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  1. GRUPO HPA

  2. INTRODUCCIÓN • FLIA. Pasteurellaceae • RECLASIFICACIÓN EN 1996 • SECCIÓN XVII VOL 2 (BERGEY) • GROS. Actinobacillus, Haemophilus, Pasteurella y Mannheimia

  3. INTRODUCCIÓN • ORGANISMOS GRAM NEGATIVOS, PATÓGENOS PARA ANIMALES (mamíferos y aves) Y HOMBRE • PROCESOS SEPTICÉMICOS Y RESPIRATORIOS • INVOLUCRADOS EN CUADROS POLIMICROBIANOS

  4. GÉNERO Actinobacillus

  5. CARACTERÍSTICAS • BACILOS DE 0,4 X 1 HASTA 6 MICRAS • INMÓVILES, NO ESPORULADOS • FINA CAPA DE “SLIME” (ADHERENCIA DE COLONIAS AL AGAR) • UTILIZAN CARBOHIDRATOS CON PRODUCCIÓN DE ÁCIDO SIN GAS

  6. MORFOLOGÍA Y TINCIÓN A. lignieresii A. suis

  7. CARACTERÍSTICAS • ESPECIES PRINCIPALES: A. lignieresii, A. equuli, A. suis, A. pleuropneumoniae • ORGANISMOS EXIGENTES, AEROBIOS O MICROAERÓFILOS (5% CO2) • A. pleuropneumoniae REQUIERE FACTOR V (NAD) • COLONIAS PEQUEÑAS, REDONDAS, BLANQUECINAS

  8. SATELITISMO A. pleuropneumoniae

  9. COLONIASA. pleuropneumoniae

  10. CARACTERÍSTICAS • SUPERVIVENCIA LIMITADA EN AMBIENTE • SENSIBLES A ANTIBIÓTICOS DE USO FRECUENTE • COMENSALES EN MUCOSAS RESPIRATORIA Y DIGESTIVA • GRAN VARIEDAD DE HOSPEDADORES

  11. ESTRUCTURA ANTIGÉNICA • ANTÍGENOS TERMOESTABLES (SOMÁTICOS Y CAPSULARES) Y TERMOLÁBILES (SUPERFICIE) • A. lignieresii: 6 TIPOS (TERMOESTA-BLES); A. equuli (28 GRUPOS –LPS-) • A. pleuropneumoniae (ANTÍGENOS CAPSULARES Y SOMÁTICOS)

  12. PODER PATÓGENO • A. lignieresii: COMENSAL CAVIDAD ORAL Y FARINGE EN RUMIANTES • CAUSA: LENGUA DE MADERA, PROCESO ESPORÁDICO TIPO GRANULOMATOSO • A. pleuropneumoniae: CAUSA PLEURONEUMONÍA FIBRINO-HEMORRÁGICA EN PORCINOS

  13. PODER PATÓGENO • TOXINAS RTX (Apx) (CITOLÍTICAS/CITOTÓXICAS). REPETICIONES DE NONAPÉPTICOS RICOS EN GLICINA • Apx1 HEMOLÍTICA Y CITOTÓXICA PARA MACRÓFAGOS Y NEUTRÓFILOS • OTROS: CÁPSULA, LPS, FIMBRIAS, SUPERÓXIDO DISMUTASA

  14. PODER PATÓGENO • A. equuli: ENFERMEDAD DEL POTRILLO DORMILÓN • LEUCOTOXINA, TOXINA TIPO RTX • A. suis: SEPTICEMIA, ARTRITIS, NEUMONÍA EN CERDOS • TOXINAS ApxI y ApxII

  15. AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN • MUESTRAS: LESIONES GRANULOMA-TOSAS, PLEURONEUMONÍA, etc. • REMITIR EN MEDIO DE TRANSPORTE • A. lignieresii: OBSERVACIÓN DIRECTA DE GRÁNULOS: BACILOS G – MEDIOS • A. pleuropneumoniae: IHQ, IFD

  16. AISLAMIENTO • AGAR SANGRE (BOVINO U OVINO) • ALGUNOS CRECEN EN McCONKEY • A. pleuropneumoniae: FACTOR V, AGAR CHOCOLATE • MAYOR DESARROLLO EN MICROAEROFILIA (1-3 DÍAS A 37ºC)

  17. IDENTIFICACIÓN • COLONIAS GRISES ADHERIDAS AL AGAR • COLONIAS “BLANDAS” Y “PEGAJOSAS” (RELACIÓN CON ESTRUCTURA LPS) • A. pleuropneumoniae, equuli y suis: HEMÓLISIS (EFECTO CAMP) • REACCIONES BIOQUÍMICAS: UREASA, FERMENTACIÓN DE CARBOHIDRATOS

  18. IDENTIFICACIÓN • A. pleuropneumoniae: SEROLOGÍA (HEMAGLUTINACIÓN INDIRECTA) • MÉTODOS MOLECULARES: REACCIÓN DE POLIMERASA EN CADENA (PCR)

  19. GÉNERO Haemophilus

  20. CARACTERÍSTICAS • BACILOS O COCOBACILOS 1 micra DE ANCHO Y LONGITUD VARIABLE • PLEOMÓRFICOS, INMÓVILES, AERO-BIOS Y ANAEROBIOS FACULTATIVOS • FERMENTAN CARBOHIDRATOS • NECESITAN FACTORES DE LA SANGRE (CARÁCTER NO EXCLUYENTE)

  21. FACTORES X y V

  22. FACTORES X y V

  23. HÁBITAT • COMENSALES EN APARATO RESPIRA-TORIO, BOCA, VAGINA, TRACTO G.I., MUCOSAS EN GENERAL • BAJA PERSISTENCIA EN AMBIENTE • ESPECIFIDAD DE HOSPEDADOR • H. somnus (RUMIANTES), H. parasuis (CERDOS), H. paragallinarum (AVES)

  24. ESTRUCTURA ANTIGÉNICA • GRAN HETEROGENEIDAD • H. parasuis: ANTÍGENOS TERMOES-TABLES, 16 SEROVARES POR PRECIPITACIÓN EN GEL DE AGAR • MUCHAS CEPAS NO TIPIFICABLES

  25. PODER PATÓGENO • CÁPSULA (H. influenzae) • LPS (H. paragallinarum, H. parasuis, H. somnus) (mortalidad en septicemias) • FACTORES DE ADHERENCIA (PILI) • PROTEÍNAS CAPTADORAS DE Fe

  26. PODER PATÓGENO • INFECCIONES SUPURATIVAS • H. somnus: VASCULITIS TROMBÓTICA, PROCESOS NECRÓTICOS Y HEMORRÁGICOS • H. parasuis: BRONCONEUMONÍAS SECUNDARIAS, ENF. DE GLÄSSER (poliserositis) • H. paragallinarum: CORIZA INFECCIOSA

  27. AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN • GRAN LABILIDAD DE LAS MUESTRAS • AGAR CHOCOLATE (FACTORES X y V), ADICIÓN DE ANTIBIÓTICOS • INCUBACIÓN EN 10% CO2 • COLONIAS DE HASTA 2 mm DIÁMETRO LUEGO DE 48 HS, BLANCAS, AMARI-LLENTAS, HEMÓLISIS SEGÚN ESPECIE

  28. AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN • POSIBLE ENRIQUECIMIENTO PREVIO EN CALDO • IDENTIFICACIÓN POR REACCIONES BIOQUÍMICAS: indol, ureasa, catalasa, oxidasa, producción de ácido a partir de carbohidratos • PCR: H. parasuis, H. paragallinarum

  29. H. parasuis

  30. H. influenzae

  31. GÉNEROS Pasteurella y Mannheimia

  32. INTRODUCCIÓN • REVISIÓN TAXONÓMICA DEL GÉNERO Pasteurella EN ÚLTIMAS DÉCADAS • DIVISIÓN DE ESPECIES CLÁSICAS EN SUBESPECIES Y CREACIÓN DE NUEVAS ESPECIES • CREACIÓN DEL GÉNERO Mannheimia

  33. CARACTERÍSTICAS • BACILOS O COCOBACILOS (0,3 – 1 µm x 1 – 2 µm), GRAM NEG., AISLADOS, PARES O CORTAS CADENAS • INMÓVILES, NO ESPORULADOS, ANAE-ROBIOS FACULTATIVOS, METABOLIS-MO RESPIRATORIO Y FERMENTATIVO • OXIDASA Y CATALASA POSITIVOS

  34. HÁBITAT • Pasteurella: MUCOSAS RESPIRATORIA Y DIGESTIVA DE MAMÍFEROS Y AVES • Mannheimia: CRIPTAS DE TONSILAS • PARTE DE MICROFLORA DE GANADO SANO

  35. ESTRUCTURA ANTIGÉNICA • ANTÍGENOS SOMÁTICOS Y CAPSULARES • P. multocida: 5 TIPOS CAPSULARES (A, B, D, E y F) Y 16 TIPOS SOMÁTICOS • SEROVARIEDADES: COMBINACIÓN DE AMBOS ANTÍGENOS • ASOCIADAS A ENFERMEDADES ESPECÍFICAS DE ANIMALES

  36. ESTRUCTURA ANTIGÉNICA • A:1, A:3, A:4 CÓLERA AVIAR • E:2, B:2 SEPTICEMIA HEMORRÁGICA BOVINOS Y BÚFALOS • Mannheimia haemolytica (EX P. haemolytica BIOGRUPO 1) • POCO VALOR DIFERENCIACIÓN ANTIGÉNICA

  37. PODER PATÓGENO • P. multocida (GRUPO D) TOXINA DERMONECRÓTICA CODIFICADA POR GEN toxA • PRODUCE OSTEOLISIS DE CORNETES NASALES (RINITIS ATRÓFICA CERDO) • CÁPSULA DE ÁC. HIALURÓNICO, LPS • ACTIVIDAD HEMOLÍTICA POST TRATAMIENTO CON TWEEN 80

  38. PODER PATÓGENO • FIMBRIAS TIPO IV: ADHESIÓN • M. haemolytica: EXOTOXINA PROTEICA (LEUCOTOXINA, Lkt), MIEMBRO DE TOXINAS RTX • MODULADORES DE LEUCOCITOS • EFECTOS DEPENDENDIENTES DE CONCENTRACIÓN DE TOXINA

  39. PODER PATÓGENO • Lkt FORMA COMPLEJOS CON LPS in vivo REFORZANDO ACTIVIDAD • TAMBIÉN PRESENTE EN P. multocida, P. aerogenes y P. trehalosi • PROTEÍNAS RECEPTORAS DE TRANSFERRINA (tpbA y tpbB)

  40. AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN • MUESTRAS DE ÓRGANOS O DE PUS, EXUDADOS, HISOPADOS, etc. • OBSERVACIÓN DIRECTA: TINCIÓN BIPOLAR, IF, IHQ • AGAR SANGRE Y AGAR McCONKEY (DIFERENCIAR ENTRE ESPECIES)

  41. OBSERVACIÓN DIRECTA

  42. AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN • COLONIAS BLANCO GRISÁCEAS, REDONDAS, BRILLANTES, MUCOIDEAS (CÁPSULA) • COLONIAS MUCOSAS A RUGOSAS LUEGO DE SUBCULTIVO • M. haemolytica: HEMÓLISIS, CRECIMIENTO EN McCONKEY • IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICA

  43. P. multocida

  44. M. haemolytica

  45. IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICA