní: n=270 (65 events) ,6 EFS ,4 ,2 BCR/ABL+: n=9 (8 events) 0 0 20 40 60 80 100 Doba sledování (měsíce)

  10. Molekulární genetika v diagnostice & výzkumu akutních leukemií Sledování MRN

  11. Relaps Terapie Leukemický klon x Minimální Residuální Nemoc Minimální residuální nemoc

  12. Y T Y v v Y v v V X T Y V T Jak detekovat MRN? FISH Chromosomální aberace Průtoková cytometrie Kombinace antigenů RQ-PCR Přestavby Ig/TCR RQ-RT-PCR Fusní geny

  13. Minimální residuální nemoc & ALL Metoda RQ-RT-PCR: vysoká citlivost

  14. MRN MRN MRN MRN MRN Dobrá prognosa Pacient 2 Špatná prognosa (RELAPS) Minimální residuální nemoc & ALL Pacient 1

  15. Význam MRN v terapii ALL „Front-line“ léčba ALL Transplantovaní pacienti Léčba relapsu Isolované mimodřeňové relapsy

  16. Nízké riziko (n=55) Střední riziko (n=55) Vysoké riziko (n=19) Léčebné výsledky podle kriterií MRN 100 80 60 % Event Free Survival 40 20 p (trend)<0.001 0 0 10 20 30 40 50 60 [měsíce] van Dongen et al, Lancet 1998

  17. Jak využít analysu MRNve „front-line“ léčbě ALL? II SR R 12 Gy*, in IR only for T-ALL III 10 weeks interim maintenance with 6-MP / MTX III II IR R M I 12 Gy*, in IR only for T-ALL III III III 6-MP/MTX 4 Wks. 6-MP/MTX 4 Wks. • HR • PRED-PR • IR, M3 d15 • t(9;22) • t(4;11) • NR d33 H R 2 H R 3 H R 1 R SC T# H R 2 H R 3 H R 1 II 12Gy* 52. týden 5 0 10 12

  18. P<0.001 Hladina MRN před transplantací určuje prognosu Krejčí et al, Bone Marrow Transpl 2003

  19. Molekulární genetika v diagnostice & výzkumu akutních leukemií Etiologie

  20. Mají dětské akutní leukemie jednu společnou příčinu…? Rozhodně NE: • Exposice • Modifikující vlivy • Vrozená disposice • Náhoda • Historické i současné okolnosti ovlivňující naši genetickou výbavu a fysiologické vlastnosti

  21. Exposice karcinogenům Detoxifikační enzymy DNA reparační enzymy Poškození DNA Riziko malignity Teorie vzniku malignity

  22. Preleukemický klon Leukemický klon 1. zásah 2. zásah Dvojzásahová teorie vzniku ALL ?

  23. Vznikají akutní leukemie u dětíještě před narozením? • Vrozené leukemie • Leukemie novorozenců • Leukemie potraceného plodu • Konkordantní leukemie dvojčat

  24. Vznikají akutní leukemie u dětíještě před narozením? => OBĚ LEUKEMIE Z JEDNOHO KLONU Ford et al, Nature 1993

  25. Placentární anastomosy& fetofetální transfusní syndrom Monochorionní placenta monozygotních dvojčat s vaskulárními anastomosami (Strong & Corney, 1967) synové Jacoba Dirkszoona de Graeff, starosty Amsterodamu (neznámý autor, 1617; „Děti v zavinovačce“) Greaves et al, Blood 2003

  26. Konkordantní leukemie dvojčat latence 9 let 1882 Greaves et al, Blood 2003

  27. “Backtracking”:Zpětné sledování leukemického klonu (1) GK Dg Rel TCR Porod 5 let 9,5 roku

  28. Jak častý je prenatální původ dětské ALL? • monozygotní, monochorionní dvojčata ~100%(Gill Super et al, Blood 94; Mahmoud et al, MPO 95; Campbellet al, BJH 96; Ford et al, Blood 97; Ford et al, PNAS 98) • novorozenci & kojenci ~100%(Ridge et al, Leukemia 95; Gale et al, PNAS 97) • batolata & předškoláci > 50% (?)(Wiemels et al, Lancet 99; Fasching et al, Blood 00; Taub et al, Blood 02) • starší děti & adolescenti > 0%(Wiemels et al, Blood 99; Taub et al, Blood 02) • dospělí ?

  29. USA (SEER study) Incidence dětských ALL v ČRIII‘95-IX‘97 25 20 15 Počet případů 10 5 0 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 Věk při dg [roky]

  30. y = 0,1407x - 274,09 8 2 R = 0,6324 7 0 years 1 to 4 6 5 to 7 5 8 to 9 10 to 17 4 3 2 1 0 1980 1985 1990 1995 2000 Nárůst incidence ALL ve věkové skupině 1-4 roky (Česká republika) Hrušák et al, Leukemia 2002

  31. Incidence dětských ALL v ČRIII‘95-IX‘97 25 20 15 Počet případů 10 5 0 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 Věk při dg [roky]

  32. Incidence TEL/AML1+ ALL Česká republika (populační studie) Trka et al, Leukemia 1998 2-6 let USA (SJCRH) Rubnitz et al, Leukemia 1999

  33. Studie CLIP: TEL/AML1+ buňky ~3% pupečníkových krví Britská studie (ICR, UK): (Mori et al, Proc Natl Acad Sci USA 2002) TEL/AML1+ buňky >1% pupečníkových krví X ~40x > pravděpodobnost onemocnění TEL/AML1+ ALL Vede znik hybridního genu TEL/AML1 vždy k leukemii?

  34. TEL/AML1 del TEL Relaps Terapie Preleukemický klon Leukemický klon x Porod 1. zásah 2. zásah Dvojzásahová teorie vzniku ALLpříklad TEL/AML1+ ALL

  35. TEL/AML1 del TEL (1) del TEL (2) Terapie Preleukemický klon Leukemický klon 1 Leukemický klon 2 x Porod 1. zásah 3. zásah 2. zásah TEL/AML1+ ALL:relaps nebo nová leukemie?

  36. Infekční hypothesa Sellafield (Seascale village), Cumbrie, Anglie Dounreay (Thurso town),Skotsko X Glenrothes,Skotsko • Kinlen „population mixing theory“: • infekce dosud neznámým virem způsobujícím normálně banální infekci • X • Greaves „delayed-infection theory“: • imunitní buněčná síť (= subtypy T buněka cytokinová) abuněčný repertoárbyly naprogramovány historickými událostmi (smrtelné infekce a genetická selekce) tak,aby předpokládaly exposici těmto infekcím v novorozeneckém a kojeneckém věku • tato exposice je rozhodující pro adaptivní organisaci imunitní odpovědi

  37. Infekční hypothesa Mel Greaves, Nature Reviews Cancer 6, 193-203 (March 2006)

  38. Molekulární genetika v diagnostice & výzkumu akutních leukemií Dobrá rada...

  39. Postgraduální studium…? N Pe Studium Práce Postgraduální studium P A A

  40. Vhodný výběr školitele

More Related