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Respuestas fisiológicas de Neotrypaea uncinata ( Decapoda : Thalassinidea ) a la hipoxia y al parasitismo por Ionella agassizi ( Isopoda : Epicaridea ). Autores: Lorena P. Astete-Espinoza1, Claudia F. Garrido1 y Cristian W. Cáceres1. Javi González Vázquez. Introducción:.

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Presentation Transcript
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Respuestas fisiológicas de Neotrypaeauncinata (Decapoda:

Thalassinidea) a la hipoxia y al parasitismo por

Ionellaagassizi (Isopoda: Epicaridea)

Autores: Lorena P. Astete-Espinoza1, Claudia F. Garrido1 y Cristian W. Cáceres1

Javi González Vázquez

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Introducción:

  • Crustáceo excavador.
  • Habita playas y estuarios.
  • Su condición excavadora le expone a situaciones deficitarias de oxígeno.
  • Mecanismos compensatorios definidos en este tipo de situaciones:
    • Aumento en la [ emocianina]
    • Aumento de la afinidad de la emocianinapor el oxígeno
    • Cambios en el metabolismo de la glucosa y del lactato (aumenta y es usado para producir glucosa)
  • Neotrypaeauncinataparasitado desde etapas tempranas por Ionellaagassizi.
    • En la cámara branquial (rotura)
  • Hipótesis: la presencia del parásito Ionellaagassiziafecta a los mecanismos
  • respiratorios y a las vías energéticas de Neotrypaeauncinata, limitando su capacidad para soportar periodos de déficit de oxígeno.
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Materiales y métodos:

  • Recolección de ejemplares:
    • Número: 300 ejemplares.
    • Localización: Lenga, Bahía San Vicente, zona centro sur de Chile (36º 45’S;73º10’W)
    • Método: bomba extractora manual.
  • Medidas y tratamientos previos :
    • 135 de los 300, fueron pesados y medido su cefalotorax (LCT)
    • Revisión visual de la presencia o ausencia del parásito.
  • Experimentos:
    • 55 camarones se usaron para evaluar el efecto del parásito en el área superficial branquial.
    • 80 camarones expuestos a diferentes condiciones de [oxígeno]
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40 sin parasitar

Recipientes

400 ml

Salinidad= mar

Tª= 14°C

80 camarones

40 parasitados

2 x 4 Tratamientos experimentales

1º Control Normoxia

N= 10

[oxígeno]= 4,5 mg/l

2º Hipoxia 3h

N=10

[oxígeno]= 1 mg/l

3º Hipoxia 24h

N=10

[oxígeno]= 1 mg/l

4º Hipoxia 72h

N=10

[oxígeno]= 1 mg/l

Hipoxia generada mediante burbujeo de nitrógeno.

Al terminar la exposición se les extraen 0,3 ml de hemolinfa mediante punción en la zona pericárdica, para su análisis.

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Análisis a partir de la hemolinfa extraida:

    • Determinación de proteínas totales: método de Biuret (Layne 1957)
    • Determinación de los niveles de hemocianina: método descrito por Chen & Cheng (1993). Se utilizó el coeficiente de extinción de 17,26 E mM 1cm-1 (Nickerson & Van Holde1971)
    • Determinación de los niveles de glucosa: método enzimático de punto final (Trinder)
    • Determinación de los niveles de Lactato: por colorimetría.
    • Determinación de los niveles de LDH: se usó como sustrato piruvato y NADH red.
    • Relación entre área branquial y tamaño corporal de individuos parasitados y no parasitados: análisis de regresión lineal.
    • Evaluación del efecto del tiempo de exposición a condiciones de hipoxia y el efecto del parasitismo sobre los niveles de los metabolitoshemolinfáticos: análisis de varianza. (ANDEVA)
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Discusión:

  • Bahía San Vicente: constantes fluctuaciones de salinidad, temperatura, oxígeno y sedimentos con bajo potencial redox, característico de ambientes hipóxicos.
  • Estas fluctuaciones condicionan la fisiología de los camarones.
  • Además se suma el parasitismo por Ionellaagassizi,que a nivel individual afecta la reproducción de suhospedador.
  • La presencia de Ionellaagassizien la cámara branquial del camarón Neotrypaeauncinataafecta la superficie de intercambio gaseoso, presentando una disminución significativa del área branquial en comparación con los organismos no parasitados (Fig. 1)
  • Se ha descrito que en condiciones de falta de oxígeno los crustáceos favorecen la síntesis de hemocianina. (Fig. 2)
  • En normoxia se observan niveles similares de hemocianina.
  • Animales muy tolerantes al Lactato, acostumbrados a periodos de hipoxia, la [lactato] aumenta en las primeras horas (sustrato gluconeogénico) y bajan en horas posteriores
  • (Fig. 2) (lactato deshidrogenasa)
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CONCLUSIÓN

Los niveles de lactato encontrados en Neotrypaeauncinata, correlacionados con las concentraciones deglucosa estarían indicando que estos individuos utilizaríanalternativamente vías anaerobias ya que debido a suconducta excavadora en un medio de concentraciones deoxígeno variables.

Contrario a lo esperado, esta respuestaadaptativa no estaría más acentuada en los individuosparasitados, debido a un efecto compensatorio a nivelmolecular o fisiológico que le permitiría al camarónfantasma contrarrestar el efecto del parasitismo o elparásito genere bajas demandas a su hospedador.