1 / 17

Laboratorijska dijagnostika monoklonskih gamapatija

Laboratorijska dijagnostika monoklonskih gamapatija. Danica Matišić. DIJAGNOZA MONOKLONSKIH GAMAPATIJA OSNIVA SE NA NALAZU KLASIČNOG TRIJASA:. NALAZU MONOKLONSKOG IMUNOGLOBULINA U SERUMU I/ILI URINU INFILTRACIJE KOŠTANE SRŽI PLAZMA STANICAMA (>10%) OSTEOLITIČKIH ŽARIŠTA

gianna
Download Presentation

Laboratorijska dijagnostika monoklonskih gamapatija

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Laboratorijska dijagnostika monoklonskih gamapatija Danica Matišić

  2. DIJAGNOZA MONOKLONSKIH GAMAPATIJA OSNIVA SE NA NALAZU KLASIČNOG TRIJASA: • NALAZU MONOKLONSKOG IMUNOGLOBULINA U SERUMU I/ILI URINU • INFILTRACIJE KOŠTANE SRŽI PLAZMA STANICAMA (>10%) • OSTEOLITIČKIH ŽARIŠTA IMUNOKEMIJSKU METODU ZA ODREĐIVANJE RAZREDA I TIPA MONOKLONSKOG IMUNOGLOBULINA, PRVI PUT OPISALI SU GRABAR I WILLIAMS 1953.GOD.

  3. Laboratorijska dijagnostika obuhvaća: elektroforezu proteina, ukup.prot. Ig GAM,IF,β2m, kreatinin i Ca u serumu,te BJP u serumu i/ili urinu,SE,KKS

  4. LABORATORIJSKA EVALUACIJA MONOKLONSKOG PROTEINA Robert A, Kyle, David F. Keren,Raymond Alexanian,Usha Kallemuchikkal 1. Elektroforeza proteina u serumu i urinu: • nisko rezolucijske elektroforeze (2g/l) • visoko rezolucijske elektroforeze (1g/l)* 2. Kvantitativno određivanje imunoglobulina • Nefelometrijski ili turbidimetrijski* • Radijalna imunodifuzija 3. Definiranje razreda i tipa monoklonskog imunoglobulina • Imunofiksacija* • Imunoelektroforeza • Imunoselekcija • Imunosupstrakcija: moguća samo uz kapilarnu elektroforezu 4. Kvantitativno određivanje monoklonske komponente • Denzitometrijski 5. Kontrola kvalitete evaluacije monoklonskog proteina Ključna komponenta interne kontrole: direktan kontak biokemičara s kliničarem o slučaju koji je neuobičajene prirode ili ako postoji bilo koja diskrepansa u nalazu

  5. Elektroforeza serumskih proteina Vizualni pregled Klinička sumnja ili prisutnost monoklonske vrpce Bez promjena Bence Jones protein? Imunofiksacija i/ili imunoelektroforeza Elektroforeza proteina u mokraći (100 x ukonc. uzorak) Definicija M-P (određ. razreda i tipa) Prisutan BJ protein Negativ. nalaz Denzitometrijska kvantifikacija M-P Imunofiksacija i/ili imunoelektroforeza Imunofiksacija Opisni nalaz + klinička informacija daju tumačenje nalaza DIJAGNOSTIČKI ALGORITAM ZA DEFINICIJU MONOKLONSKOG PROTEINA Imunoelektroforeza KROHEM SKUPINAPododbor za laboratorijsku hematologiju i morfologijuIMUNOKEMIJA: D. Matišić, V. Preden-Kereković

  6. SL0BODNI LAKI LANCI - BJP serumska konc.SLL korelira samo s aktivnošću koštane srži, što znači da njihov nalaz može biti neovisan biljeg monoklonskih gamapatija jedan posebno važan aspekt SLL je njihov kratak poluživot: 2-3 sata za kapu i 5–6 sati za lambdu; što je 150 x kraće vrijeme od 21 dana koliko je poluživot IgG molekule tako konc. slobodnih lakih lanaca omogućuje vrlo brzo procjenu učinka kemoterapije: 92-128 dana brže nego konc. M Ig bolesnici koji su prema nalazu intaktnog M Ig, u remisiji mogu još uvijek imati povišenu konc. SLL što indicira ostatnu bolest koristeći isti argument, bolesnici čija konc SLL počinje rasti nakon modernog intenzivnog tretmana ide u prilog relapsu bolesti

  7. A.R. Bradwell: Free Light Chain Assay Razvoj Free Light Chain reagensaza kvantitativno određivanje slobodnih lakih lanaca, SLL, kapa (κ) ililambda (λ) tipa, otvorio je mogućnost njihovih aplikacija i povećao njihovu kliničku važnost

  8. Elektroforeza serumskih proteina Vizualni pregled Klinička sumnja ili prisutnost monoklonske vrpce Bez promjena Bence Jones protein? URIN I SERUM Imunofiksacija i/ili imunoelektroforeza FREELITE™ : SLLκ, SLLλ + κ/λ Definicija M-P (određ. razreda i tipa) Elektroforeza proteina u mokraći (100 x ukonc. uzorak) Denzitometrijska kvantifikacija M-P Negativ. nalaz Prisutan BJ protein Opisni nalaz + klinička informacija daju tumačenje nalaza Imunofiksacija i/ili imunoelektroforeza KROHEM SKUPINAPododbor za laboratorijsku hematologiju i morfologijuIMUNOKEMIJA: D. Matišić, V. Preden-Kereković Kod bolesnika s multiplim mijelomom, Waldenström makroglobulinemijom i amiloidozom potrebno je pratitipromjene u koncentraciji M-proteina svakih 1-2 mjdok je kod MGNZdovoljno je:1x u godini DIJAGNOSTIČKI ALGORITAM ZA DEFINICIJU MONOKLONSKOG PROTEINA

  9. SLL I BUBREŽNO OŠTEĆENJE: Paul W. Sanders Nakon filtracije SLL se vežu na heteromerične receptore koji se sastoje od kubilina i megalina i time injiciraju reapsorpciju u proksimalne tubule. Poslije endocitoze, SLL budu hidrolizirani i vraćeni kao AK u cirkulaciju SLL suotrovni: zbog potencijalnih interakcija sa svim dijelovima nefrona; Nefrotoksični potencijal SLL je ovisan o njihovoj fizikalno kemijskoj kompoziciji kao i utjecaju okoliša u kojem se nalaze Ovi faktori određuju tip i težinu oštećenja bubrega Laki lanci uzrokuju intracelularni oksidativni stres (NFκB,MCP1; varijabilna domena lakog lanca daje interakciju s THP...) Paraproteinemijske bubrežne bolesti dijelimo na primarne glomerularne i posljedične tubulo intersticijske bolesti. Odlaganje SLL je direktno odgovorno za patološke procese tubulo intersticijskog oštećenja.

  10. Koncentracija slobodnih lakih lanaca Ig ovisi o produkciji plazma stanica i bubrežnom klirensu. Kod nekih bolesnika s monoklonskom gamapatijom količina SLL ostaje ispod reapsorpcionog kapaciteta bubrega tako će abnormalna konc. serumskih SLL biti nedetektibilna u urinu u tim slučajevima rezultat SLL u urinu biti će nepouzdan Katzmann JA. i Hill P.G.(Mayo Clinic) pokazali su na velikom broju bolesnika, u dvije odvojene studije, da zbog oštećenja bubrega (približno 25 % bolesnika s monoklonskim gamapatijama) možemo naći lažno pozitivne nalaze SLL u serumu odnosno lažno negativne u urinu. Uz poliklonsku sintezu imunoglobulina i/ili bubrežnog oštećenja, naći ćemo10 – 20x povećanu sintezu lakih lanaca u serumu Bubrežna ekskrecijaSLLraste s koncentracijom u serumuali značajno opadakada je visoka koncentracija kombinirana sbubrežnim oštećenjem.

  11. Skupljanje 24 satnog urina je :mukotrpno za bolesnike i uglavnom netočno; -laboratorijski postupak evaluacije monoklonskog proteina seznatno produljuje Stoga mnogi kliničarisugeriraju da se 24 satni urin eliminira iz skriniga M-P Urin će se obrađivati diskontinuiranotj. kod raznih disproteinemija kao i za praćenje bolesti jednom kad je već monoklonski protein identificiran

  12. Elektroforeza serumskih proteina Vizualni pregled Klinička sumnja ili prisutnost monoklonske vrpce Bez promjena Bence Jones protein? SERUM Imunofiksacija i/ili imunoelektroforeza FREELITE™ : SLLκ, SLLλ + κ/λ Definicija M-P (određ. razreda i tipa) Elektroforeza proteina u mokraći (100 x ukonc. uzorak) Denzitometrijska kvantifikacija M-P Negativ. nalaz Prisutan BJ protein Opisni nalaz + klinička informacija daju tumačenje nalaza Imunofiksacija i/ili imunoelektroforeza KROHEM SKUPINAPododbor za laboratorijsku hematologiju i morfologijuIMUNOKEMIJA: D. Matišić, V. Preden-Kereković Kod bolesnika s multiplim mijelomom, Waldenström makroglobulinemijom i amiloidozom potrebno je pratitipromjene u koncentraciji M-proteina svakih 1-2 mjdok je kod MGNZdovoljno je:1x u godini DIJAGNOSTIČKI ALGORITAM ZA DEFINICIJU MONOKLONSKOG PROTEINA

  13. Gambro-Theralite TM High Cut offtechnology - M. Storr... ,Queen Elizabeth Hospital, Birmingham, UK (Albumin, IL-6, SLL, Mioglobin, β2m, Inulin, Vitamin B12 (1,3kD-68kD) (hemofiltracija ovisi o: protoku krvi; permeabilnosti membrane; hidrostatskomtlaku na membrani; površini hemofiltera) Pokusi in vitro i matematički modeli su pokazali da je uklanjanje FLC hemodijalizom ovisno o veličini pora dijalizacijske membrane- r>5 nm)

  14. Kristali Bence-Jones proteinaRazumijevanje strukture kristala BJP moglo bi biti ključno za razvoj selektivne terapije lijekovima. Microgravity Space is the laboratory of the next millennium Mikrogravitacijski uvjeti u svemiru su jedinstveni okoliš za istraživanja koja vode novim produktima i tehnologijama. STS-95 STS-80

  15. IgG = 47,36 g/l IgA = 0,36 g/l IgM = 0,28 g/l Kvantitativno određeni: BJP κ: 15,20 mg/l (3,30–19,40) BJP λ: 3190,0mg/l (5,71–26,30) Kapa/lambda: 0,00 (0,26 –1,65) International Staging System –ISS (Durie-Salmon) ß2m = 9,33 mg/l SE = 120 mm/h Kreatinin = 581 μmol/l Ureja = 54,2mmol/l

  16. Imunofiksacija: A- intaktne molekule Ig i B- slobodnih lakih lanaca -BJP A B ZLODI ZLODI “M” IgG LAMBDA tipa BJP LAMBDA tipa

  17. A.R. Bradwell – heavy chain/light chain – Hevylite TM - HLC

More Related