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BRUCELLA. Clase: Proteobacteria Subclase: Alfa Orden: Rizobiales Familia: Brucellaceae Género: Brucella. TAXONOMIA. GENERO BRUCELLA. HUÉSPEDES HABITUALES. ESPECIE. abortus (8 biovars) suis (5 biovars) melitensis (3 biovars) canis (1 biovar) ovis (1 biovar)

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slide2

Clase: Proteobacteria

Subclase: Alfa

Orden: Rizobiales

Familia: Brucellaceae

Género: Brucella

TAXONOMIA

slide3

GENERO BRUCELLA

HUÉSPEDES

HABITUALES

ESPECIE

abortus (8 biovars)

suis (5 biovars)

melitensis (3 biovars)

canis (1 biovar)

ovis (1 biovar)

neotomae (1 biovar)

maris (2 biovars)

BOVINO

PORCINO

CAPRINO

OVINO

CANINO

OVINO

ROEDORES

MAMÍFEROS

MARINOS

slide4

AISLAMIENTO DE LAS ESPECIES DE Brucella

1886 - Bruce - Br. melitensis del hombre

1897 - Bang - Br. abortus de bovinos

1914 - Traum - Br. suis de porcinos

1953 - Buddle y Boyes - Br. ovis de ovinos

1957 - Stoenner y Lackman - Br. neotomae de ratas

1966 - Carmichael - Br. canis de caninos

1994 – Ross et al – Br. cetaceae de delfines, bufeos

1994 – Ross et al – Br. pinnipediae de focas

slide5

CARÁCTERÍSTICAS DEL MICROORGANISMO

COCOBACILO AEROBIO, GRAM NEGATIVO,

INTRACELULAR FACULTATIVO.

INMOVIL, NO ESPORULADO, NO CAPSULADO.

SE TIÑE DE COLOR ROSADO CON LA TINCIÓN

MODIFICADA DE ZIEHL-NIELSEN.

NECESIDAD DE CO2

slide6

RELACIÓN CON LA CÉLULA HOSPEDADORA

Membrana celular

Intracelulares facultativos

Intracelulares obligados

Célula hospedadora

Extracelulares

slide7

TIPOS CARACTERÍSTICOS DE ENVOLTURA

  • GRAM +
  • GLUCOPÉPTIDO
  • PROTEÍNAS
  • ÁCIDO LIPOTEICOICO
  • ÁCIDOS
  • TEICURÓNICOS
  • POLISACÁRIDOS
  • AAR
  • GLUCOPÉPTIDO
  • POLIPÉPTIDOS
  • GLUCOLÍPIDOS
  • ÁCIDO MICÓLICO
  • ARABINOGALACTANOS
  • CERA DE
  • SULFOLÍPIDOS
  • MICÓSIDOS
  • GRAM -
  • GLUCOPÉPTIDO
  • LIPOPROTEÍNAS
  • MEMBRANA EXTERNA
  • LIPOPOLISACÁRIDOS
  • PROTEÍNAS
  • FOSFOLÍPIDOS
  • POLISACÁRIDOS
slide10

ESTRUCTURA ANTIGÉNICA

B. abortus

B. suis

B. melitensis

A

M

slide11

FAGOSOMA

Gránulo

secundario

5´GMP

NADPH oxidasa

NADPH NADP+

Gránulo

primario

Lisozima

Proteasas

Defensinas

O-2

H+

SOD

H2O2

catalasa

Cl-

Cl-

MPO

Lisozima

Lactoferrina

HOCl

DEGRADACIÓN

slide12

Proteínas portadoras

Bacteria

Sideróforo

Célula

Lactoferrina

Fe3+

Fe3+

Transferrina

Fe3+

Fe3+

Receptor

Fe2+

Hemoglobina

Fe2+

slide13

POSIBLES MECANISMOS DE SUPERVIVENCIA

  • PERMANECE EN EL FAGOSOMA INTACTO Y BLOQUEA LA FUSIÓN POSTERIOR CON EL LISOSOMA
  • DEBE RESISTIR POTENTES INTERMEDIARIOS DEL O2 (H2O2 Y RADICALES OXHIDRILOS)
  • INHIBE EL ESTALLIDO RESPIRATORIO O LO PROVOCA MUY DÉBILMENTE Y DE CORTA DURACIÓN)
  • SE PUEDE REFUGIAR FUERA DEL ALCANCE DEL LISOSOMA. SE DESCRIBIÓ SU PRESENCIA EN EL RER DE DIFERENTES CÉLULAS, AUNQUE NO EN MACRÓFAGOS
  • PRODUCCIÓN DE GUANOSINA 5´MONOFOSFATO (GMP) Y ADENINA QUE INHIBEN FUSION FAGO-LISOSOMA, DEGRANULACIÓN, ACTIVACIÓN SISTEMA MIELOPEROXIDASA-HALURO Y LA PRODUCCIÓN DE TNF
selecci n de muestras
SELECCIÓN DE MUESTRAS
  • SUERO, CALOSTRO, LECHE
  • FLUJO VAGINAL, PLACENTA Y COTILEDONES
  • SEMEN
  • LIQ. ABCESOS, HIGROMAS, BURSITIS

ANIMALES VIVOS

PRODUCTOS DE

ABORTO

  • CONTENIDO CUAJAR
  • PULMÓN, BAZO
  • MEMBRANAS FETALES
slide17

DIAGNÓSTICO

  • HISTOPATOLÓGICO
  • SEROLÓGICO
  • BACTERIOLÓGICO
slide18

DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO

  • Método de Köster
  • Método de Ziehl-Neelsen modificado
  • Inmunofluorescencia

TÉCNICAS BACTERIOSCÓPICAS

  • Medios sólidos
  • Medios líquidos
  • Medio difásico

PROCEDIMIENTOS DE CULTIVO

  • Cobayos
  • Lauchas
  • Hámsters

INOCULACION EXPERIMENTAL

diferenciaci n de especies
Diferenciación de especies
  • Ureasa
  • requerimiento de CO2
  • producción de SH2
  • desarrollo en presencia de tionina
  • desarrollo en presencia de fucsina
  • aglutinación con sueros monoespecíficos
  • tipificación por bacteriófagos
slide24

MEDIO DE CASTAÑEDA

Usado de humanos para hemocultivo

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RESISTENCIA

LISIS POR FAGO

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COLORACIÓN DE STAMP

COLORACIÓN DE STAMP

COLORACIÓN DE STAMP

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PRUEBAS PARA MEDIR E IDENTIFICAR LA RESPUESTA INMUNE

  • TEST DE ELISA
  • INMUNOFLUORESCENCIA
  • RADIOINMUNOENSAYO

PRIMARIAS

  • AGLUTINACIÓN
  • PRECIPITACIÓN
  • FIJ COMPLEMENTO

SECUNDARIAS

  • NEUTRALIZACIÓN
  • PROTECCIÓN

TERCIARIAS

PRUEBAS BÁSICAS

MOLECULARES

  • PCR
  • HIBRIDACIÓN
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TÉCNICAS UTILIZADAS

  • PRUEBA TAMIZ: BPA
  • PRUEBAS COMPLEMENTARIAS: 2 MERCAPTOETANOL - RIVANOL
  • PRUEBA DEFINITORIA: FIJ COMPLEMENTO
  • PRUEBA DE VIGILANCIA EPIDEMIOLÓGICA: PRUEBA ANILLO EN LECHE (PAL)
  • OTRAS: ELISA-I, ELISA-C