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TECNICAS INMUNOLÓGICAS CELULARES

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TECNICAS INMUNOLÓGICAS CELULARES. Prof. Caroline Weinstein. AISLAMIENTO DE LINFOCITOS. AISLAMIENTO DE LINFOCITOS. ENSAYO INCORPORACIÓN TIMIDINA TRITIADA (FUNCIONAL). INCORPORACIÓN DE TIMIDINA TRITIADA. ENSAYO DE CITOTOXICIDAD (FUNCIONALIDAD). ENSAYO MTT:.

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Presentation Transcript
tecnicas inmunol gicas celulares

TECNICAS INMUNOLÓGICAS CELULARES

Prof. Caroline Weinstein

slide5

ENSAYO INCORPORACIÓN TIMIDINA TRITIADA (FUNCIONAL)

INCORPORACIÓN DE TIMIDINA TRITIADA

slide9

CITOMETRIA DE FLUJO: UNA POTENTE HERRAMIENTA EN INMUNOLOGÍA

CITOMETRIA DE FLUJO: UNA POTENTE HERRAMIENTA EN INMUNOLOGÍA

slide17

Immunophenotyping

100

1000

10

1

.1

Log FITC

slide18

CD4/CD8 Quadstats

1

2

45%

2%

3

4

27%

26%

.1

1

10

100

1000

Log FITC Fluorescence (CD8)

otras aplicaciones citometria de flujo
Otras aplicaciones citometria de flujo
  • Evaluación funcional de la capacidad oxidasas (NADPH dependiente) de los neutrófilos

neutrófilo

dihidrorodamina

DIHIDRORODAMINA OXIDADA

PMA

slide31

EJERCICIOS:

La figura anterior representa un resultado de un ensayo de citotoxicidad para

linfocitos CD8. Al respecto explique:

Fundamento del método.

Identifique que curva representa una menor actividad citotóxica

slide32

CD4

CD8

EJERCICIOS:

Dibuje una nube de puntos en el siguiente gráfico que represente

los resultados de citometría de flujo de un paciente que no posee linfocitos CD8

slide33

CD4

CD8

EJERCICIOS:

  • Con respecto a la prueba de incorporación de timidina tritiada:
  • Explique el fundamento del método
  • b. Métodos alternativos.
  • c. Cómo espera encontrarla en un individuo cuyo informe de citometría de flujo es el siguiente.
  • Fundamente su respuesta.
slide34

EJERCICIOS:

Un científico japonés sostiene que el cáncer se produce por una inmunodepresión.

Describa un ensayo que le permita detectar una respuesta inmune deprimida

ante tumores.

slide35

EJERCICIOS:

Usted ha sido contratado para ser el jefe del laboratorio de seguimiento de pacientes

HIV positivos. Debe implementar una técnica para analizar las subpoblaciones

linfocitarias.

Describa la técnica escogida, haciendo un análisis crítico (ventajas y desventajas)