slide1 n.
Download
Skip this Video
Loading SlideShow in 5 Seconds..
ACTIVIDAD ENZIMÁTICA PowerPoint Presentation
Download Presentation
ACTIVIDAD ENZIMÁTICA

Loading in 2 Seconds...

play fullscreen
1 / 33

ACTIVIDAD ENZIMÁTICA - PowerPoint PPT Presentation


  • 146 Views
  • Uploaded on

ACTIVIDAD ENZIMÁTICA. ENZIMAS. Las enzimas son catalizadores proteicos que aceleran la velocidad de una reacción y no se consumen o modifican durante ésta. E. Fisher, 1894. D. Koshland, 1958. COFACTORES

loader
I am the owner, or an agent authorized to act on behalf of the owner, of the copyrighted work described.
capcha
Download Presentation

PowerPoint Slideshow about 'ACTIVIDAD ENZIMÁTICA' - cheri


An Image/Link below is provided (as is) to download presentation

Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author.While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server.


- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - E N D - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -
Presentation Transcript
slide4

ENZIMAS

Las enzimas son catalizadores proteicos que aceleran la velocidad de una reacción y no se consumen o modifican durante ésta.

slide10

E. Fisher, 1894

D. Koshland, 1958

slide11

COFACTORES

Son moléculas pequeñas no proteicas que son necesarias para que una enzima lleve a cabo su función

Moléculas orgánicas

slide13

Clasificación Internacional de las Enzimas

Óxido – Reductasas (reacciones de oxido- reducción)

Actúan sobre ": CH – OH "

Actúan sobre ": C = O "

Actúan sobre ": C = CH – "

Actúan sobre ": CH – NH2 "

Actúan sobre ": CH – NH – "

Hidrolasas (reacciones de hidrólisis)

Esteres

Enlaces glucosídicos

Enlaces pepsídicos

Otros enlaces C – N

Anhídridos de ácido

Transferasas (transferencia de grupos funcionales)

Grupos de un átomo de C

Grupos aldehídos o cetónicos

Grupos acilos

Grupos glucosilos

Grupos fosfatos

Grupos que contienen azufre

slide14

Liasas (Adición a los dobles enlaces)

: C = C :

: C = O

: C = N –

Isomerasas (reacción de isomerización)

Racemasas

Ligasas (Formación de enlaces con escisión de ATP)

: C – O

: C – N

: C – S

: C – C

slide16

Estado de transición (inestable)

Energía libre de activación de la reacción directa no catalizada

Energía libre de activación de la reacción inversa no catalizada

Estado inicial

Cambio global de energía libre de la reacción

Estado final

slide17

A + B P + Q

Las enzimas disminuyen la energía de activación

slide18

Michaelis- Menten

Estado estacionario

Es aquel en que la concentración de ES permanece constante

mseg

Fase de pre estado estacionario (mseg)

slide22

Ecuación de Henderson-Hasselbalch

(ionización de aminoácidos)

Aminoácidos en el sitio activo de la enzima

Comúnmente la velocidad de las reacciones enzimáticas dan curvas tipo campana (2 sitios mayoritarios de ionización)

slide23

Diseño de un ensayo enzimático

  • Para el diseño de un ensayo enzimático se requiere conocer la reacción que se analiza:
  • Cuáles son las especies que se requieren: sustrato, la o las coenzimas, el o los cofactores, entre otros;
  • La estequiometría completa,
  • Los efectos de pH, temperatura y fuerza iónica sobre la actividad de la enzima.
slide24

Debe de estar disponible un método para identificar y monitorear cualquier cambio físico, químico o biológico que ocurre durante la conversión del sustrato a producto.

Técnicas para determinar los cambios en las concentraciones de sustrato o producto:

Espectrofotometría

Fluorometría

La titulación ácido-base

El conteo radioactivo

slide25

Velocidad inicial de una reacción

Ocurre en los primeros minutos de la reacción, en donde existe una relación lineal que se mantiene cuando el consumo del sustrato no va más allá del 5% de la concentración inicial.

Los cambios en la linealidad de la reacción pueden deberse a una o varias causas:

El decremento en la concentración de sustrato

La desnaturalización de la enzima

La inhibición causada por el producto de la reacción

slide26

Lactato deshidrogenasa de mamífero

El nombre científico es L-lactato: NAD+ oxidorreductasa (EC 1.1.1.27).

Es una enzima importante en el metabolismo anaerobio de la glucosa para la regeneración de ATP.

slide28

La LDH es un tetrámero cada subunidad tiene un peso molecular de 35 kDa.

Subunidad H predomina en el corazón

Subunidad M predomina en el músculo y el hígado

slide29

En la práctica se determinará la actividad de la LDH de músculo esquelético de bovino, enzima que contiene casi exclusivamente subunidades M.

El ensayo de actividad está basado en la detección del cambio de absorción del NADH y el NAD+.

El NADH es una molécula que absorbe a 340 nm, mientras que el NAD+ no.